本文關(guān)鍵詞：三氧化二砷下調(diào)miR-27a表達(dá)抑制人乳腺癌細(xì)胞生長及侵襲

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【摘要】：背景與目的:乳腺癌是危害女性健康的常見惡性腫瘤,其發(fā)病率呈逐年上升且年輕化趨勢。近些年來研究發(fā)現(xiàn)三氧化二砷對多種腫瘤有顯著的抑制作用,三氧化二砷作為一種新的腫瘤治療方案受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注,然而其發(fā)揮作用的具體分子機(jī)制仍未明確。因此,深入探討三氧化二砷的抗腫瘤機(jī)制,為臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)意義重大。本課題研究目的:1.探討三氧化二砷對人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231、SK-BR-3、MCF-7增殖、遷移侵襲和凋亡的影響。2.探討三氧化二砷能否通過下調(diào)mi R-27a的表達(dá)影響乳腺癌細(xì)胞增殖、遷移侵襲和凋亡,進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤作用。方法:1.以人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231、SK-BR-3、MCF-7為研究對象,采用噻唑藍(lán)比色法(MTT)、創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)、Transwell和流式細(xì)胞術(shù)檢測三氧化二砷對人乳腺癌細(xì)胞增殖、遷移侵襲和凋亡的影響。2.采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測三氧化二砷對人乳腺癌細(xì)胞mi R-27a表達(dá)的影響。3.通過脂質(zhì)體介導(dǎo)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染mi R-27a inhibitor下調(diào)乳腺癌細(xì)胞mi R-27a表達(dá),結(jié)合三氧化二砷處理細(xì)胞后,觀察細(xì)胞生長、遷移侵襲及凋亡的變化,并用蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)檢測mi R-27a下游靶蛋白FOXO1、Fbw7的表達(dá)。結(jié)果:1.三氧化二砷抑制乳腺癌細(xì)胞增殖。隨三氧化二砷濃度的遞增其對乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231、SK-BR-3及MCF-7細(xì)胞株增殖的抑制作用逐漸增強(qiáng)(P0.05),且呈現(xiàn)劑量依賴性。MTT實(shí)驗(yàn)測得乳腺癌細(xì)胞MCF-7和MDA-MB-231的IC50值均在10μM左右,乳腺癌細(xì)胞SK-BR-3的IC50值在8μM左右,我們將采用10μM藥物濃度作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)主要作用濃度。2.三氧化二砷抑制乳腺癌細(xì)胞的遷移侵襲能力,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。用8μM和10μM的三氧化二砷作用乳腺癌細(xì)胞48小時(shí),與對照組相比藥物處理組乳腺癌細(xì)胞的遷移侵襲能力明顯減弱,凋亡率明顯增加,且呈現(xiàn)劑量依賴性(P0.05)。3.三氧化二砷下調(diào)乳腺癌細(xì)胞mi R-27a的表達(dá)。用10μM的三氧化二砷作用乳腺癌細(xì)胞48小時(shí),RT-PCR結(jié)果表明,三氧化二砷處理組細(xì)胞mi R-27a表達(dá)明顯低于對照組(P0.05)。4.三氧化二砷通過下調(diào)mi R-27a的表達(dá)抑制乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移侵襲能力,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。分別采用三氧化二砷、瞬時(shí)轉(zhuǎn)染mi R-27a抑制劑及兩者共同作用的方法處理乳腺癌細(xì)胞,下調(diào)乳腺癌細(xì)胞mi R-27a的表達(dá)。結(jié)果顯示,用三氧化二砷處理和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染mi R-27a抑制劑均能抑制乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移侵襲能力,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,且三氧化二砷和轉(zhuǎn)染mi R-27a抑制劑共同作用后效果更加明顯(P0.05)。5.三氧化二砷和轉(zhuǎn)染mi R-27a抑制劑均使乳腺癌細(xì)胞中FOXO1、Fbw7蛋白表達(dá)升高,Cyclin E蛋白表達(dá)降低,且當(dāng)兩者共同作用后效果更加顯著。結(jié)論:1.三氧化二砷能夠通過下調(diào)乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231、SK-BR-3、MCF-7中mi R-27a的表達(dá),進(jìn)而抑制乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移侵襲能力,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。2.三氧化二砷能夠通過下調(diào)乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231、SK-BR-3、MCF-7中mi R-27a的表達(dá)進(jìn)而使其靶蛋白FOXO1、Fbw7表達(dá)升高,Cyclin E蛋白表達(dá)降低。
【關(guān)鍵詞】：乳腺癌 三氧化二砷 miR-27a Fbw7 侵襲
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-13
• 材料與儀器13-16
• 實(shí)驗(yàn)方法16-28
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-37
• 討論37-41
• 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-48
• 致謝48-49
• 附錄A 主要英文縮略圖簡表49-50
• 附錄B 個(gè)人簡歷50
• 附錄C 已發(fā)表論文50-51
• 附錄D 綜述51-59
• 參考文獻(xiàn)56-59

【相似文獻(xiàn)】

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1 曾凡鵬;三氧化二砷下調(diào)miR-27a表達(dá)抑制人乳腺癌細(xì)胞生長及侵襲[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2015年

2 高維寅;miR-27a作為前列腺癌早期診斷標(biāo)志物的初步研究[D];南昌大學(xué);2014年

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本文編號：981261