目的：本研究通過觀察急性運(yùn)動(dòng)過程及其恢復(fù)期大鼠心肌線粒體功能及其融合、分裂相關(guān)蛋白的表達(dá)變化，分析心肌線粒體ROS生成與心肌炎癥反應(yīng)相關(guān)蛋白表達(dá)水平的關(guān)系，探討急性運(yùn)動(dòng)中心肌線粒體動(dòng)態(tài)變化對(duì)心肌炎癥反應(yīng)的影響及可能機(jī)制。 方法:雄性SD大鼠48只隨機(jī)分為8組：分別是安靜對(duì)照組（C）、運(yùn)動(dòng)45min，90min，120min（分別用E45， E90，E120表示）、運(yùn)動(dòng)120min后恢復(fù)12h，24h，36h，48h（分別用R12，R24，R36，R48），各組均為6只。運(yùn)動(dòng)組及運(yùn)動(dòng)恢復(fù)組大鼠置于小動(dòng)物跑臺(tái)進(jìn)行一次急性遞增負(fù)荷的運(yùn)動(dòng)為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�，在各時(shí)間點(diǎn)取樣分析以下指標(biāo)：采用熒光標(biāo)記JC-1測(cè)量線粒體膜電位；采用Oxygraph-2k呼吸測(cè)量?jī)x測(cè)量線粒體態(tài)3、態(tài)4呼吸速率，計(jì)算呼吸控制比；采用熒光素-熒光素酶發(fā)光法測(cè)線粒體ATP酶合成活性；采用熒光標(biāo)記DCFH-DA測(cè)量線粒體ROS生成速率；Western blot法測(cè)定心肌組織Mfn1/2，OPA1，Drp1，F(xiàn)is1，NLRP3，IL-1β的蛋白含量。 結(jié)果: 1.心肌線粒體呼吸功能及ROS的生成速率： 1）與C組相比， E45組線粒...

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料及研究方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 動(dòng)物模型
        2.2.2 技術(shù)路線
        2.2.3 心肌樣本采集
        2.2.4 心肌線粒體提取
        2.2.5 蛋白樣品定量
        2.2.6 心肌線粒體膜電位測(cè)定
        2.2.7 心肌線粒體 ATP 合成活力測(cè)定
        2.2.8 心肌線粒體呼吸功能測(cè)定
        2.2.9 心肌線粒體 ROS 生成速率
        2.2.10 western blotting 法檢測(cè)蛋白表達(dá)
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
3　實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    3.1 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌線粒體呼吸功能水平及 ROS 生成速率
    3.2 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌線粒體動(dòng)力學(xué)相關(guān)蛋白表達(dá)
        3.2.1 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌 Mfn1 蛋白表達(dá)
        3.2.2 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌 Mfn2 蛋白表達(dá)
        3.2.3 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌 OPA1 蛋白表達(dá)
        3.2.4 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌 Drp1 蛋白表達(dá)
        3.2.5 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌 Fis1 蛋白表達(dá)
    3.3 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌炎性相關(guān)蛋白表達(dá)
        3.3.1 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌 NLRP3 蛋白表達(dá)
        3.3.2 急性運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期大鼠心肌 IL-1β蛋白表達(dá)
    3.4 大鼠心肌線粒體 ROS 生成，融合分裂蛋白及炎癥相關(guān)因子蛋白表達(dá)的相關(guān)性分析
4　討論
    4.1 急性運(yùn)動(dòng)對(duì)線粒體呼吸功能和 ROS 生成的影響
    4.2 急性運(yùn)動(dòng)對(duì)線粒體動(dòng)力學(xué)的影響
    4.3 急性運(yùn)動(dòng)心肌對(duì)炎癥反應(yīng)的影響
    4.4 線粒體動(dòng)力學(xué)、ROS、炎癥反應(yīng)的關(guān)系
5 研究結(jié)論
6 本研究的不足及今后研究的考慮
參考文獻(xiàn)
論文綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
研究生個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3981594