本文關(guān)鍵詞：番茄多梳蛋白家族基因LeEMF2的功能分析

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【摘要】：多梳蛋白(Polycomb protein)在植物表觀遺傳調(diào)控中起重要作用。已公開的番茄轉(zhuǎn)錄組表明一個多梳蛋白基因Le EMF2在抗病番茄CLN2777A中受番茄黃化曲葉病毒(TYLCV)誘導(dǎo)表達。為明確Le EMF2抗TYLCV的作用,我們以CLN2777A為材料,通過RT-PCR克隆該基因全長序列,熒光定量PCR研究Le EMF2的表達模式,并利用病毒誘導(dǎo)的基因沉默(VIGS)技術(shù)研究Le EMF2沉默后對番茄抗TYLCV的影響。Le EMF2的開放閱讀框為1 917 bp,編碼長為638個氨基酸的蛋白。結(jié)構(gòu)域分析表明其含有一個C2H2鋅指結(jié)構(gòu)域以及一個VEFS盒,與擬南芥EMF2氨基酸相似度為58.3%。熒光定量PCR發(fā)現(xiàn)Le EMF2基因在花、根以及莖頂端生長點的表達量較高,在莖和老葉中表達量次之,在嫩葉中的表達量最低。接種TYLCV 5 d后,Le EMF2基因在CLN2777A中上調(diào)表達1倍左右,而在感病番茄TMXA48-4-0的表達則無明顯變化。通過農(nóng)桿菌浸潤法將VIGS沉默載體注射CLN2777A子葉15 d后,Le EMF2在沉默番茄植株中的表達量僅為野生型CLN2777A的13%~48%,且沉默株的植株新葉卷曲、皺縮,說明Le EMF2基因?qū)Ψ训纳L發(fā)育、形態(tài)建成具有重要作用。Le EMF2沉默植株接種TYLCV 15 d后,熒光定量PCR檢測發(fā)現(xiàn)沉默植株的病毒量為野生型植株的1.7倍,說明Le EMF2對TYLCV的抗性作用有一定的影響。
【作者單位】： 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究所江蘇省農(nóng)業(yè)生物學(xué)重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： LeEMF 番茄黃化曲葉病毒 病毒誘導(dǎo)基因沉默 功能分析
【基金】：江蘇省自主創(chuàng)新項目(CX(12)2015)資助
【分類號】：Q943.2
【正文快照】： Functional Analysis of a Polycomb Protein Gene Le EMF2 from TomatoHu Jieli1,2Yang Yuwen2Ling Xitie2Wang Jinyan2Wu Jing1Zhang Baolong2Wang Rongfu1*1 College of life science,Anhui Agricultural University,Hefei,230000;2 Institute of Agro-biotechnology,Jiang

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本文編號：1136320