本文關(guān)鍵詞：三維培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞耐藥性及放射敏感性的研究

  更多相關(guān)文章： 三維細(xì)胞培養(yǎng) 腫瘤微環(huán)境 腫瘤轉(zhuǎn)移及抑制

【摘要】：目的建立三維細(xì)胞模型,觀察其細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,研究三維培養(yǎng)對(duì)腫瘤細(xì)胞耐藥性及放射敏感性的影響,并比較與單層培養(yǎng)的差異,進(jìn)一步探討其應(yīng)用前景。方法1、建立體外人U87腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞、人HDF成纖維細(xì)胞、共培養(yǎng)相同濃度兩種細(xì)胞的3D和2D培養(yǎng)模型,熒光相差顯微鏡觀察并記錄其形態(tài)學(xué)變化。2、分別給予不同劑量照射和不同濃度藥物處理3D及2D細(xì)胞,熒光相差顯微鏡觀察3D及2D形態(tài)學(xué)變化以及遷移增殖能力,MTT法測(cè)定各組細(xì)胞存活率。結(jié)果1、2D培養(yǎng)人HDF成纖維細(xì)胞和共培養(yǎng)細(xì)胞呈單層平面分布,人U87腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞可在平面聚集成點(diǎn),3D培養(yǎng)顯示人U87腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞形成團(tuán)狀聚集,3D共培養(yǎng)細(xì)胞顯示聚集形態(tài)比較貼近單純培養(yǎng)人HDF成纖維細(xì)胞走向。2、2D培養(yǎng)細(xì)胞隨著藥物濃度增加,形態(tài)明顯改變及部分細(xì)胞脫離培養(yǎng)皿,3D細(xì)胞培養(yǎng)相同濃度藥物則無(wú)明顯變化甚至人U87腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)依舊能形成3D結(jié)構(gòu),MTT顯示在10μmol/L各組細(xì)胞2D及3D培養(yǎng)存活率差異不明顯,隨著濃度增加各組細(xì)胞3D較2D培養(yǎng)存活率明顯升高。3、培養(yǎng)六天觀察:2D培養(yǎng)U87、HDF、Co-culture三組細(xì)胞予2Gy輻照組細(xì)胞形態(tài)基本正常;8Gy組人U87腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞形態(tài)萎縮且多數(shù)細(xì)胞死亡;12Gy組細(xì)胞多呈碎片。3D培養(yǎng)結(jié)果顯示2Gy、4Gy、8Gy及12Gy組和對(duì)照組形態(tài)無(wú)明顯區(qū)別,但12Gy組增殖能力下降。MTT結(jié)果顯示除人HDF成纖維細(xì)胞2Gy組3D和2D培養(yǎng)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.05),其它組3D細(xì)胞存活率明顯高于單層培養(yǎng)細(xì)胞(P0.05)。進(jìn)一步延長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)結(jié)果顯示3D培養(yǎng)人U87腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞在對(duì)照組、2Gy、4Gy、8Gy組均能形成三維結(jié)構(gòu),隨著劑量增加遷移至末端的時(shí)間相應(yīng)變長(zhǎng),12Gy組少部分細(xì)胞可遷移至1/2處,無(wú)3D結(jié)構(gòu)形成。而2D細(xì)胞隨著時(shí)間延長(zhǎng)結(jié)果無(wú)明顯變化4Gy組增殖能力明顯降低,12Gy幾乎大部分死亡。結(jié)論3D培養(yǎng)相對(duì)于2D培養(yǎng)的細(xì)胞具有耐藥性及輻射不敏感性,腫瘤細(xì)胞差異更為明顯,更能模擬腫瘤細(xì)胞及與間質(zhì)之間的作用過(guò)程和作用機(jī)制,接近體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)的微環(huán)境,直觀的展現(xiàn)腫瘤細(xì)胞黏附、侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的生物學(xué)過(guò)程。表明3D培養(yǎng)的三維腫瘤細(xì)胞結(jié)構(gòu)更接近人體器官結(jié)構(gòu),培養(yǎng)細(xì)胞具有更好的增殖轉(zhuǎn)移能力,更接近于人體實(shí)體腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的可能機(jī)制,對(duì)放射增敏劑、化療藥物效果研究、對(duì)測(cè)定研究腫瘤抗輻射、耐藥基因表達(dá)改變及信號(hào)通路激活改變細(xì)胞間質(zhì)及細(xì)胞表型提供更貼近實(shí)體腫瘤的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。
【關(guān)鍵詞】：三維細(xì)胞培養(yǎng) 腫瘤微環(huán)境 腫瘤轉(zhuǎn)移及抑制
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R73-36
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-13
• 參考文獻(xiàn)11-13
• 第一部分 建立U87、HDF和共培養(yǎng)細(xì)胞的 3D細(xì)胞培養(yǎng)模型13-21
• 材料和方法13-17
• 結(jié)果17-19
• 討論19-20
• 參考文獻(xiàn)20-21
• 第二部分 3D和2D培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞耐藥性及放射敏感性的研究21-33
• 材料和方法21-24
• 結(jié)果24-29
• 討論29-31
• 參考文獻(xiàn)31-33
• 小結(jié)33-34
• 綜述 三維細(xì)胞模型在腫瘤實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用34-41
• 參考文獻(xiàn)38-41
• 中英文縮略詞表41-42
• 攻讀學(xué)位期間學(xué)術(shù)活動(dòng)總結(jié)42-43
• 致謝43-44

