本文關(guān)鍵詞：斧文蛤金屬硫蛋白基因的克隆與表達(dá)分析

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【摘要】：金屬硫蛋白(Metallothionein,MT)是一類富含半胱氨酸的小分子蛋白質(zhì),參與機(jī)體重金屬解毒、維持金屬元素代謝平衡以及清除自由基等生理功能。為了解斧文蛤金屬硫蛋白(Ml-MT)的分子生物學(xué)特征及其在重金屬Cd~(2+)脅迫下的響應(yīng)機(jī)制,本文采用RACE技術(shù)從斧文蛤(Meretrix lamarckii)總RNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中獲得了636 bp的Ml-MT c DNA基因序列。該序列包含65 bp的5′非編碼區(qū)(UTR)和340 bp的3′非編碼區(qū)(UTR)以及231 bp的開放閱讀框(ORF),可編碼76個(gè)氨基酸;其中半胱氨酸占27%,不含芳香族氨基酸,含16個(gè)MT所特有的Cys-Xn-Cys結(jié)構(gòu),預(yù)測(cè)的分子量約為7.704 k D,理論等電點(diǎn)7.138。MT氨基酸序列比對(duì)分析表明:斧文蛤金屬硫蛋白(Ml-MT)與麗文蛤(Meretrix lusoria)的相似性高達(dá)88%,與文蛤(Meretrix meretrix)的同源性為87%。實(shí)時(shí)熒光定量(q RT-PCR)檢測(cè)MT在斧文蛤5種組織中均有表達(dá),但存在組織特異性,其中內(nèi)臟團(tuán)表達(dá)量最高,其次依次為鰓絲、閉殼肌、外套膜、斧足。在Cd~(2+)(0.13 mg/L)脅迫0、6h、12h、24h、48h、72h和96h下,斧文蛤內(nèi)臟團(tuán)MT呈現(xiàn)出不同程度的上調(diào)表達(dá),具體表現(xiàn)為"高-低-高-低"的波浪式變化,除6h以外,其他時(shí)間點(diǎn)均與對(duì)照組存在極顯著差異(P0.01)。本研究表明:MT基因在維護(hù)機(jī)體正常生理功能及斧文蛤抵御重金屬Cd~(2+)脅迫過程中發(fā)揮著重要的分子調(diào)控作用。
【作者單位】： 浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所;浙江省近岸水域生物資源開發(fā)與保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院;溫州醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院;浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;
【基金】：海洋公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(201205021-5) 國(guó)家貝類產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-48) 國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31372503) 水產(chǎn)種質(zhì)資源平臺(tái)運(yùn)行服務(wù)(2015DKA30470)資助~~
【分類號(hào)】：S917.4
【正文快照】： 斧文蛤(Meretrix lamarckii)隸屬于瓣鰓綱(Lamellibranchia)、簾蛤目(Veneroida)、簾蛤科(Veneridae)、文蛤?qū)?Meretrix),是我國(guó)沿海重要的海水經(jīng)濟(jì)貝類種類之一[1]。斧文蛤營(yíng)埋棲型生活、靠濾水進(jìn)行呼吸及取食[2,3],因此可能極易受到環(huán)境重金屬的污染脅迫。金屬硫蛋白(Metall

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1 董迎輝;林志華;姚韓韓;;斧文蛤精子超微結(jié)構(gòu)與受精過程的細(xì)胞學(xué)變化[J];水產(chǎn)學(xué)報(bào);2011年03期

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1 張炯明;肖國(guó)強(qiáng);邵艷卿;方軍;柴雪良;;斧文蛤(Meretrix lamarkii Deshayes)人工繁育技術(shù)試驗(yàn)[A];中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)·中國(guó)海洋湖沼學(xué)會(huì)貝類學(xué)分會(huì)第九次會(huì)員代表大會(huì)暨第十五次學(xué)術(shù)討論會(huì)會(huì)議摘要集[C];2011年

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本文編號(hào)：1173659