本文關(guān)鍵詞：金屬硫蛋白2基因在紅花中表達的初步研究

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【摘要】：目的獲得轉(zhuǎn)金屬硫蛋白2(metallothionein 2,MT2)紅花植株,為MT藥用蛋白的生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。方法采用Nco I/HindⅢ酶切pEASY-oleosin-MT獲得oleosin-MT融合基因,將其插入到植物油體高效表達載體pOP上,構(gòu)建重組質(zhì)粒pOP-oleosin-MT,進行PCR和雙酶切鑒定。采用凍融法將重組質(zhì)粒pOP-oleosin-MT轉(zhuǎn)入根瘤農(nóng)桿菌EHA105中,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化紅花,對轉(zhuǎn)MT基因紅花植株進行PCR檢測及Southern blotting檢測。結(jié)果成功構(gòu)建了MT基因的植物油體表達載體pOP-oleosin-MT,獲得了3株P(guān)CR檢測呈陽性的轉(zhuǎn)MT基因紅花植株。結(jié)論建立了完善的紅花再生體系,獲得了轉(zhuǎn)MT基因的紅花植株。
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生物反應(yīng)器與藥物開發(fā)教育部工程研究中心;通化市第一中學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 紅花 金屬硫蛋白 油體 Southern blotting檢測 根瘤農(nóng)桿菌 重組質(zhì)粒
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863)項目(2011AA100606) 國家自然科學(xué)基金資助項目(31201237) 吉林省教育廳“十三五”科學(xué)技術(shù)研究項目重點項目(吉教科合字[2016]179號) 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項目(201610193046,201410193045) 吉林省科技廳中青年領(lǐng)軍人才及優(yōu)秀創(chuàng)新團隊項目(20111815) 教育部博士點基金-青年教師基金項目(20122223120002)
【分類號】：S567.219;Q943
【正文快照】： 金屬硫蛋白(metallothionein,MT)是一類低Cd的金屬蛋白首次在馬腎臟細胞中被發(fā)現(xiàn)[2]。通過對相對分子質(zhì)量(6~7 ku)、富含半胱氨酸,可與大金屬硫蛋白進行提純發(fā)現(xiàn),其含有大量的半胱氨酸殘量金屬離子(如Zn2+,Cd2+和Cu2+)相結(jié)合的獨特基和金屬,并因此將其命名為“metallothionein

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本文編號：1072303