發(fā)布時間：2017-10-24 06:29

  本文關(guān)鍵詞：沉默RNF181基因表達(dá)可促進(jìn)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞的生長

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【摘要】：目的 :研究沉默環(huán)指蛋白181(ring finger protein 181,RNF181)基因表達(dá)對結(jié)腸癌細(xì)胞SW480生長的影響,并探討其可能的作用機(jī)制。方法 :采用慢病毒感染的方法將靶向沉默RNF181基因表達(dá)的重組慢病毒顆粒LV3-RNF181-KD轉(zhuǎn)入人結(jié)腸癌SW480細(xì)胞中[以感染重組慢病毒顆粒LV3-negative control(NC)為陰性對照)]。病毒感染48 h后,分別采用實(shí)時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測SW480細(xì)胞中RNF181m RNA及蛋白的表達(dá)水平;CCK-8法和平板克隆法檢測RNF 181基因沉默對SW480細(xì)胞增殖的影響;蛋白質(zhì)印跡法檢測對細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及其磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)表達(dá)的影響。結(jié)果 :實(shí)時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測結(jié)果顯示,重組慢病毒顆粒LV3-RNF181-KD轉(zhuǎn)入SW480細(xì)胞后,細(xì)胞中RNF181 m RNA和蛋白的表達(dá)水平均較陰性對照組(感染重組慢病毒顆粒LV3-NC的SW480細(xì)胞)明顯下調(diào),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均0.01)。CCK-8及平板克隆實(shí)驗(yàn)證實(shí),沉默RNF181基因表達(dá)后SW480細(xì)胞的增殖能力明顯增強(qiáng)(P值均0.01)。細(xì)胞中ERK蛋白的表達(dá)水平無明顯變化(P0.05),而p-ERK蛋白的表達(dá)水平明顯升高(P0.01)。結(jié)論 :沉默RNF181基因的表達(dá)可增強(qiáng)人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的增殖能力,其機(jī)制可能與絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)/ERK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化有關(guān)。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院抗體工程研究所;南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)腸腫瘤 慢病毒感染 RNF基因 細(xì)胞增殖
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:81201663,81171959)~~
【分類號】：R735.35
【正文快照】： 結(jié)直腸癌是全球最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率在男性中居第3位,僅次于肺癌和前列腺癌;而在女性中居第2位,僅次于乳腺癌。據(jù)保守估計(jì),2012年全球約有140萬例結(jié)直腸癌新發(fā)病例,死亡約69.4萬例[1]。近年來,得益于結(jié)直腸癌早期篩查,發(fā)達(dá)國家結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率穩(wěn)中有降[2],，

本文編號：1087490