本文關(guān)鍵詞：淫羊藿素聯(lián)合氟尿嘧啶對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖的抑制作用

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【摘要】：目的：以人肝癌HepG2細(xì)胞為研究材料,探討淫羊藿素聯(lián)合氟尿嘧啶對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖的抑制作用和抑制其遷移及修復(fù),為淫羊藿素聯(lián)合氟尿嘧啶作為聯(lián)合用藥抗腫瘤提供理論依據(jù)。方法：以不同藥物處理體外培養(yǎng)的人肝癌HepG2細(xì)胞,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞貼壁情況和形態(tài)變化；用微量移液器20ul槍頭做細(xì)胞劃痕,于不同時(shí)間段觀察不同藥物處理后HepG2細(xì)胞的修復(fù)及遷移情況；在藥物作用不同時(shí)間段后用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制情況,并計(jì)算其生長(zhǎng)抑制率(IR)和藥物相互作用系數(shù)(CDI)；用流式細(xì)胞儀檢測(cè)分析不同藥物處理后細(xì)胞凋亡；用流式細(xì)胞儀檢測(cè)分析不同藥物處理后細(xì)胞周期。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法處理：所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料的描述用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示(x±s),單處理因素各組間樣本均數(shù)的多重比較采用單因素方差分析和LSD-t檢驗(yàn),兩組比較采用成組t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,定義P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果：1.倒置顯微鏡下發(fā)現(xiàn)正常HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞輪廓清楚。5-FU組、ICT組及ICT+5-FU組隨著藥物作用時(shí)間的增加,細(xì)胞形態(tài)逐漸變的不規(guī)則,數(shù)目不斷減少,偽足不斷增多,胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡,細(xì)胞逐漸貼壁不良,不斷出現(xiàn)凋亡小體,細(xì)胞脫落死亡逐漸增多,細(xì)胞碎片增多。2.MTT比色檢測(cè)法發(fā)現(xiàn)ICT.5-FU、ICT+5-FU各組作用于人肝癌HepG2細(xì)胞有明顯的抑制增殖的作用,且具有時(shí)間依賴性。同時(shí)亦發(fā)現(xiàn)在10～80umol/l濃度范圍內(nèi)ICT單獨(dú)及聯(lián)合5-FU對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖的抑制作用亦呈濃度依賴性；不同濃度的ICT與5-Fu聯(lián)合運(yùn)用后對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖的抑制作用均較各相應(yīng)單藥組明顯增加(P0.05)。ICT (10umol/l、20umol/l、40umol/l)與5-FU聯(lián)合作用人肝癌HepG2細(xì)胞24h、48h、72h,兩藥具有協(xié)同作用(CDI1),而ICT(80umol/l)與5-FU聯(lián)合作用人肝癌HepG2細(xì)胞48h、72h,兩藥具有拮抗作用(CDI1)。3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)周期結(jié)果5-FU、ICT均對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的S期周期有阻滯作用,并發(fā)現(xiàn)聯(lián)合用藥后對(duì)HepG2細(xì)胞的S期周期阻滯作用與各相應(yīng)單用藥物組比較,其阻滯作用增強(qiáng)。4.流式細(xì)胞檢測(cè)凋亡結(jié)果可見各組藥物對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞均有促進(jìn)凋亡的作用。其中聯(lián)合用藥組與各相應(yīng)單用藥物組對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞細(xì)胞凋亡數(shù)量明顯增加。5.細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)各組藥物均對(duì)HepG2細(xì)胞有明顯的抑制遷移和修復(fù)的作用,隨著各組藥物作用時(shí)間的延長(zhǎng),其作用越明顯。其中聯(lián)合用藥組與各相應(yīng)單用藥物組對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞遷移和修復(fù)的抑制作用明顯增強(qiáng)。結(jié)論：淫羊藿素對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖具有抑制作用,且呈時(shí)間-濃度依賴性,聯(lián)合5-FU后其抑制作用更加顯著。淫羊藿素對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的S期周期阻滯,聯(lián)合5-FU后其對(duì)S期周期阻滯作用增強(qiáng)。淫羊藿素對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞有促進(jìn)凋亡的作用,聯(lián)合5-FU后其促進(jìn)凋亡的作用增強(qiáng)。淫羊藿素、氟尿嘧啶對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞具有抑制其遷移和修復(fù)的能力,聯(lián)合5-FU后其抑制其遷移和修復(fù)的能力增強(qiáng)。
【關(guān)鍵詞】：淫羊藿素 氟尿嘧啶 HepG2細(xì)胞 肝癌 抑制
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-24
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料14-17
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法17-23
• 3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理23-24
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-35
• 1、普通顯微鏡下的HEPG2細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變24-27
• 2、MTT檢測(cè)不同藥物對(duì)HEPG2細(xì)胞增殖的影響27-29
• 3、不同藥物對(duì)HEPG2細(xì)胞遷移的影響29-32
• 4、不同用藥對(duì)HEPG2細(xì)胞周期的影響32-33
• 5、不同藥物對(duì)HEPG2細(xì)胞凋亡的影響33-35
• 討論35-39
• 總結(jié)與展望39-40
• 1、課題總結(jié)39
• 2、課題展望39-40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 綜述43-50
• 參考文獻(xiàn)48-50
• 攻讀碩士研究生期間發(fā)表論文情況50-51
• 致謝51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 解麗梅;劉丹丹;;肝細(xì)胞癌直方圖血流定量分析參數(shù)與腫瘤血管生成的相關(guān)性研究[J];實(shí)用醫(yī)技雜志;2007年25期

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3 王閣;;原發(fā)性肝癌化療的挑戰(zhàn)與機(jī)遇[J];中華肝臟病雜志;2006年07期

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本文編號(hào)：974990