本文關鍵詞：辣椒MYB轉錄因子基因的克隆及表達分析

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【摘要】：辣椒素是辣椒屬植物特有的次生代謝,是物辣椒素類物質中的主要組成部分,也是辣椒辛辣味道的主要來源。眾多研究表明辣椒素在新型農藥、鎮(zhèn)痛、抗疲勞、抗腫瘤、美容、抗菌等領域具有重要的作用,因此研究辣椒素的合成途徑調控機制具有重要意義。辣椒素是由苯丙氨酸途徑合成的香草基胺和由支鏈脂肪酸途徑合成的8-甲基-6-癸烯酰經辣椒素合成酶(CS)催化縮合而成。CS基因啟動子含有TATA-box、CAAT-box、W-box、GATA-box、ABRE、TCA-element等多個順式作用元件,以及包含一個能夠與MYB轉錄因子結合的結合位點(CAACTG)。因此可以推測,MYB轉錄因子可以通過與CS啟動子序列中的MYB結合位點結合,產生互作,激活或者抑制辣椒素合成酶基因(CS)的表達,影響辣椒素合成途徑,最終影響了辣椒素的合成。本研究通過PCR技術在黃燈籠椒中獲得一個MYB轉錄因子基因,命名為Ccmyb,全長1038bp,編碼345個氨基酸。經過網站預測分析,Ccmyb包含有兩個螺旋-轉角-螺旋機構的MYB轉錄因子結構域,屬于R2R3-MYB轉錄因子家族。經過同源性分析發(fā)現(xiàn)與Lycopersicon esculentum Mill(番茄)和Solanum pennellii(野生種潘那利番茄)轉錄因子MYB44-like同源關系比較近。利用http://web.expasy.org網站對Ccmyb的蛋白進行分析,可知pI為8.57,Mw為38241.06,是一類定位在細胞核中的蛋白,無跨膜組織。利用RT-PCR技術分析了Ccmyb基因與3個辣椒素合成相關基因基因(Pun1,PAL,KAS)在黃燈籠椒根、莖、葉、花、果實、種子、胎座以及坐果期、綠熟期、轉色期、成熟期的果實的表達情況。發(fā)現(xiàn)Ccmyb基因在種子中的表達量最高,在花中表達量最低。而在不同發(fā)育時期的果實中轉色期中表達量最高;Pun1在種子中表達量最高,在花中表達量最低,不同發(fā)育時期的果實中在綠熟期表達量最高;KAS在葉中表達量最高,在花中表達量最低,不同發(fā)育時期的果實中在轉色期中表達量最高;PAL在根中表達量最高,在花中表達量最高,不同發(fā)育時期的果實中在坐果期表達量最高;Pun1作為編碼�；D移酶基因(AT3),是辣椒素合成酶(CS)的基因,對辣椒素合成途徑具有重要的調控作用,而Ccmyb基因與Pun1基因在不同組織和果實中表達趨勢基本一致,因此可以推測Ccmyb基因對辣椒素合成途徑有調控作用。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S641.3;Q943.2

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