本文關(guān)鍵詞：影響硫氧還蛋白亞細(xì)胞定位的甘草有效組分研究

  更多相關(guān)文章： 甘草 硫氧還蛋白 亞細(xì)胞定位 有效組分 表達

【摘要】：當(dāng)前國家社會快速進步,百姓生活消費實力也在穩(wěn)步提升。然而由于發(fā)展所帶來的一系列污染問題以及人們長期養(yǎng)成的不良生活習(xí)慣等方面,都可能會導(dǎo)致人體內(nèi)部正常的細(xì)胞周期發(fā)生紊亂,進而會使細(xì)胞生理功能等方面出現(xiàn)嚴(yán)重失調(diào),最終惡化演變?yōu)椤鞍┌Y”。硫氧還蛋白(Thioredoxin-1,Trx)屬于分布比較寬泛的小分子多功能蛋白,其在進化上比較保守且同屬氧化還原類蛋白家族。目前對多種腫瘤細(xì)胞系的研究顯示,Trx表達水平與腫瘤細(xì)胞耐藥性之間存在正比例關(guān)系;與此同時,相關(guān)臨床探索也證實了Trx表達水平較高的癌癥病人更容易對多種化療藥物產(chǎn)生顯著抗藥性。這主要是由于化療藥物可刺激Trx入核使其保持還原狀態(tài),進而通過增強相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的活性使腫瘤細(xì)胞具有抵抗凋亡繼而抗藥的能力。因此將Trx作為一個潛在抗癌治療靶點具有非常重要的價值意義。中醫(yī)在我國的發(fā)展歷史悠久,由于其來源豐富且毒副作用小,因此廣受病患青睞。所以探尋有效抗癌天然藥物的任務(wù)也十分緊迫。本論文主要通過采用甘草天然混合組分及其主要單藥活性成分作用于人宮頸癌HeLa細(xì)胞,從而使用相關(guān)方法與手段對Trx在亞細(xì)胞中的定位作用進行了一系列探究。首先,采用復(fù)方甘草片(其內(nèi)主要成分為甘草浸膏)作為實驗藥物設(shè)置相同藥物濃度不同作用時間實驗組和相同作用時間不同藥物濃度實驗組。Western blot結(jié)果顯示兩組中,Trx在其細(xì)胞核與細(xì)胞漿內(nèi)的表達變化均隨著藥物濃度的增大和作用時間的延長呈現(xiàn)下降趨勢。因此推測在甘草中存在相關(guān)有效組分,從而對Trx在亞細(xì)胞中的定位下降起到了重要作用。然后,依次采用甘草酸(皂苷類藥物)、甘草苷(黃酮類藥物)兩種主要單藥活性成分作為實驗藥物設(shè)置相同藥物濃度不同作用時間實驗組和相同作用時間不同藥物濃度實驗組。Western blot結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩組中,Trx在其細(xì)胞核與細(xì)胞漿的定位表達均伴隨著藥物濃度增大與作用時間延長呈下降趨勢。因此證明了這兩種單藥活性成分對于Trx在亞細(xì)胞中的定位下降起到了重要作用,它們即為甘草中能夠抑制Trx入核的有效組分。與此同時,再將三七皂苷R1(皂苷類藥物)和蕓香葉苷(黃酮類藥物)兩種佐證藥物按照上述實驗設(shè)置作用HeLa細(xì)胞,Western blot結(jié)果發(fā)現(xiàn)二者對Trx在亞細(xì)胞中的含量變化無明顯作用。因此說明了甘草酸、甘草苷對于Trx在亞細(xì)胞中的定位下降是非常有效的。最后,再將甘草酸、甘草苷兩種單藥分別與抗癌藥物順鉑、紫杉醇、表柔比星進行“兩兩聯(lián)合”設(shè)置藥物實驗組。Western blot及四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法結(jié)果表明甘草對細(xì)胞毒性較弱,且當(dāng)使用的化療藥物保持低劑量濃度時,隨著甘草酸/甘草苷藥物濃度增加,Trx在其細(xì)胞核、細(xì)胞漿中的表達均呈逐漸下降趨勢;與此同時,兩種單藥和低劑量化療藥物聯(lián)合應(yīng)用對細(xì)胞的生長抑制情況可與單純高劑量化療藥物作用效果相似。因此通過聯(lián)合用藥有望降低化療藥物使用劑量,從而在提升癌癥治療效果及減輕對患者的毒副作用方面顯示出了一定的潛在臨床意義。
【關(guān)鍵詞】：甘草 硫氧還蛋白 亞細(xì)胞定位 有效組分 表達
【學(xué)位授予單位】：武漢工程大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R73-36
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-13
• 第1章 文獻綜述13-34
• 1.1 前言13-14
• 1.2 腫瘤細(xì)胞14-17
• 1.2.1 腫瘤細(xì)胞的特點14-16
• 1.2.2 腫瘤細(xì)胞形成的原因與過程16-17
• 1.3 硫氧還蛋白簡介17-24
• 1.3.1 硫氧還蛋白研究進展17-19
• 1.3.2 硫氧還蛋白結(jié)構(gòu)特點19-20
• 1.3.3 硫氧還蛋白生物活性20-22
• 1.3.4 硫氧還蛋白與各種疾病22-24
• 1.4 硫氧還蛋白系統(tǒng)與腫瘤之間關(guān)系24-27
• 1.4.1 硫氧還蛋白在腫瘤機理方面研究24-26
• 1.4.2 硫氧還蛋白與腫瘤治療26-27
• 1.5 相應(yīng)天然藥物概述27-33
• 1.5.1 甘草的化學(xué)成分27-28
• 1.5.2 甘草酸/甘草苷相關(guān)作用28-31
• 1.5.3 三七皂苷R131-32
• 1.5.4 蕓香葉苷32-33
• 1.6 本課題研究目的與意義33-34
• 第2章 實驗材料與方法34-44
• 2.1 實驗材料34-37
• 2.1.1 細(xì)胞及培養(yǎng)基34
• 2.1.2 主要試劑34-35
• 2.1.3 主要儀器設(shè)備35
• 2.1.4 主要溶液配制35-37
• 2.2 實驗方法37-44
• 2.2.1 細(xì)胞操作方法37-39
• 2.2.2 實驗分組方法39-40
• 2.2.3 細(xì)胞漿蛋白與細(xì)胞核蛋白抽提方法40-41
• 2.2.4 BCA蛋白濃度測定方法41-42
• 2.2.5 SDS-PAGE電泳方法42
• 2.2.6 Western blot檢測方法42-43
• 2.2.7 MTT檢測方法43-44
• 第3章 結(jié)果與分析44-59
• 3.1 Western blot檢測實驗組結(jié)果分析44-56
• 3.1.1 復(fù)方甘草片對硫氧還蛋白亞細(xì)胞定位的影響44-45
• 3.1.2 GCA/LQ對硫氧還蛋白亞細(xì)胞定位的影響45-48
• 3.1.3 三七皂苷R1對硫氧還蛋白亞細(xì)胞定位的影響48-49
• 3.1.4 蕓香葉苷對硫氧還蛋白亞細(xì)胞定位的影響49-51
• 3.1.5 聯(lián)合用藥對硫氧還蛋白亞細(xì)胞定位的影響51-56
• 3.2 MTT比色法檢測實驗組結(jié)果分析56-59
• 第4章 結(jié)論與建議59-61
• 4.1 結(jié)論59-60
• 4.2 建議60-61
• 參考文獻61-67
• 攻讀碩士期間已發(fā)表的論文67-68
• 致謝68

