發(fā)布時間：2017-12-03 08:15

  本文關鍵詞：克氏原螯蝦泛素結合酶E2r基因的克隆及表達分析

  更多相關文章： 泛素結合酶Er 性腺 原位雜交 Western blot 克氏原螯蝦

【摘要】：為了解泛素結合酶E2r基因在克氏原螯蝦性腺發(fā)育中的作用,利用RACE技術得到了c DNA全序列,命名為Pc-UBE2r。該基因序列全長為3 671 bp,包含泛素結合酶的特有結構域,以及半胱氨酸殘基活化位點。開放閱讀框為729 bp,編碼242個氨基酸,預測蛋白分子量約為27.6 ku。BLAST比對發(fā)現(xiàn),克氏原螯蝦UBE2r基因與節(jié)肢動物UBE2r基因具有較高的同源性。系統(tǒng)進化分析表明,Pc-UBE2r基因與日本囊對蝦聚為一枝。qRT-PCR研究表明,Pc-UBE2r基因在性腺中的表達量顯著高于其他組織(P0.05)。在卵巢中,PcUBE2r基因的表達量在未發(fā)育期最低,在卵黃發(fā)生前期表達量快速增長,隨后表達量逐漸降低。在精巢中,Pc-UBE2r基因的表達量在精母細胞發(fā)生期達到最高水平。組織原位雜交結果顯示,Pc-UBE2r基因在卵巢中均勻分布在未發(fā)育期的卵母細胞細胞質中,隨后逐漸遷移到卵母細胞細胞核以及濾泡細胞周圍。在精巢中,Pc-UBE2r基因主要分布在精母細胞的周圍。組織總蛋白Western blot檢測發(fā)現(xiàn),UBE2r蛋白在精巢和卵巢中的表達量也顯著高于其他組織(P0.05)。綜上所述,我們推測Pc-UBE2r基因在克氏原螯蝦配子發(fā)生和性腺發(fā)育方面發(fā)揮了重要作用,本研究將為蝦蟹類性腺發(fā)育調(diào)控的分子機制奠定基礎和提供依據(jù)。
【作者單位】： 上海海洋大學省部共建水產(chǎn)種質資源發(fā)掘與利用教育部重點實驗室;江蘇省淡水水產(chǎn)研究所;
【基金】：上海工程技術中心能力提升項目(13DZ2280500) 水產(chǎn)動物遺傳育種中心上海市協(xié)同創(chuàng)新中心項目(ZF1206)
【分類號】：S917.4
【正文快照】： 克氏原螯蝦(Procambarus clarkii)又名小龍蝦,原產(chǎn)于美國中南部以及墨西哥東北部[1],因其味道鮮美和營養(yǎng)豐富,已成為我國重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖物種之一[2-3]。近年來,國內(nèi)外克氏原螯蝦的消費需求量快速增長[4-6],優(yōu)質苗種的缺乏在一定程度上約束了克氏原螯蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。性腺發(fā)

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本文編號：1248008