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張萬(wàn)岱,肖冰,張振書(shū);腫瘤細(xì)胞耐藥的哲學(xué)內(nèi)涵[J];醫(yī)學(xué)與哲學(xué);2000年12期

2 姜夕鋒,徐功立;腫瘤細(xì)胞耐藥表型及其機(jī)制的研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)藥;2001年05期

3 張萍,王大章,鄭光勇,劉曙光;熱療對(duì)腫瘤細(xì)胞耐藥性的影響[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2003年02期

4 王鑫;王潔;張燕;高志光;;腫瘤細(xì)胞耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展[J];癌癥進(jìn)展;2007年01期

5 趙躍然;王美嶺審校;;腫瘤細(xì)胞耐藥性的分子生物學(xué)[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè));1991年04期

6 楊純正;;腫瘤細(xì)胞耐藥基因表達(dá)的意義及其逆轉(zhuǎn)新策略[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;2001年04期

7 楊純正;腫瘤細(xì)胞耐藥基因研究進(jìn)展[J];中國(guó)腫瘤;1996年07期

8 何明生;熱休克蛋白與腫瘤細(xì)胞耐藥[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志;1998年03期

9 楊純正;;腫瘤細(xì)胞耐藥基因研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究通訊;1998年05期

10 康楷,黃林;腫瘤細(xì)胞耐藥及逆轉(zhuǎn)的研究進(jìn)展[J];貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2002年01期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 李春海;陳高明;田方;程國(guó)軍;孫麗亞;;腫瘤細(xì)胞耐藥機(jī)理研究進(jìn)展[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊(cè)）[C];1999年

2 王玉芝;付東;史兆興;張彥彬;;細(xì)胞膜磷脂在腫瘤細(xì)胞耐藥性中的作用及可能機(jī)制探討[A];第七屆全國(guó)生物膜學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要匯編[C];1999年

3 朱虹;楊□;楊曉春;趙玉勤;薛濤;王金成;何俏軍;楊波;;低氧自噬引起的腫瘤細(xì)胞耐藥機(jī)制研究[A];2011醫(yī)學(xué)科學(xué)前沿論壇第十二屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

4 蔡霈;方唯碩;;一種能抑制腫瘤細(xì)胞耐藥的新型紫杉烷化合物[A];2013醫(yī)學(xué)前沿論壇暨第十三屆全國(guó)腫瘤藥理與化療學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

5 張燕;徐珊;周建偉;;JWA通過(guò)誘導(dǎo)線粒體通路凋亡逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥性[A];第二屆中國(guó)醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)暨細(xì)胞生物學(xué)教學(xué)改革會(huì)議論文集[C];2008年

6 張志剛;楊金銘;William N.Hait;;泛素化調(diào)節(jié)對(duì)腫瘤細(xì)胞耐藥基因蛋白P-gp的穩(wěn)定型和功能的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2005年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

7 張萍;王大章;鄭光勇;;熱療對(duì)癌細(xì)胞耐藥性的影響[A];第一屆全國(guó)口腔頜面部腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 周中軍;腫瘤細(xì)胞耐藥機(jī)理及其逆轉(zhuǎn)的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1993年

2 楊冬艷;血管緊張素Ⅱ與核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB對(duì)腫瘤細(xì)胞耐藥基因調(diào)控機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 馮飛;三維培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞耐藥性及放射敏感性的研究[D];蘇州大學(xué);2015年

2 張燕;JWA通過(guò)線粒體凋亡通路影響腫瘤細(xì)胞耐藥性[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

3 喻永林;P7抑制腫瘤生長(zhǎng)及逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥的作用機(jī)制研究[D];暨南大學(xué);2012年

4 周蓓;涉及腫瘤細(xì)胞耐藥行為的壓電電化學(xué)相關(guān)研究[D];湖南師范大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：971234