孤獨(dú)癥譜系障礙（Autism spectrum disorder,ASD）是一組兒童期起病的終身神經(jīng)發(fā)育障礙,其核心特征是社會(huì)交流、交往障礙,興趣狹窄及刻板重復(fù)的行為,具有顯著臨床異質(zhì)性。ASD位居兒童精神殘疾之首,一般起病<3歲,在各種族、民族和社會(huì)經(jīng)濟(jì)群體中均有發(fā)生,近年來(lái)全球ASD的患病率呈急劇增長(zhǎng)趨勢(shì)。ASD的病因及發(fā)病機(jī)制尚不明確,既往研究顯示ASD可能是由環(huán)境和遺傳因素共同作用引起的兒童腦發(fā)育異常,而遺傳學(xué)研究顯示,ASD遺傳度超過(guò)90%,因此遺傳被認(rèn)為是ASD的主要病因。單核苷酸多態(tài)性（Single nucleotide polymorphism,SNP）作為一種重要的遺傳標(biāo)記,已被廣泛應(yīng)用于群體遺傳學(xué)研究,其中SNP與ASD的關(guān)聯(lián)研究一直是國(guó)內(nèi)外研究熱點(diǎn)。目前最新的理論認(rèn)為神經(jīng)元可塑性、突觸連接功能異�？赡苁茿SD重要的分子機(jī)制。研究表明mi RNA在神經(jīng)可塑性和神經(jīng)發(fā)育方面具有重要功能,近年來(lái)有學(xué)者通過(guò)挖掘與ASD相關(guān)基因3’UTR區(qū)SNP結(jié)合的mi RNA,研究ASD的發(fā)病機(jī)制。DIP2（Disco-interacting protein 2）基因家族（DIP... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

研究技術(shù)路線(xiàn)

第2章材料與方法372.3.7.2基因分型步驟采用AgenaMassArray平臺(tái)進(jìn)行基因分型檢測(cè)，包括PCR擴(kuò)增反應(yīng)，SAP反應(yīng)，SBE反應(yīng)，樹(shù)脂純化，點(diǎn)樣，上機(jī)檢測(cè)及數(shù)據(jù)收集等步驟（圖2.2）。圖2.2基因分型的步驟和各反應(yīng)的條件Figure2.2Procedureofgenotypingandtheconditionsofeachreaction2.3.7.3PCR擴(kuò)增反應(yīng)（1）取1.5mlEppendorf管配置PCRmastermix（表2.3）；（2）用8道移液器或者12道移液器，在384孔板的各加樣孔中先加入4μLPCRmastermix，再加入1μL模板DNA（20ng/μL）混勻，小心蓋上384孔封板膜，并壓緊每個(gè)孔（防止PCR程序中出現(xiàn)蒸發(fā)等現(xiàn)象），離心1min（1000rpm/min）；（3）按照?qǐng)D2.2設(shè)置PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序，將PCR反應(yīng)板置于PCR儀上，啟動(dòng)程序。2.3.7.4SAP處理（1）將PCR產(chǎn)物用SAP處理，以去除體系中游離的dNTPs；（2）取1.5mlEppendorf管，配制SAP處理反應(yīng)液，各反應(yīng)組分見(jiàn)表2.3；（3）在384孔板的各加樣孔中先加入SAPmix2μL；再加入PCR產(chǎn)物4μL；

吉林大學(xué)博士學(xué)位論文52圖3.1部分DNA瓊脂糖凝膠電泳質(zhì)檢不合格結(jié)果Figure3.1PartialDNAagarosegelelectrophoresisqualitytestunqualifiedsample圖3.2部分樣本DNA瓊脂糖凝膠電泳質(zhì)檢合格結(jié)果Figure3.2PartialDNAagarosegelelectrophoresisqualitytestqualifiedsample

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[4]反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量PCR用于檢測(cè)白血病相關(guān)融合基因分型的性能及應(yīng)用評(píng)價(jià)[J]. 白園園,楊慧潔,余堅(jiān),楊軍軍,鄭曉群,陳占國(guó).  中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2020(01)
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碩士論文
[1]突觸信號(hào)傳導(dǎo)通路基因多態(tài)性與兒童孤獨(dú)癥的關(guān)聯(lián)性研究[D]. 王佳.華中科技大學(xué) 2017
[2]DIP2A基因多態(tài)性與兒童漢語(yǔ)閱讀障礙易感性的關(guān)聯(lián)研究[D]. 孔銳.華中科技大學(xué) 2016
[3]寧夏兒童孤獨(dú)癥患病率調(diào)查及影響因素研究[D]. 吳錦榮.寧夏醫(yī)科大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3110012