本文關(guān)鍵詞：中國(guó)水仙NtSAMT基因的克隆及轉(zhuǎn)化金魚(yú)藤

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【摘要】：本研究以中國(guó)水仙花瓣總RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄PCR,擴(kuò)增得到與預(yù)期大小相同的PCR產(chǎn)物帶,回收反轉(zhuǎn)錄PCR產(chǎn)物,將其與p EASY-T1克隆載體連接并導(dǎo)入大腸桿菌DH5α進(jìn)行克隆,經(jīng)菌落PCR和雙酶切鑒定,篩選帶有目的基因的重組質(zhì)粒并進(jìn)行測(cè)序。測(cè)序結(jié)果表明中國(guó)水仙花香基因SAMT c DNA的ORF片段1 131 bp編碼376個(gè)氨基酸殘基,與已報(bào)導(dǎo)的中國(guó)水仙SAMT(JX273470)的同源性為99.2%。將目的基因片段與PBI121表達(dá)載體連接,并利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將Nt SAMT基因轉(zhuǎn)化到金魚(yú)藤(Asarina procumbens)中,以金魚(yú)藤無(wú)菌苗莖段為遺傳轉(zhuǎn)化外植體,通過(guò)抗性篩選獲得12株轉(zhuǎn)化植株,對(duì)獲得的12株疑似轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PCR檢測(cè),其中有8株呈陽(yáng)性;通過(guò)RT-PCR檢測(cè)得到的陽(yáng)性植株,其中有5株呈陽(yáng)性。檢測(cè)結(jié)果表明,該研究成功克隆水仙花Nt SAMT基因并在金魚(yú)藤植物中得到表達(dá)。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院;
【基金】：中國(guó)黑龍江省省教育廳項(xiàng)目(12531014)資助
【分類號(hào)】：S682.21
【正文快照】： 花香在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中起著重要的作用,同時(shí)它還可以提高植物的觀賞價(jià)值,近幾年隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,花香分子水平的研究已成為一大熱點(diǎn)。中國(guó)水仙(Narcissus tazetta L. var. chinensis roem)為石蒜科水仙屬植物,多年生草本,是我國(guó)傳統(tǒng)十大名花之一,冬季開(kāi)放,香味濃郁,觀

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本文編號(hào)：1242084