本文關(guān)鍵詞：三氧化二砷和硼替佐米提高多發(fā)性骨髓瘤RPMI-8226細胞對NK和γδT細胞殺傷敏感性的機制研究

  更多相關(guān)文章： 多發(fā)性骨髓瘤 三氧化二砷 硼替佐米 NK細胞 γδT細胞 殺傷敏感性

【摘要】：目的：多發(fā)性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是臨床常見血液系統(tǒng)惡性腫瘤，占惡性腫瘤死亡的2%。雖然大劑量化療和造血干細胞移植明顯降低了MM的死亡率，但對于復(fù)發(fā)難治性MM患者的治療仍較困難。因此，亟待尋找能夠提高MM治療效果的新方法。近年來，腫瘤免疫治療因其治療效果顯著，越來越受到人們的關(guān)注。腫瘤過繼免疫細胞治療（adoptive cellular immunotherapy，ACI）技術(shù)是近年來發(fā)展尤為迅速的腫瘤免疫治療手段，已經(jīng)在許多腫瘤的治療中呈現(xiàn)出明顯的治療效果。ACI與MM的常規(guī)治療手段相結(jié)合，能夠提高MM的治愈效果，是值得研究的課題。本實驗選用三氧化二砷（arsenic trioxide，ATO）和硼替佐米（bortezomib，Bor）兩種MM臨床常用化療藥物，探討低劑量藥物作用于MM細胞系RPMI-8226細胞后能否增強細胞免疫原性，同時觀察藥物處理后的MM細胞對NK細胞和γ T細胞殺傷敏感性的變化，并探討其可能的機制，為MM的臨床治療提供新思路。 方法：取10例MM患者外周血，分離單個核細胞并加入相應(yīng)細胞因子，向NK和γ T細胞誘導(dǎo)；流式細胞術(shù)檢測NK細胞表面標(biāo)志CD3、CD56、NKG2D和DNAM-1，γ T細胞表面標(biāo)志CD3、Vγ9、NKG2D和DNAM-1表達情況；MTT法檢測ATO與Bor對RPMI-8226、NK和γ T細胞增殖的抑制作用；流式細胞術(shù)檢測RPMI-8226細胞經(jīng)ATO或Bor預(yù)處理前后細胞表面MICA、MICB和CD155的變化；鈣黃綠素釋放法檢測NK和γ T細胞對ATO或Bor預(yù)處理的RPMI-8226細胞的殺傷作用。 結(jié)果：1.10例MM患者外周血單個核細胞經(jīng)相應(yīng)細胞因子刺激擴增后，誘導(dǎo)出大量NK（CD3-CD56+）和γ T（CD3+Vγ9+）細胞，純度分別為（85.76±6.28）%和（92.30±3.47）%。2. ATO與Bor對RPMI-8226細胞的增殖具有抑制作用，且呈劑量依賴性。3.低劑量ATO能夠提高RPMI-8226細胞表面NKG2D配體MICA和MICB的表達，且呈時間依賴性；Bor對RPMI-8226細胞表面NKG2D配體MICA和MICB的表達呈現(xiàn)短暫促進作用，8h出現(xiàn)峰值。ATO和Bor均能夠提高RPMI-8226細胞表面DNAM-1配體CD155的表達。4.低劑量ATO與Bor在體外對NK和γ T細胞的增殖均具有抑制作用。且ATO對γ T細胞的抑制作用強于對RPMI-8226細胞的作用。5. NK和γ T細胞對經(jīng)低劑量ATO或Bor預(yù)處理的RPMI-8226細胞的殺傷作用，要明顯強于未經(jīng)預(yù)處理的RPMI-8226細胞。6.單獨封閉NK細胞表面受體NKG2D，其對藥物預(yù)處理組和未經(jīng)藥物處理組的的殺傷作用明顯降低，但是藥物預(yù)處理組仍然高于未經(jīng)藥物處理組；單獨封閉NK細胞表面受體DNAM-1或共同封閉DNAM-1和NKG2D后，其對藥物預(yù)處理組和未經(jīng)藥物處理組的殺傷作用明顯降低，兩組之間無差異。7.單獨或共封閉γ T細胞表面受體NKG2D和DNAM-1后，其對藥物預(yù)處理組和未經(jīng)藥物處理組的殺傷作用明顯降低，但是藥物預(yù)處理組仍然高于未經(jīng)藥物未處理組。 結(jié)論：1.本實驗成功培養(yǎng)擴增出純度較高的NK和γ T細胞，其對RPMI-8226細胞具有明顯殺傷作用。2. ATO或Bor對NK、γ T和RPMI-8226細胞的增殖均具有抑制作用，ATO對γ T細胞的增殖抑制作用最強，其次分別是RPMI-8226細胞和NK細胞。而Bor對RPMI-8226細胞的增殖抑制作用最強。3.低劑量ATO或Bor預(yù)處理RPMI-8226細胞后，可增強靶細胞對NK效應(yīng)細胞的殺傷敏感性，其機制與藥物提高靶細胞表面受體MICA、MICB和CD155有關(guān)，，推測其依賴于DNAM-1和NKG2D途徑，且主要依賴DNAM-1途徑。4.低劑量ATO或Bor預(yù)處理RPMI-8226細胞后，可增強靶細胞對γ T效應(yīng)細胞的殺傷敏感性，其機制與藥物提高靶細胞表面受體MICA、MICB和CD155有關(guān)，推測其依賴于DNAM-1和NKG2D途徑，可能還存在其它的途徑。
【關(guān)鍵詞】：多發(fā)性骨髓瘤 三氧化二砷 硼替佐米 NK細胞 γδT細胞 殺傷敏感性
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R733.3
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 英文縮略詞11-12
• 第1章 緒論12-14
• 第2章 綜述14-25
• 2.1 MM 及其治療現(xiàn)狀14-15
• 2.2 ATO 抗腫瘤機制15-18
• 2.3 Bor 抗腫瘤機制18-21
• 2.4 ACI 技術(shù)21-24
• 2.5 展望24-25
• 第3章 材料與方法25-33
• 3.1 實驗材料25-27
• 3.2 實驗方法27-32
• 3.3 統(tǒng)計學(xué)分析32-33
• 第4章 結(jié)果33-45
• 4.1 NK 細胞表面免疫表型及活化分子的鑒定33
• 4.2 γδT 細胞表面免疫表型及活化分子的鑒定33-34
• 4.3 ATO 或 Bor 對 RPMI-8226 細胞增殖的影響34-35
• 4.4 ATO 或 Bor 對 RPMI-8226 細胞表面 MICA 和 MICB 表達的影響35-36
• 4.5 ATO 或 Bor 對 NK 和γδT 細胞增殖的影響36-37
• 4.6 ATO 或 Bor 對 NK 細胞殺傷 RPMI-8226 細胞的影響37-38
• 4.7 ATO 或 Bor 對γδT 細胞殺傷 RPMI-8226 細胞的影響38-39
• 4.8 ATO 或 Bor 對 RPMI-8226 細胞表面 NKG2D 和 DNAM-1 配體表達的影響39-41
• 4.9 經(jīng)抗體封閉后 NK 細胞對 RPMI-8226 細胞的殺傷作用41-43
• 4.10 經(jīng)抗體封閉后的γδT 細胞對殺傷 RPMI-8226 細胞的殺傷作用43-45
• 第5章 討論45-49
• 第6章 結(jié)論49-50
• 參考文獻50-56
• 作者簡介56-57
• 致謝57

