本文關(guān)鍵詞：檉柳GRAS轉(zhuǎn)錄因子基因啟動(dòng)子克隆和表達(dá)分析

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【摘要】：克隆獲得檉柳GRAS轉(zhuǎn)錄因子基因啟動(dòng)子序列,并對(duì)其表達(dá)模式進(jìn)行分析,從而初步探究GRAS轉(zhuǎn)錄因子基因的表達(dá)特征和功能。CTAB法提取剛毛檉柳基因組DNA,按照Genome Walking Kit說(shuō)明克隆GRAS轉(zhuǎn)錄因子基因啟動(dòng)子序列,將克隆獲得的GRAS轉(zhuǎn)錄因子基因啟動(dòng)子序列定向替換p CAMB1301載體上的35S啟動(dòng)子序列,構(gòu)建融合表達(dá)載體,以驅(qū)動(dòng)GUS基因表達(dá),瞬時(shí)侵染擬南芥后進(jìn)行GUS基因的染色。成功克隆獲得剛毛檉柳936 bp的GRAS轉(zhuǎn)錄因子基因啟動(dòng)子序列。PLACE和Plant CARE數(shù)據(jù)庫(kù)分析結(jié)果表明該啟動(dòng)子不僅包含啟動(dòng)子區(qū)的核心元件CAAT-box和TATA-box,還含有多個(gè)與逆境應(yīng)答有關(guān)的順式調(diào)控元件。成功將GRAS基因啟動(dòng)子序列定向置換p CAMBIA1301的35S啟動(dòng)子,構(gòu)建重組載體PGRAS::GUS。瞬時(shí)轉(zhuǎn)化擬南芥后GUS染色,結(jié)果顯示轉(zhuǎn)基因擬南芥葉片被染色而根部著色較淺。初步表明克隆獲得的GRAS基因啟動(dòng)子具有啟動(dòng)子表達(dá)活性,其可能參與了檉柳的抗逆應(yīng)答,為進(jìn)一步分析該基因的抗逆功能和抗逆機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 東北林業(yè)大學(xué)林木遺傳育種國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金“檉柳Dof轉(zhuǎn)錄因子的耐鹽調(diào)控機(jī)理研究”(31370676) 大學(xué)生創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練項(xiàng)目國(guó)家級(jí)(201410225068)
【分類(lèi)號(hào)】：S793.5
【正文快照】： analysis of the stress response function and mechanisms of GRAS gene in T.hispida.0引言GRAS蛋白家族在高等植物中廣泛存在,是一種植物特有的轉(zhuǎn)錄因子。其命名來(lái)自于3個(gè)最早被發(fā)現(xiàn)的擬南芥基因GAI(gibberellic acid insensitive)、RGA(repressor of GA1-3 mutant)和SCR(

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 錢(qián)錚;人類(lèi)DNA上啟動(dòng)子數(shù)量可能超過(guò)19萬(wàn)個(gè)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬洪鑫;ZHX2調(diào)控脂蛋白脂酶參與脂肪肝及肝細(xì)胞肝癌的作用及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

2 宋劍平;基質(zhì)金屬蛋白酶-3基因啟動(dòng)子區(qū)多態(tài)與散發(fā)性腦動(dòng)靜脈畸形的遺傳易感性分析與功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 楊予濤;一個(gè)光合組織特異表達(dá)啟動(dòng)子的克隆、功能分析及其轉(zhuǎn)錄因子的鑒定[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

4 楊曉敏;環(huán)加氧酶-2啟動(dòng)子區(qū)抑制性結(jié)合蛋白的鑒定和功能分析[D];南京醫(yī)科大學(xué);2007年

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7 陸超;人CD2AP基因啟動(dòng)子的鑒定及其功能研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

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10 岳揚(yáng)波;AAV-2 P5啟動(dòng)子功能的分子基礎(chǔ)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 何文s，

本文編號(hào)：1207308