本文關鍵詞：三維培養(yǎng)腫瘤細胞耐藥性及放射敏感性的研究

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【摘要】：目的建立三維細胞模型,觀察其細胞形態(tài)學變化,研究三維培養(yǎng)對腫瘤細胞耐藥性及放射敏感性的影響,并比較與單層培養(yǎng)的差異,進一步探討其應用前景。方法1、建立體外人U87腦膠質瘤細胞、人HDF成纖維細胞、共培養(yǎng)相同濃度兩種細胞的3D和2D培養(yǎng)模型,熒光相差顯微鏡觀察并記錄其形態(tài)學變化。2、分別給予不同劑量照射和不同濃度藥物處理3D及2D細胞,熒光相差顯微鏡觀察3D及2D形態(tài)學變化以及遷移增殖能力,MTT法測定各組細胞存活率。結果1、2D培養(yǎng)人HDF成纖維細胞和共培養(yǎng)細胞呈單層平面分布,人U87腦膠質瘤細胞可在平面聚集成點,3D培養(yǎng)顯示人U87腦膠質瘤細胞形成團狀聚集,3D共培養(yǎng)細胞顯示聚集形態(tài)比較貼近單純培養(yǎng)人HDF成纖維細胞走向。2、2D培養(yǎng)細胞隨著藥物濃度增加,形態(tài)明顯改變及部分細胞脫離培養(yǎng)皿,3D細胞培養(yǎng)相同濃度藥物則無明顯變化甚至人U87腦膠質瘤細胞繼續(xù)培養(yǎng)依舊能形成3D結構,MTT顯示在10μmol/L各組細胞2D及3D培養(yǎng)存活率差異不明顯,隨著濃度增加各組細胞3D較2D培養(yǎng)存活率明顯升高。3、培養(yǎng)六天觀察:2D培養(yǎng)U87、HDF、Co-culture三組細胞予2Gy輻照組細胞形態(tài)基本正常;8Gy組人U87腦膠質瘤細胞形態(tài)萎縮且多數(shù)細胞死亡;12Gy組細胞多呈碎片。3D培養(yǎng)結果顯示2Gy、4Gy、8Gy及12Gy組和對照組形態(tài)無明顯區(qū)別,但12Gy組增殖能力下降。MTT結果顯示除人HDF成纖維細胞2Gy組3D和2D培養(yǎng)無統(tǒng)計學差異(P=0.05),其它組3D細胞存活率明顯高于單層培養(yǎng)細胞(P0.05)。進一步延長時間培養(yǎng)結果顯示3D培養(yǎng)人U87腦膠質瘤細胞在對照組、2Gy、4Gy、8Gy組均能形成三維結構,隨著劑量增加遷移至末端的時間相應變長,12Gy組少部分細胞可遷移至1/2處,無3D結構形成。而2D細胞隨著時間延長結果無明顯變化4Gy組增殖能力明顯降低,12Gy幾乎大部分死亡。結論3D培養(yǎng)相對于2D培養(yǎng)的細胞具有耐藥性及輻射不敏感性,腫瘤細胞差異更為明顯,更能模擬腫瘤細胞及與間質之間的作用過程和作用機制,接近體內細胞生長的微環(huán)境,直觀的展現(xiàn)腫瘤細胞黏附、侵襲和遠處轉移的生物學過程。表明3D培養(yǎng)的三維腫瘤細胞結構更接近人體器官結構,培養(yǎng)細胞具有更好的增殖轉移能力,更接近于人體實體腫瘤復發(fā)與轉移的可能機制,對放射增敏劑、化療藥物效果研究、對測定研究腫瘤抗輻射、耐藥基因表達改變及信號通路激活改變細胞間質及細胞表型提供更貼近實體腫瘤的實驗技術。
【關鍵詞】：三維細胞培養(yǎng) 腫瘤微環(huán)境 腫瘤轉移及抑制
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R73-36
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-13
• 參考文獻11-13
• 第一部分 建立U87、HDF和共培養(yǎng)細胞的 3D細胞培養(yǎng)模型13-21
• 材料和方法13-17
• 結果17-19
• 討論19-20
• 參考文獻20-21
• 第二部分 3D和2D培養(yǎng)腫瘤細胞耐藥性及放射敏感性的研究21-33
• 材料和方法21-24
• 結果24-29
• 討論29-31
• 參考文獻31-33
• 小結33-34
• 綜述 三維細胞模型在腫瘤實驗中的應用34-41
• 參考文獻38-41
• 中英文縮略詞表41-42
• 攻讀學位期間學術活動總結42-43
• 致謝43-44

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本文編號：971234