本文關(guān)鍵詞：阿霉素誘導(dǎo)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞自噬和氧化應(yīng)激變化及相互作用

  更多相關(guān)文章： 自噬 氧自由基 阿霉素 多發(fā)性骨髓瘤

【摘要】：目的:探討阿霉素(doxorubicin,DOX)誘導(dǎo)對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系RPMI-8226細(xì)胞自噬和活性氧簇(reactive oxidative species,ROS)生成的影響,及其相互作用關(guān)系。方法:不同濃度阿霉素誘導(dǎo)RPMI-8226細(xì)胞24 h,采用Western blot技術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)beclin1、LC3等自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。采用DCFH-DA熒光染色法檢測RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)ROS的水平,熒光顯微鏡采集圖像。采用氧自由基清除劑N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-Lcysteine,NAC)及Tempol處理RPMI-8226細(xì)胞后,通過Western blot技術(shù)檢測阿霉素誘導(dǎo)下細(xì)胞內(nèi)beclin1、LC3等蛋白的表達(dá)水平。采用自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)處理PRMI-8226細(xì)胞后,檢測阿霉素誘導(dǎo)下細(xì)胞內(nèi)ROS和凋亡的表達(dá)水平。結(jié)果:RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)beclin1、LC3B/LC3A表達(dá)水平呈阿霉素劑量依賴性增加,當(dāng)阿霉素誘導(dǎo)濃度達(dá)2 mg/L時,與對照組比較顯著增加(P0.05)。采用阿霉素2 mg/L誘導(dǎo)RPMI-8226細(xì)胞,通過熒光顯微鏡觀察,ROS水平較對照組明顯增加。氧自由基清除劑NAC和Tempol處理RPMI-8226細(xì)胞后,beclin1和LC3II/I的表達(dá)水平較阿霉素處理組下降。采用自噬抑制劑3-MA處理細(xì)胞后,RPMI-8226細(xì)胞內(nèi)ROS和凋亡的水平較阿霉素處理組及對照組增加。結(jié)論:阿霉素能促進PRMI-8226細(xì)胞內(nèi)自噬和ROS的生成,阻斷自噬能增加阿霉素誘導(dǎo)下ROS和凋亡的水平,抑制ROS后能減少阿霉素作用下多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的自噬產(chǎn)生。
【關(guān)鍵詞】：自噬 氧自由基 阿霉素 多發(fā)性骨髓瘤
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R733.3
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-11
• 1 材料、試劑和儀器11-14
• 1.1 材料11
• 1.2 主要試劑11-12
• 1.3 主要實驗儀器12-13
• 1.4 主要試劑配制13-14
• 2 實驗方法14-16
• 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)14
• 2.2 Western Blot檢測LC3和Beclin1的蛋白表達(dá)14-16
• 2.3 DCFH-DA熒光探針檢測細(xì)胞內(nèi)總ROS的變化16
• 2.4 流式細(xì)胞術(shù)annexin V/PI雙標(biāo)法檢測細(xì)胞凋亡16
• 2.5 統(tǒng)計學(xué)處理16
• 3 結(jié)果16-20
• 3.1 阿霉素處理后RPMI-8226 細(xì)胞LC3和Beclin1表達(dá)水平16-17
• 3.2 抗氧化劑NAC和Temol處理后Beclin1和LC317-18
• 3.3 阿霉素、自噬抑制劑及抗氧化劑處理后RPMI-8226 細(xì)胞ROS變化18-19
• 3.4 3-MA處理后RPMI-8226 細(xì)胞凋亡變化19-20
• 4 討論20-23
• 全文總結(jié)23-24
• 參考文獻(xiàn)24-27
• 文獻(xiàn)綜述 自噬與ROS研究進展及在疾病中的作用27-35
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 致謝35-36
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文36

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Jessica A Williams;Sharon Manley;Wen-Xing Ding;;New advances in molecular mechanisms and emerging therapeutic targets in alcoholic liver diseases[J];World Journal of Gastroenterology;2014年36期

，

本文編號：971354