本文關(guān)鍵詞：辣椒MYB轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及表達(dá)分析

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【摘要】：辣椒素是辣椒屬植物特有的次生代謝,是物辣椒素類物質(zhì)中的主要組成部分,也是辣椒辛辣味道的主要來源。眾多研究表明辣椒素在新型農(nóng)藥、鎮(zhèn)痛、抗疲勞、抗腫瘤、美容、抗菌等領(lǐng)域具有重要的作用,因此研究辣椒素的合成途徑調(diào)控機(jī)制具有重要意義。辣椒素是由苯丙氨酸途徑合成的香草基胺和由支鏈脂肪酸途徑合成的8-甲基-6-癸烯酰經(jīng)辣椒素合成酶(CS)催化縮合而成。CS基因啟動(dòng)子含有TATA-box、CAAT-box、W-box、GATA-box、ABRE、TCA-element等多個(gè)順式作用元件,以及包含一個(gè)能夠與MYB轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的結(jié)合位點(diǎn)(CAACTG)。因此可以推測(cè),MYB轉(zhuǎn)錄因子可以通過與CS啟動(dòng)子序列中的MYB結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合,產(chǎn)生互作,激活或者抑制辣椒素合成酶基因(CS)的表達(dá),影響辣椒素合成途徑,最終影響了辣椒素的合成。本研究通過PCR技術(shù)在黃燈籠椒中獲得一個(gè)MYB轉(zhuǎn)錄因子基因,命名為Ccmyb,全長(zhǎng)1038bp,編碼345個(gè)氨基酸。經(jīng)過網(wǎng)站預(yù)測(cè)分析,Ccmyb包含有兩個(gè)螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋機(jī)構(gòu)的MYB轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)域,屬于R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子家族。經(jīng)過同源性分析發(fā)現(xiàn)與Lycopersicon esculentum Mill(番茄)和Solanum pennellii(野生種潘那利番茄)轉(zhuǎn)錄因子MYB44-like同源關(guān)系比較近。利用http://web.expasy.org網(wǎng)站對(duì)Ccmyb的蛋白進(jìn)行分析,可知pI為8.57,Mw為38241.06,是一類定位在細(xì)胞核中的蛋白,無跨膜組織。利用RT-PCR技術(shù)分析了Ccmyb基因與3個(gè)辣椒素合成相關(guān)基因基因(Pun1,PAL,KAS)在黃燈籠椒根、莖、葉、花、果實(shí)、種子、胎座以及坐果期、綠熟期、轉(zhuǎn)色期、成熟期的果實(shí)的表達(dá)情況。發(fā)現(xiàn)Ccmyb基因在種子中的表達(dá)量最高,在花中表達(dá)量最低。而在不同發(fā)育時(shí)期的果實(shí)中轉(zhuǎn)色期中表達(dá)量最高;Pun1在種子中表達(dá)量最高,在花中表達(dá)量最低,不同發(fā)育時(shí)期的果實(shí)中在綠熟期表達(dá)量最高;KAS在葉中表達(dá)量最高,在花中表達(dá)量最低,不同發(fā)育時(shí)期的果實(shí)中在轉(zhuǎn)色期中表達(dá)量最高;PAL在根中表達(dá)量最高,在花中表達(dá)量最高,不同發(fā)育時(shí)期的果實(shí)中在坐果期表達(dá)量最高;Pun1作為編碼�；D(zhuǎn)移酶基因(AT3),是辣椒素合成酶(CS)的基因,對(duì)辣椒素合成途徑具有重要的調(diào)控作用,而Ccmyb基因與Pun1基因在不同組織和果實(shí)中表達(dá)趨勢(shì)基本一致,因此可以推測(cè)Ccmyb基因?qū)苯匪睾铣赏緩接姓{(diào)控作用。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S641.3;Q943.2

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本文編號(hào)：1209575