沉默ClC-3氯通道基因?qū)C-12細(xì)胞凋亡的影響
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更多相關(guān)文章: siRNA ClC- 大鼠 細(xì)胞凋亡
【摘要】:目的:觀察氯離子通道蛋白3(ClC-3)基因沉默對大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞PC-12凋亡的影響。方法:取處于對數(shù)生長期的PC-12細(xì)胞,隨機(jī)分為4組:對照組(用正常培養(yǎng)基培養(yǎng))、H_2O_2組(用300nmol/LH_2O_2誘導(dǎo)12h)、H_2O_2+空質(zhì)粒組(細(xì)胞轉(zhuǎn)染pGPU6/GFP24h后用H_2O_2誘導(dǎo)12h)、H_2O_2+siRNA組(細(xì)胞轉(zhuǎn)染pGPU6/GFP-ClC-3-siRNA24h后用H_2O_2誘導(dǎo)12h)。通過CCK-8檢測細(xì)胞存活率,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率,Westernblot法檢測Caspase-3以及ClC-3蛋白的表達(dá),實時熒光定量PCR檢測ClC-3mRNA的表達(dá)。結(jié)果:與對照組比較,H_2O_2組、H_2O_2+空質(zhì)粒組和H_2O_2+siRNA組均表現(xiàn)為細(xì)胞存活率下降,細(xì)胞凋亡增加,ClC-3mRNA和Caspase-3、ClC-3蛋白表達(dá)增加(P0.05);H_2O_2組和H_2O_2+空質(zhì)粒組比較,各指標(biāo)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);但與H_2O_2組、H_2O_2+空質(zhì)粒組比較,H_2O_2+siRNA組細(xì)胞存活率較高,細(xì)胞凋亡率較低,ClC-3mRNA和Caspase-3、ClC-3蛋白表達(dá)較弱(P0.05)。結(jié)論:ClC-3氯離子通道參與了H_2O_2誘導(dǎo)的PC-12細(xì)胞凋亡。
【作者單位】: 漯河醫(yī)學(xué)高等?茖W(xué);A(chǔ)部生理學(xué)教研室;遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: siRNA ClC- 大鼠 細(xì)胞凋亡
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目81160157
【分類號】:R736.6
【正文快照】: Effect of Cl C-3 chloride channel gene silence on apoptosis of PC-12 cellsWU Qiong1),ZHANG Shuling2),LI Xi2),LIN Ling1),CHANG Quanzhong1,2)1)Department of Physiology,Basic Medicine Faculty of Luohe Medical College,Luohe 462002 2)Depart-缺血性腦卒中具有較
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