本文關(guān)鍵詞：發(fā)狀念珠藻過氧化物還原酶NfPrx基因的克隆與表達分析

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【摘要】：過氧化物還原酶(peroxiredoxin,Prx)屬抗氧化蛋白超家族,為了探究Prx在發(fā)狀念珠藻抗逆過程中所具有的生物學功能,從發(fā)狀念珠藻細胞中克隆了NfPrx基因的完整開放閱讀框(ORF),并對基因序列特征進行了生物信息學分析,根據(jù)氨基酸序列預(yù)測了該蛋白的三維結(jié)構(gòu),在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了基因的融合表達載體并誘導其表達,同時探討了PEG-6000脅迫下NfPrx的表達特性。結(jié)果表明,NfPrx包含612 bp的ORF,編碼203個氨基酸,NfPrx具有PRX_Typ2cys結(jié)構(gòu)域,屬于硫氧還蛋白超基因家族,與點形念珠藻、絲狀藍藻7507、微毛藻7126、池生念珠藻CENA21等物種的Prx氨基酸序列一致性高達94%以上。NfPrx與點形念珠藻處在同一進化枝上,具有較近的親緣關(guān)系。利用所構(gòu)建的原核表達載體,經(jīng)IPTG誘導和SDS-PAGE電泳,證實誘導表達的NfPrx蛋白與預(yù)期結(jié)果大小一致。qRT-PCR分析結(jié)果顯示,NfPrx的表達隨干旱脅迫程度的增加先增后降,PEG-6000濃度為8%時,表達量達到峰值,根據(jù)表達特性,推測過氧化物還原酶可能參與響應(yīng)發(fā)狀念珠藻逆境脅迫過程。
【作者單位】： 寧夏大學生命科學學院西部特色生物資源保護與利用教育部重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金(31360025、31260023、31360361和31560418)~~
【分類號】：Q943.2
【正文快照】： 收稿2016-06-07修定2016-07-20資助國家自然科學基金(31360025、31260023、31360361和31560418)。當生物在遭受生物和非生物脅迫后,會導致體內(nèi)的活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量增加,對細胞造成傷害,從而影響細胞的生長(張海燕等2009)。生物在進化過程中形成了一套完

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本文編號：1206543