本文關鍵詞：人PD-L1基因啟動子克隆及其熒光素酶報告基因載體的構建

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【摘要】：目的:對人源PD-L1基因啟動子進行PCR擴增,構建PD-L1熒光素酶報告基因。方法:用PCR擴增方法獲得PD-L1基因啟動子;PD-L1啟動子和載體行KpnⅠ、XhoⅠ酶切、連接和轉化,然后行菌落PCR以及測序等。構建成功后轉染至A549細胞中并檢測PD-L1啟動子活性。結果:經PCR方法擴增出PD-L1基因啟動子片段,;菌落PCR鑒定各重組體構建正確并經生工測序成功;瞬時轉染A549細胞后經報告基因檢測得知所克隆的不同片段序列具有啟動子活性。結論:成功克隆PD-L1基因啟動子,構建出不同片段基因啟動子熒光素酶報告基因,為進一步研究其分子機制提供詳實基礎。
【作者單位】： 皖南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院弋磯山醫(yī)院腫瘤內科;皖南醫(yī)學院麻醉學院;皖南醫(yī)學院法醫(yī)學院;皖南醫(yī)學院醫(yī)學影像與檢驗學院;皖南醫(yī)學院醫(yī)學生物學教研室;
【關鍵詞】： PD-L 啟動子克隆 雙熒光素酶報告基因
【分類號】：Q78;R73-3
【正文快照】： 程序性細胞死亡蛋白1(programmed death-1,PD-1)為PDCD1基因編碼的Ⅰ型跨膜糖蛋白[1],PD-1表達于活化的免疫細胞表面,如CD4+T細胞、B細胞等[2]。PD-L1(programmed death-1-ligand 1,程序性死亡配體-1)是程序性細胞死亡蛋白1的配體之一,同屬CD28/B7家族。PD-L1多表達于腫瘤細胞

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