黑曲霉C112纖維二糖酶基因的克隆與生物信息學(xué)分析
發(fā)布時(shí)間:2017-11-28 07:35
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【摘要】:以紫外誘變獲得的高產(chǎn)纖維素酶黑曲霉C112菌株為模板,采用RT-PCR技術(shù)克隆黑曲霉C112的纖維二糖酶基因bgl(Gen Bank登錄號(hào):KP307454);該基因全長(zhǎng)2 934 bp,含有非編碼序列,編碼860個(gè)氨基酸,等電點(diǎn)為4.70,核酸序列與數(shù)據(jù)庫(kù)的Aspergillus niger(Gen Bank登錄號(hào)JX982101.1)同源性達(dá)到了99%;生物信息學(xué)分析表明,纖維二糖酶為具有一定親水性的穩(wěn)定酸性分泌蛋白;二級(jí)結(jié)構(gòu)以α-螺旋、β-折疊和無(wú)規(guī)則卷曲為結(jié)構(gòu)元件;該基因經(jīng)IPTG誘導(dǎo)重組蛋白表達(dá),SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果表明,重組表達(dá)產(chǎn)物的相對(duì)分子量約為93.3 k D,與預(yù)期相符;纖維二糖酶在大腸桿菌BL21中胞內(nèi)融合表達(dá),重組蛋白p NPG酶活為5.847U/m L,最適反應(yīng)溫度為50℃,最適p H值為5.0。
【作者單位】: 中南林業(yè)科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【基金】:湖南省教育廳科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(13A123) 中南林業(yè)科技大學(xué)研究生科技創(chuàng)新基金項(xiàng)目(CX2014B30)
【分類號(hào)】:Q936
【正文快照】: 纖維二糖酶又稱為β-葡萄糖苷酶[1],能夠水解纖維二糖產(chǎn)生兩分子的葡萄糖[2],并能極大地促進(jìn)內(nèi)切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶的水解作用,加快纖維素酶系的整體水解速度,促使纖維素的水解更完全[3],F(xiàn)在對(duì)真菌中纖維二糖酶產(chǎn)生菌研究較多的是絲狀真菌,主要為曲霉屬和木霉屬[4],而
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
1 沈雪亮,夏黎明;固定化纖維二糖酶的研究[J];生物工程學(xué)報(bào);2003年02期
2 ;[J];;年期
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 陽(yáng)芳;嗜熱厭氧菌纖維二糖酶的克隆表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì)表征[D];華南理工大學(xué);2015年
,本文編號(hào):1233225
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