蘋果6-磷酸山梨醇脫氫酶基因啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)化及其轉(zhuǎn)錄活性
發(fā)布時(shí)間:2017-11-12 03:32
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【摘要】:【目的】研究6-磷酸山梨醇脫氫酶基因啟動(dòng)子(S6PDHp)的組織表達(dá)特點(diǎn)。【方法】利用Gateway技術(shù)構(gòu)建了S6PDHp與GUS基因的融合表達(dá)載體,然后通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化番茄"中蔬5號(hào)",對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PCR檢測,對(duì)鑒定為陽性的植株進(jìn)行GUS組織化學(xué)染色,驗(yàn)證S6PDHp的組織表達(dá)特性。【結(jié)果】將S6PDHp-GUS融合表達(dá)載體轉(zhuǎn)化番茄,經(jīng)PCR檢測顯示,成功獲得了轉(zhuǎn)S6PDHp基因的陽性番茄植株。對(duì)陽性植株各組織器官的GUS化學(xué)染色和活性檢測結(jié)果顯示,除葉片外許多器官都有很強(qiáng)的GUS活性,且在轉(zhuǎn)基因番茄成熟期植株的莖部活性最高,根部活性最低;葉片從新葉到老葉的各個(gè)時(shí)期,GUS活性持續(xù)降低。【結(jié)論】S6PDHp表達(dá)在植物衰老過程中降低;且在轉(zhuǎn)基因番茄莖部的GUS活性最強(qiáng),說明該啟動(dòng)子具有組織表達(dá)特異性。
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)園藝學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“蘋果6-磷酸山梨醇脫氫酶基因啟動(dòng)子的功能分析與應(yīng)用”(31201600) 國家蘋果產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目“生物技術(shù)與抗性育種”(CARS-28) 國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目“主要仁果類果樹新品種選育”(2013BAD02B01)
【分類號(hào)】:Q943.2
【正文快照】: 山梨醇(Sorbitol)是大多數(shù)薔薇科(Rosaceae)植物主要的光合產(chǎn)物,也是碳水化合物的主要轉(zhuǎn)運(yùn)形式和可溶性的貯藏碳水化合物,與其他植物中蔗糖的作用相似[1-2]。由于山梨醇具有許多重要的功能,因而植物體內(nèi)生成山梨醇的關(guān)鍵酶6-磷酸山梨醇脫氫酶(Sorbitol-6-phosphate dehydrogen
【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 況守龍;胡廷章;;啟動(dòng)子的克隆和研究方法[J];重慶工學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2007年01期
2 李志新;曹雙河;張相岐;張懷剛;;偽鵝觀草高分子量麥谷蛋白基因啟動(dòng)子的克隆[J];長江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版)農(nóng)學(xué)卷;2007年02期
3 高剛;魯艷芹;韓金祥;趙麗;;雙啟動(dòng)子對(duì)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白表達(dá)的影響[J];中國生物制品學(xué)雜志;2009年10期
4 郝迪,
本文編號(hào):1174183
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