酸性蛋白酶基因Asp在紅曲霉中的同源表達(dá)及序列分析
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【摘要】:從紅曲霉基因組中擴(kuò)增出酸性蛋白酶基因Asp的編碼區(qū),構(gòu)建其同源表達(dá)載體p BC-Hygro-Asp并導(dǎo)入到農(nóng)桿菌GV3101備用。利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入紅曲霉,并篩選獲得Asp基因同源重組轉(zhuǎn)化子,實(shí)現(xiàn)了酸性蛋白酶基因在紅曲霉中的同源表達(dá)。轉(zhuǎn)化子中酸性蛋白酶基因表達(dá)量是野生型菌株的3.30倍,能達(dá)到高產(chǎn)酸性蛋白酶的目的。對(duì)紅曲霉酸性蛋白酶基因序列進(jìn)行分析,結(jié)果顯示該基因產(chǎn)物有兩個(gè)天冬氨酸蛋白酶活性位點(diǎn),為親水性分泌蛋白,不參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),且與赤曲霉酸性蛋白酶有相同進(jìn)化速率。
【作者單位】: 重慶大學(xué)生物工程學(xué)院;四川省瀘州市釀酒科學(xué)研究所;國(guó)家固態(tài)釀造工程技術(shù)研究中心瀘州老窖股份有限公司;
【關(guān)鍵詞】: 紅曲霉 酸性蛋白酶 同源表達(dá) 序列分析
【基金】:國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2014BAD07B02) 四川省科技支撐計(jì)劃(2010NZ0093) 釀酒生物技術(shù)及應(yīng)用四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(NJ2011-03;NJ2014-03) 重慶大學(xué)大型儀器設(shè)備開(kāi)放基金
【分類號(hào)】:TS201.3
【正文快照】: 紅曲霉(Monascus)是一種絲狀子囊菌,歸屬于真菌界子囊菌門真子囊菌綱散囊菌目紅曲科,以其酶系豐富、代謝產(chǎn)物多而被廣泛應(yīng)用于各類產(chǎn)品的發(fā)酵生產(chǎn)[1]。部分紅曲霉菌株可產(chǎn)生大量活性較高的蛋白酶,可用于腌漬魚(yú)、肉、豆腐等高蛋白食品。酸性蛋白酶也稱為天冬氨酸蛋白酶,是一種
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本文編號(hào):1006210
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