目的：本研究通過觀察急性運動過程及其恢復(fù)期大鼠心肌線粒體功能及其融合、分裂相關(guān)蛋白的表達變化，分析心肌線粒體ROS生成與心肌炎癥反應(yīng)相關(guān)蛋白表達水平的關(guān)系，探討急性運動中心肌線粒體動態(tài)變化對心肌炎癥反應(yīng)的影響及可能機制。 方法:雄性SD大鼠48只隨機分為8組：分別是安靜對照組（C）、運動45min，90min，120min（分別用E45， E90，E120表示）、運動120min后恢復(fù)12h，24h，36h，48h（分別用R12，R24，R36，R48），各組均為6只。運動組及運動恢復(fù)組大鼠置于小動物跑臺進行一次急性遞增負荷的運動為實驗?zāi)Ｐ�，在各時間點取樣分析以下指標：采用熒光標記JC-1測量線粒體膜電位；采用Oxygraph-2k呼吸測量儀測量線粒體態(tài)3、態(tài)4呼吸速率，計算呼吸控制比；采用熒光素-熒光素酶發(fā)光法測線粒體ATP酶合成活性；采用熒光標記DCFH-DA測量線粒體ROS生成速率；Western blot法測定心肌組織Mfn1/2，OPA1，Drp1，F(xiàn)is1，NLRP3，IL-1β的蛋白含量。 結(jié)果: 1.心肌線粒體呼吸功能及ROS的生成速率： 1）與C組相比， E45組線粒...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
2 實驗材料及研究方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 動物模型
        2.2.2 技術(shù)路線
        2.2.3 心肌樣本采集
        2.2.4 心肌線粒體提取
        2.2.5 蛋白樣品定量
        2.2.6 心肌線粒體膜電位測定
        2.2.7 心肌線粒體 ATP 合成活力測定
        2.2.8 心肌線粒體呼吸功能測定
        2.2.9 心肌線粒體 ROS 生成速率
        2.2.10 western blotting 法檢測蛋白表達
    2.3 統(tǒng)計學處理
3　實驗結(jié)果與分析
    3.1 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌線粒體呼吸功能水平及 ROS 生成速率
    3.2 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌線粒體動力學相關(guān)蛋白表達
        3.2.1 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌 Mfn1 蛋白表達
        3.2.2 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌 Mfn2 蛋白表達
        3.2.3 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌 OPA1 蛋白表達
        3.2.4 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌 Drp1 蛋白表達
        3.2.5 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌 Fis1 蛋白表達
    3.3 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌炎性相關(guān)蛋白表達
        3.3.1 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌 NLRP3 蛋白表達
        3.3.2 急性運動及恢復(fù)期大鼠心肌 IL-1β蛋白表達
    3.4 大鼠心肌線粒體 ROS 生成，融合分裂蛋白及炎癥相關(guān)因子蛋白表達的相關(guān)性分析
4　討論
    4.1 急性運動對線粒體呼吸功能和 ROS 生成的影響
    4.2 急性運動對線粒體動力學的影響
    4.3 急性運動心肌對炎癥反應(yīng)的影響
    4.4 線粒體動力學、ROS、炎癥反應(yīng)的關(guān)系
5 研究結(jié)論
6 本研究的不足及今后研究的考慮
參考文獻
論文綜述
    參考文獻
附錄
致謝
研究生個人簡介



本文編號：3981594