發(fā)布時間：2020-12-21 14:03

　　組織單細胞懸液制備是細胞生物學(xué)中的基礎(chǔ)技能,常用的組織解離方法有機械法和酶法,不同解離方法在細胞得率和細胞活性上差異較大。在神經(jīng)科學(xué)的各個研究領(lǐng)域,包括發(fā)育研究、疾病病理生理學(xué)、藥物和毒素篩選,以及神經(jīng)疾病動物模型的移植等均需要使用分離的單細胞。然而神經(jīng)組織細胞間緊密的黏附性及軸突和樹突的易碎性阻礙單細胞的獲得。自動化組織處理器結(jié)合機械法與酶法雙重作用可獲得高質(zhì)量的細胞懸液。利用這一技術(shù)開展自主設(shè)計型神經(jīng)組織單細胞懸液制備實驗,以提升學(xué)生綜合分析應(yīng)用能力,拓展對前沿科學(xué)技術(shù)的認識。通過科研與教學(xué)相融合的方式,更好地激發(fā)醫(yī)學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情,提高醫(yī)學(xué)生的科研素質(zhì),實現(xiàn)研究型與創(chuàng)新型人才培養(yǎng)的目標。 

【文章來源】：中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2020年08期

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

不同解離條件下神經(jīng)組織活細胞數(shù)

根據(jù)實驗?zāi)康倪M行分組,按4種解離酶分成4個大組。在4個大組內(nèi)再根據(jù)設(shè)計的實驗條件分小組,建議3人為1個小組(表1)。實驗前1周,教師布置半開放自主設(shè)計性實驗的內(nèi)容及設(shè)計要求、實施時間及考核方法。以組為單位進行資料查閱與分析、實驗方案討論與設(shè)計、實驗準備及實施,按規(guī)定時間提交實驗內(nèi)容的可行性報告。課堂上老師對實驗原理及實驗要求進行講解,并對學(xué)生的實驗設(shè)計進行評判,然后學(xué)生開始實驗,分工合作,完成所有設(shè)計內(nèi)容;實驗結(jié)束后,同組學(xué)生共享實驗結(jié)果,并經(jīng)過分析和討論得出實驗結(jié)論,匯總實驗報告(圖2)。實驗教學(xué)的評估體系分為預(yù)習(xí)報告(30%)、基本操作(20%)、數(shù)據(jù)處理(10%)與實驗報告(40%)這幾個方面。實驗報告重點闡明測試酶的解離原理、解離條件、解離結(jié)果分析及思考題回答。3 實驗步驟

(2)將腦組織碎塊轉(zhuǎn)移至組織解離管,根據(jù)消化酶工作濃度配置解離液,向解離管加入2 mL酶工作液。(3)旋緊組織解離管,上下顛倒混勻組織塊與酶解離液,使組織塊落在解離管的定子與轉(zhuǎn)子間,避免黏在管壁上。隨后將解離管倒置插入gentleMACS組織處理系統(tǒng)通道上。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]大型儀器在醫(yī)學(xué)細胞生物學(xué)實驗教學(xué)中的應(yīng)用[J]. 林愛琴,卜文婕,高繼光,楊建課,朱曉蕾,宮磊.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育. 2019(12)
[2]中醫(yī)藥院校大型儀器設(shè)備用于實驗教學(xué)的探索[J]. 杜瑩,賈連群,宋囡,王瑩,呂美君,曹媛,王潔明,冷雪.  中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠程教育. 2019(14)
[3]細胞生物學(xué)“半開放設(shè)計性實驗”教學(xué)的意義與實施方法[J]. 薛雅蓉,劉常宏.  實驗技術(shù)與管理. 2013(08)
[4]細胞生物學(xué)課程體系優(yōu)化的實踐與思考[J]. 張晶,華子春.  中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2011(06)
[5]大量活性神經(jīng)元細胞核的分離技術(shù)(英文)[J]. 馮偉生,阮成鈞,馮振卿,仇振寧,顧萍,張化彪.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(29)
[6]胎鼠皮質(zhì)神經(jīng)元細胞核的制備和鑒定[J]. 周竹娟,鄭健,徐炎.  卒中與神經(jīng)疾病. 2008(02)



本文編號：2929950