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張元亞;寧琴;韓梅芳;;NK細胞TRAIL信號通路在病毒性肝炎發(fā)病中的作用研究進展[J];實用肝臟病雜志;2013年06期

2 張曉春;鄭曉敏;陳誠;李義德;;t(17;19)-急性淋巴細胞白血病細胞對腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體的敏感性及其意義[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年01期

3 金曉紅;朱志圖;史毅;;胃癌細胞TRAIL耐藥機制以及TRAIL聯(lián)合化療應(yīng)用的研究進展[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年01期

4 陳煒;陳佩林;鄧玉強;;游泳對心衰模型小鼠左心室miRNA-350/JNK通路的影響[J];北京體育大學(xué)學(xué)報;2014年05期

5 李仲穎;牛朝詩;;去乙酰化酶抑制劑HDACIs抗膠質(zhì)瘤研究進展[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2014年02期

6 齊振熙;萬甜;吳敏瑞;張占勇;仲衛(wèi)紅;于濤;;羥基紅花黃色素A不同給藥方式對激素性股骨頭缺血壞死模兔ERK1/2、JNK和p38蛋白表達的影響[J];中華中醫(yī)藥雜志;2014年09期

7 王冰;于明;武岳;李川;姚天明;;JNK蛋白在白藜蘆醇抗心肌缺血再灌注損傷中作用[J];創(chuàng)傷與急危重病醫(yī)學(xué);2014年04期

8 陳然;鄧鑫;彭佩純;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與乙型肝炎關(guān)系的研究進展[J];廣西醫(yī)學(xué);2014年10期

9 廖紫s

本文編號：995003