本文關(guān)鍵詞：番茄多梳蛋白家族基因LeEMF2的功能分析

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【摘要】：多梳蛋白(Polycomb protein)在植物表觀遺傳調(diào)控中起重要作用。已公開(kāi)的番茄轉(zhuǎn)錄組表明一個(gè)多梳蛋白基因Le EMF2在抗病番茄CLN2777A中受番茄黃化曲葉病毒(TYLCV)誘導(dǎo)表達(dá)。為明確Le EMF2抗TYLCV的作用,我們以CLN2777A為材料,通過(guò)RT-PCR克隆該基因全長(zhǎng)序列,熒光定量PCR研究Le EMF2的表達(dá)模式,并利用病毒誘導(dǎo)的基因沉默(VIGS)技術(shù)研究Le EMF2沉默后對(duì)番茄抗TYLCV的影響。Le EMF2的開(kāi)放閱讀框?yàn)? 917 bp,編碼長(zhǎng)為638個(gè)氨基酸的蛋白。結(jié)構(gòu)域分析表明其含有一個(gè)C2H2鋅指結(jié)構(gòu)域以及一個(gè)VEFS盒,與擬南芥EMF2氨基酸相似度為58.3%。熒光定量PCR發(fā)現(xiàn)Le EMF2基因在花、根以及莖頂端生長(zhǎng)點(diǎn)的表達(dá)量較高,在莖和老葉中表達(dá)量次之,在嫩葉中的表達(dá)量最低。接種TYLCV 5 d后,Le EMF2基因在CLN2777A中上調(diào)表達(dá)1倍左右,而在感病番茄TMXA48-4-0的表達(dá)則無(wú)明顯變化。通過(guò)農(nóng)桿菌浸潤(rùn)法將VIGS沉默載體注射CLN2777A子葉15 d后,Le EMF2在沉默番茄植株中的表達(dá)量?jī)H為野生型CLN2777A的13%~48%,且沉默株的植株新葉卷曲、皺縮,說(shuō)明Le EMF2基因?qū)Ψ训纳L(zhǎng)發(fā)育、形態(tài)建成具有重要作用。Le EMF2沉默植株接種TYLCV 15 d后,熒光定量PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)沉默植株的病毒量為野生型植株的1.7倍,說(shuō)明Le EMF2對(duì)TYLCV的抗性作用有一定的影響。
【作者單位】： 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究所江蘇省農(nóng)業(yè)生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： LeEMF 番茄黃化曲葉病毒 病毒誘導(dǎo)基因沉默 功能分析
【基金】：江蘇省自主創(chuàng)新項(xiàng)目(CX(12)2015)資助
【分類號(hào)】：Q943.2
【正文快照】： Functional Analysis of a Polycomb Protein Gene Le EMF2 from TomatoHu Jieli1,2Yang Yuwen2Ling Xitie2Wang Jinyan2Wu Jing1Zhang Baolong2Wang Rongfu1*1 College of life science,Anhui Agricultural University,Hefei,230000;2 Institute of Agro-biotechnology,Jiang

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本文編號(hào)：1136320