本文關鍵詞：綿羊GDF9基因mRNA、DNA和調控區(qū)序列克隆及其在11個品種中遺傳多態(tài)性檢測

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【摘要】：本研究旨在克隆綿羊生長分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF9)基因mRNA、DNA和調控區(qū)全序列,并檢測其在11個綿羊品種中的遺傳多態(tài)性,探究GDF9基因與綿羊多羔性狀的關系。首先應用RACE和PCR技術克隆GDF9基因全長序列,其次利用SNaPshot分型技術檢測11個綿羊品種GDF9基因遺傳多態(tài)性。結果顯示,克隆獲得GDF9基因mRNA全長1 852bp(GenBank序列號:KR063137),編碼區(qū)兩側翼分別具有5′-UTR58bp(1~58nt)和3′-UTR 432bp(1 421~1 852nt)。進一步克隆獲得長為2 898bp的DNA序列和2 304bp的調控區(qū)序列,分析發(fā)現(xiàn)調控區(qū)序列比數據庫序列(NC_019462.1)多兩個長片段。序列比對發(fā)現(xiàn)了已知突變G260A(G1)和調控區(qū)新突變-2078CG。分型結果顯示,11個綿羊品種均不含F(xiàn)ecGE、FecGH、FecGT、FecGF、FecGV突變,而G260A和-2078CG廣泛存在于除草原型藏羊外的各綿羊品種中,G260A表現(xiàn)3種基因型(AA、BB和AB),首次在小尾寒羊和山谷型藏羊中檢測到BB型突變純合子。-2078CG也存在3種基因型,基因型結果表明該位點與G260A完全連鎖。關聯(lián)分析結果顯示,小尾寒羊AB型產羔數顯著高于AA型(P0.05)。本研究完善了綿羊GDF9mRNA、DNA和調控區(qū)全長序列,為進一步研究GDF9基因功能奠定了基礎。同時在不同綿羊品種中發(fā)現(xiàn)了G260A和-2078CG突變,其中G260A作為潛在的有效遺傳標記可用于提高綿羊的產羔數。
【作者單位】： 中國農業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所農業(yè)部畜禽遺傳資源與種質創(chuàng)新重點實驗室;
【基金】：中國農業(yè)科學院科技創(chuàng)新工程(ASTIP-IAS13) 國家肉羊產業(yè)技術體系專項(CARS-39) 國家自然科學基金項目(31472078) 國家轉基因科技重大專項(2016ZX08009-003-006,2016ZX08010-005-003) 內蒙古自治區(qū)戰(zhàn)略性新興產業(yè)發(fā)展專項資金計劃
【分類號】：S826
【正文快照】： 產羔數是綿羊最重要的繁殖性狀。作為轉化生長因子β超家族的一員,GDF9(Growth differentia-tion factor 9)通過旁分泌方式對卵泡的生長和分化起著重要作用[1-6],并在提高綿羊產羔數中扮演著重要角色。綿羊GDF9基因位于5號染色體[7],其包含2個外顯子和1個內含子,編碼456個氨基

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