斑節(jié)對蝦泛素融合蛋白UbS27基因克隆與表達分析
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【摘要】:從構(gòu)建的斑節(jié)對蝦(Penaeus monodon)肝胰腺轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中篩選出泛素核糖體融合蛋白Ub S27基因(ubiquitin/ribosomal S27 fusion protein,Pm Ub S27)片段,利用SMART-RACE技術(shù)克隆出Pm Ub S27基因c DNA全長,并利用軟件對其結(jié)構(gòu)進行分析;利用實時熒光定量技術(shù)檢測Pm Ub S27基因在斑節(jié)對蝦不同組織及卵巢不同發(fā)育期的表達情況。結(jié)果顯示,Pm Ub S27基因c DNA全長為514 bp,開放閱讀框465 bp,編碼154個氨基酸,含有泛素(1~72 aa)和核糖體蛋白(101~147 aa)2個結(jié)構(gòu)域。以DNA為模板克隆得到的基因序列由3個內(nèi)含子和4個外顯子組成。實時熒光定量結(jié)果顯示,Pm Ub S27基因在斑節(jié)對蝦各組織中均有表達,但是在卵巢中表達量最高,其次為肝胰腺、血淋巴和精巢。Pm Ub S27在卵巢發(fā)育前期(Ⅱ期)和成熟期(Ⅴ期)的表達量顯著高于其他各期(P0.05)。結(jié)果表明,Pm Ub S27參與斑節(jié)對蝦卵巢發(fā)育的過程并可能在卵巢發(fā)育進程中起到重要的調(diào)控作用。
【作者單位】: 中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室;上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院;華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院;
【基金】:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項資金(CARS-47) 國家自然科學基金項目(210202019) 廣東省科技計劃項目(2013B020201001,2013B040402016) 海南省自然科學基金項目(313116) 中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務費專項資金(中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所)資助項目(2012TS27,2014TS12)
【分類號】:S917.4
【正文快照】: 泛素-蛋白酶體途徑(ubiquitin/proteasome path-way,UPP)是由以色列科學家HERSHKO、CIECH-ANOVER和美國科學家ROSE發(fā)現(xiàn)的泛素調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)降解的途徑[1]。在UPP途徑中泛素通過分別與泛素激活酶(E1)、泛素結(jié)合酶(E2)、泛素連接酶(E3)之間進行一系列級聯(lián)反應,最后以單體或不同結(jié)構(gòu)
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