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 俞凌燕;王毅;范驍輝;瞿海斌;程翼宇;;用組分剔除法研究中藥的有效組分[J];中國中藥雜志;2009年03期

2 李雪梅;胡義揚;段小華;馮琴;彭景華;許麗莉;趙剛;劉平;;基于均勻設(shè)計的抗肝纖維化中藥有效組分配伍研究[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;2010年01期

3 李寅超;何永俠;郜鳳香;郭麗麗;林飛;;中藥有效組分防治心肌缺血再灌注損傷機制研究進展[J];浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2014年04期

4 陳天朝;徐麗軍;宋薇;;通脈丸有效組分藥理作用探討[J];中醫(yī)研究;2013年02期

5 張建永;晏仁義;王嵐;王建露;王萬丹;侯瑞;劉紅亮;楊洪軍;梁日欣;楊濱;;丹參山楂有效組分配伍抗動脈粥樣硬化的實驗研究[J];中國中藥雜志;2013年12期

6 楊鴻;吳彥;馬琰巖;呂俊海;李晶哲;;基于均勻設(shè)計的中藥有效組分復(fù)方配伍研究[J];環(huán)球中醫(yī)藥;2012年03期

7 葉祖光;立效散及其單味藥中抑制磷酸鈣沉積形成的有效組分[J];國外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊);1995年05期

