本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)染KAI1基因?qū)θ宋赴┞闶笠浦擦錾L(zhǎng)的影響

  更多相關(guān)文章： 胃癌 BGC-823細(xì)胞 KAI1基因 裸鼠移植瘤

【摘要】：目的:探討慢病毒介導(dǎo)的KAI1基因轉(zhuǎn)染人低分化胃癌細(xì)胞BGC-823后對(duì)裸鼠體內(nèi)移植瘤生長(zhǎng)的影響。方法:1.培養(yǎng)BGC-823細(xì)胞(空白對(duì)照組)、轉(zhuǎn)染p CMV-KAI1-IRES-EGFP的BGC-823細(xì)胞(實(shí)驗(yàn)組)及轉(zhuǎn)染p CMV-MCS-IRES-EGFP的BGC-823細(xì)胞(陰性對(duì)照組);2.將15只雌性BALB/c-nu裸鼠隨機(jī)分為每組5只,組別分別為實(shí)驗(yàn)組(KAI1-OE)、空白對(duì)照組(BC)及陰性對(duì)照組(NC)三組;3.取三組BGC-823細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)消化,調(diào)整細(xì)胞量為1×107個(gè)細(xì)胞/ml,在裸鼠左側(cè)腋窩皮下部位注射0.2ml單細(xì)胞懸液;4.每日固定時(shí)間點(diǎn)觀察并記錄裸鼠的生活狀態(tài)、移植瘤的生長(zhǎng)狀況,每隔3日測(cè)量三組移植瘤的長(zhǎng)、短徑。收集每組數(shù)據(jù)計(jì)算移植瘤的平均體積,并繪制出相對(duì)應(yīng)的移植瘤生長(zhǎng)曲線;5.連續(xù)觀察5周后脫頸處死裸鼠并剝離瘤組織。稱取瘤組織的重量、測(cè)量瘤體體積,瘤組織切片行HE染色,再用Western Blot和免疫組化技術(shù)檢測(cè)三組瘤組織的KAI1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1.人低分化胃癌細(xì)胞BGC-823裸鼠移植瘤模型構(gòu)建成功,1周后三組均成瘤;2.裸鼠移植瘤生長(zhǎng)曲線顯示:與實(shí)驗(yàn)組相比,兩對(duì)照組移植瘤生長(zhǎng)速度明顯較快(p0.01)。兩對(duì)照組移植瘤體積明顯較實(shí)驗(yàn)組大,重量明顯較重(p0.01),實(shí)驗(yàn)組移植瘤生長(zhǎng)明顯受到抑制;3.三組腫瘤組織經(jīng)HE染色后顯示為低分化腺癌的病理學(xué)表現(xiàn)。經(jīng)Western Blot驗(yàn)證:將實(shí)驗(yàn)組與兩對(duì)照組相比較,KAI1蛋白表達(dá)明顯較高(p0.05),而兩對(duì)照組間KAI1蛋白表達(dá)無顯著差別(p0.05)。經(jīng)免疫組化驗(yàn)證:實(shí)驗(yàn)組的KAI1蛋白表達(dá)較多,較兩對(duì)照組高(p0.05),而空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組KAI1蛋白表達(dá)較少,兩組之間無顯著差別(p0.05)。結(jié)論:1.成功建立了慢病毒介導(dǎo)的KAI1基因轉(zhuǎn)染人低分化胃癌BGC-823細(xì)胞的裸鼠皮下移植瘤;2.KAI1基因的轉(zhuǎn)染可有效抑制人低分化胃癌BGC-823細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng),以KAI1基因?yàn)榘悬c(diǎn)的基因治療有潛在的臨床前景。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 BGC-823細(xì)胞 KAI1基因 裸鼠移植瘤
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中英縮略詞對(duì)照表4-5
• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-8
• 前言8-10
• 材料與方法10-21
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-30
• 討論30-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 綜述38-45
• 參考文獻(xiàn)43-45
• 致謝45-46
• 作者簡(jiǎn)介46

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：996717