本文關(guān)鍵詞：發(fā)狀念珠藻過(guò)氧化物還原酶NfPrx基因的克隆與表達(dá)分析

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【摘要】：過(guò)氧化物還原酶(peroxiredoxin,Prx)屬抗氧化蛋白超家族,為了探究Prx在發(fā)狀念珠藻抗逆過(guò)程中所具有的生物學(xué)功能,從發(fā)狀念珠藻細(xì)胞中克隆了NfPrx基因的完整開(kāi)放閱讀框(ORF),并對(duì)基因序列特征進(jìn)行了生物信息學(xué)分析,根據(jù)氨基酸序列預(yù)測(cè)了該蛋白的三維結(jié)構(gòu),在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了基因的融合表達(dá)載體并誘導(dǎo)其表達(dá),同時(shí)探討了PEG-6000脅迫下NfPrx的表達(dá)特性。結(jié)果表明,NfPrx包含612 bp的ORF,編碼203個(gè)氨基酸,NfPrx具有PRX_Typ2cys結(jié)構(gòu)域,屬于硫氧還蛋白超基因家族,與點(diǎn)形念珠藻、絲狀藍(lán)藻7507、微毛藻7126、池生念珠藻CENA21等物種的Prx氨基酸序列一致性高達(dá)94%以上。NfPrx與點(diǎn)形念珠藻處在同一進(jìn)化枝上,具有較近的親緣關(guān)系。利用所構(gòu)建的原核表達(dá)載體,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)和SDS-PAGE電泳,證實(shí)誘導(dǎo)表達(dá)的NfPrx蛋白與預(yù)期結(jié)果大小一致。qRT-PCR分析結(jié)果顯示,NfPrx的表達(dá)隨干旱脅迫程度的增加先增后降,PEG-6000濃度為8%時(shí),表達(dá)量達(dá)到峰值,根據(jù)表達(dá)特性,推測(cè)過(guò)氧化物還原酶可能參與響應(yīng)發(fā)狀念珠藻逆境脅迫過(guò)程。
【作者單位】： 寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院西部特色生物資源保護(hù)與利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31360025、31260023、31360361和31560418)~~
【分類(lèi)號(hào)】：Q943.2
【正文快照】： 收稿2016-06-07修定2016-07-20資助國(guó)家自然科學(xué)基金(31360025、31260023、31360361和31560418)。當(dāng)生物在遭受生物和非生物脅迫后,會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)的活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量增加,對(duì)細(xì)胞造成傷害,從而影響細(xì)胞的生長(zhǎng)(張海燕等2009)。生物在進(jìn)化過(guò)程中形成了一套完

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本文編號(hào)：1206543