丹參多酚氧化酶基因的克隆及表達(dá)分析
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【摘要】:前期研究發(fā)現(xiàn)多酚氧化酶(PPO)能正向調(diào)控丹酚酸B合成,該研究運(yùn)用RACE技術(shù),從丹參毛狀根中克隆到多酚氧化酶基因(SmPPO,GenBank登錄號(hào)為KF712274)全長(zhǎng)序列,其cDNA全長(zhǎng)1 930bp,開(kāi)放閱讀框?yàn)? 770bp,編碼589個(gè)氨基酸。將SmPPO與管狀花目其它4個(gè)物種進(jìn)行氨基酸序列比對(duì),在N端類囊體轉(zhuǎn)移結(jié)構(gòu)域中發(fā)現(xiàn)都存在2個(gè)N-豆蔻;稽c(diǎn)。在丹參毛狀根培養(yǎng)液中加入不同誘導(dǎo)因子,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè),發(fā)現(xiàn)該基因在酵母提取物處理中表達(dá)量顯著上調(diào),但在銀離子、抗壞血酸和L-半胱氨酸處理中表達(dá)受到明顯抑制。運(yùn)用HPLC技術(shù)同步檢測(cè)毛狀根中丹酚酸B含量,顯示出與基因表達(dá)相同的變化趨勢(shì)。研究表明,丹參中多酚氧化酶基因(SmPPO)對(duì)丹酚酸B的合成具有正向調(diào)控作用。
【作者單位】: 旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中藥指紋圖譜與天然產(chǎn)物國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 丹參 多酚氧化酶 基因克隆 序列全長(zhǎng) 基因表達(dá)
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81373908) 陜西省自然科學(xué)基金(2015JM3092;2016JM8108) 中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)(2452016003)
【分類號(hào)】:S567.53
【正文快照】: 多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)是由核基因編碼的含銅金屬酶,廣泛存在于植物、真菌和昆蟲(chóng)中。它們能氧化多酚類化合物生成不穩(wěn)定的醌類物質(zhì),醌發(fā)生聚合并與氨基酸發(fā)生反應(yīng),生成黑色素或褐色素,導(dǎo)致果蔬褐變、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)和商品性下降。醌類物質(zhì)具有毒性,并通過(guò)共價(jià)調(diào)節(jié)與氨
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1118101
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