8 符詩聰,張慧娟,馬景,姚莉韻,張鳳華,杜寧;木芙蓉葉有效組分致突變與急性毒性實驗研究[J];廣西科學(xué);2002年01期

9 張培;李江;王耘;喬延江;;貝葉斯網(wǎng)絡(luò)在中藥有效組分五味預(yù)測中的應(yīng)用[J];世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化;2008年05期

10 李雪梅;李紅山;胡義揚;;中藥有效組分抗肝纖維化研究進展[J];中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志;2008年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李雪梅;胡義揚;;基于均勻設(shè)計的抗肝纖維化有效組分復(fù)方研究[A];第二十次全國中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議暨消化疾病診治進展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2008年

2 劉劍剛;史大卓;張紅霞;馬魯波;王永炎;程翼宇;欒連軍;王毅;;均勻設(shè)計法篩選理氣活血中藥有效組分及配伍的實驗研究[A];中國藥理學(xué)會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

3 陳蘭英;陳奇;劉榮華;畢明;;復(fù)脈湯有效組分對體外心臟過敏性觸發(fā)活動影響及心肌離子與酶的變化[A];中國藥理學(xué)會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

4 唐凱臨;葉浩;楊琳琳;曹志偉;;活血化瘀中藥有效組分抗肝纖維化作用機制的網(wǎng)絡(luò)分析[A];第二十次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

5 胡皆漢;韓秀文;楊振云;趙偉杰;郭永油;;藜蘆中一種新降壓有效組分的化學(xué)結(jié)構(gòu)[A];第四屆全國波譜學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];1986年

6 劉劍剛;史大卓;;活血化瘀中藥有效組分及配伍的細(xì)胞流變學(xué)研究[A];第五次全國中醫(yī)藥防治血栓病學(xué)術(shù)交流會暨中華中醫(yī)藥學(xué)會血栓病分會換屆改選工作會議論文集[C];2011年

7 劉崇敏;徐列明;;扶正化瘀復(fù)方有效組分群的配伍篩選和驗證[A];第二十次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

8 李十中;;黃芪中有效組分的分離研究[A];全國第5屆天然藥物資源學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2002年

9 孟憲麗;熊玉霞;楊娜;;瀉心湯有效組分對大鼠內(nèi)毒素性肺損傷的保護作用及其機制研究[A];中國藥理學(xué)會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

10 劉明平;吳慶光;姚海燕;;蛇床子有效組分透皮吸收研究進展[A];第四屆全國臨床中藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 何國;鮑世銓一個與蚯蚓結(jié)緣的科學(xué)家[N];中國消費者報;2009年

2 賈曉斌邋陳彥 李霞;中藥復(fù)方有效組分研究有待突破[N];中國醫(yī)藥報;2008年

3 李水根;計算機詳解配伍與藥效關(guān)系[N];健康報;2005年

4 徐亞靜;銜微木以填滄海[N];中國醫(yī)藥報;2007年

5 馬駿;清開靈有效成分獲解析[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

6 馬駿;復(fù)方中藥創(chuàng)新研究有了新模式[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

7 趙 雯;立題重實用 方法有創(chuàng)新[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

8 ;中藥真的不能治急癥嗎？[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王艷;四逆湯有效組分配伍對甲狀腺功能減退癥的治療作用及其機制研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 李坤;西青果治療感染性創(chuàng)面的有效組分及作用機制研究[D];遼寧師范大學(xué);2012年

3 張樹明;四逆散有效組分改善睡眠作用的機制研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2010年

4 鐘相根;清開靈有效組分抗大鼠局灶性腦缺血損傷的神經(jīng)營養(yǎng)機制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2004年

5 張云;活血安心方有效組分配伍對高脂血癥大鼠急性心肌梗死后心室重塑的影響及機理研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2012年

6 徐麗榮;清開靈有效組分干預(yù)缺血性中風(fēng)細(xì)胞粘附機制的研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2005年

7 朱浩君;阿維菌素有效組分的定點改造[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

8 高永紅;清開靈有效組分對大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺血再灌注損傷炎癥反應(yīng)的影響[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2005年

9 王冰;腦缺血大鼠血腦屏障和P-糖蛋白的變化以及清開靈有效組分的作用[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2007年

10 蒲旭峰;YSD降血糖有效組分篩選及其制劑學(xué)研究[D];四川大學(xué);2005年

，

本文編號：981781