羅非魚(yú)補(bǔ)體C3基因的克隆及其表達(dá)分析
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【摘要】:[目的]獲得羅非魚(yú)補(bǔ)體C3并了解其在羅非魚(yú)免疫前后各組織中的表達(dá)特征。[方法]通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得補(bǔ)體C3片段,通過(guò)DNA Star、MEGA 6.06等分析其序列及理化特性;將經(jīng)純化獲得的Scp B蛋白以5μg/g的劑量免疫羅非魚(yú),利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定C3在各組魚(yú)體的表達(dá)變化。[結(jié)果]補(bǔ)體C3基因c DNA序列6 994 bp,ORF全長(zhǎng)5 361 bp,共編碼1 786個(gè)氨基酸。其在羅非魚(yú)肝臟中表達(dá)量最高,且免疫組肝臟中C3表達(dá)量在感染后4h時(shí)顯著高于對(duì)照組(p0.05);此外,感染前(0 h)免疫組頭腎和脾臟中C3表達(dá)量均顯著低于對(duì)照組(p0.05),但在感染后4~12h,免疫組表達(dá)量均呈升高趨勢(shì),而對(duì)照組則呈降低趨勢(shì)。[結(jié)論]抗原免疫可提高羅非魚(yú)感染無(wú)乳鏈球菌后組織中補(bǔ)體C3的表達(dá)量,補(bǔ)體C3在羅非魚(yú)抵御無(wú)乳鏈球菌感染過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
【作者單位】: 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部熱帶亞熱帶水產(chǎn)資源利用與養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院;
【基金】:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)資金項(xiàng)目(CARS-49) 農(nóng)業(yè)部淡水漁業(yè)和種質(zhì)資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題(KF201309)
【分類號(hào)】:S917.4
【正文快照】: 近年來(lái),由于羅非魚(yú)鏈球菌病的危害,我國(guó)羅非魚(yú)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)受到嚴(yán)重影響。研究表明,無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)也稱B群鏈球菌(Group BStreptococcus,GBS),是引起該病的主要病原。目前針對(duì)羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌病的免疫增強(qiáng)劑及多種疫苗候選抗原如Sip[1]、Lrr G[2]、Scp B[3
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