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粉防己堿對肺癌細胞株A549的放射敏感性影響及相關機制探討

發(fā)布時間:2017-10-08 07:22

  本文關鍵詞:粉防己堿對肺癌細胞株A549的放射敏感性影響及相關機制探討


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【摘要】:目的:探討粉防己堿配合X線在體外環(huán)境中對肺癌細胞株A549生長、集落形成、細胞周期及相關蛋白表達的影響。方法:本實驗以人肺癌細胞株A549為研究對象,以粉防己堿和X射線為處理因素,采用MTT比色實驗觀察Tet對A549細胞的增殖抑制效應;利用克隆形成實驗觀察Tet對A549細胞的放射敏感性的影響;細胞流式術檢測A549細胞在各種因素處理后細胞周期的分布情況;蛋白印跡試驗分析處理因素對細胞周期相關蛋白表達的影響。結果:MTT比色法顯示高劑量的Tet對肺癌A549細胞的有明顯的抑制作用,低劑量(0.5~3.4μg/ml)的Tet對A549細胞抑制率10%,可以作為放射增敏的劑量參考;克隆形成實驗顯示,1μg/ml的Tet配合X射線可以明顯降低A549細胞的克隆形成率,放射增敏比(SER)為1.46;細胞流式術發(fā)現(xiàn),X射線可以引起A549細胞G2期阻滯,而低劑量(1μg/ml)的Tet可以減少G2期阻滯,高劑量(10μg/ml)則增加這種阻滯;Western blotting實驗顯示,在接受4Gy的X射線照射后,A549細胞Cyclin B1蛋白表達水平降低,磷酸化的Cdc2、Cdc25C蛋白表達增高,在加用小劑量Tet后Cyclin B1蛋白表達水平增高,磷酸化的Cdc2、Cdc25C蛋白表達降低,大劑量(10μg/ml)則相反。結論:1.粉防已堿可抑制人肺癌細胞株A549的生長,其抑制效應具有劑量依賴性和時間依賴性。2.小劑量的粉防己堿可增加X射線對人肺癌細胞株A549的殺傷作用,即有放射增敏作用,小劑量的Tet可減少射線誘導的細胞G2期阻滯。3.Tet的對A549細胞的放射增敏作用機制可能與其減少射線誘導的細胞G2期阻滯,減少磷酸化Cdc2和Cdc25C蛋白及增加Cyclin B1蛋白表達有關。
【關鍵詞】:粉防己堿 肺癌細胞株A549 放射敏感性 機制探討
【學位授予單位】:河南中醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R734.2
【目錄】:
  • 主要英文縮略詞5-6
  • 摘要6-7
  • Abstract7-8
  • 前言8-10
  • 材料和方法10-20
  • 1 實驗材料10-12
  • 1.110
  • 1.2 主要器材10-11
  • 1.3 主要試劑11-12
  • 2.實驗方法12-19
  • 2.1 細胞的復蘇、培養(yǎng)、凍存、計數(shù)及活力測定12-13
  • 2.2 MTT法測Tet對A549細胞增殖的影響13-14
  • 2.3克隆形成實驗14-15
  • 2.4 流式細胞術15-16
  • 2.5 Westren blotting實驗16-19
  • 3.統(tǒng)計學處理19-20
  • 結果20-27
  • 討論27-31
  • 結論31-32
  • 致謝32-33
  • 參考文獻33-37
  • 附錄 文獻綜述37-45
  • 參考文獻43-45

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 惠周光,李曄雄,楊偉志,余子豪;UCN-01去除放射后腫瘤細胞G_2期阻滯及其相關機制[J];癌癥;2005年01期

2 孫新臣;鄧文英;李蘇宜;鄧雨霞;喻偉;高恒東;;粉防己堿對人肝癌細胞株7402的放射增敏作用[J];臨床腫瘤學雜志;2007年12期



本文編號:992711

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