本文關(guān)鍵詞：Notch-1在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其臨床意義

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【摘要】：目的:結(jié)直腸癌是一種嚴(yán)重威脅人類生命健康的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一,統(tǒng)計(jì)分析報(bào)告顯示其在常見癌癥中位居第三位,發(fā)病率及病死率呈現(xiàn)出日益增高的趨勢(shì)。結(jié)直腸癌是多種因素、多個(gè)基因相互作用逐步發(fā)展的結(jié)果,但其具體的發(fā)生發(fā)展機(jī)制尚不完全明確。Notch-1包含多種表皮生長(zhǎng)因子樣重復(fù)序列組成的細(xì)胞外區(qū)和多種不同結(jié)構(gòu)域組成的細(xì)胞內(nèi)區(qū),相對(duì)分子質(zhì)量約為30k D,羧基端位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),氨基端位于細(xì)胞外。它是一個(gè)廣泛存在于生物進(jìn)化過(guò)程中的高度保守分子,參與細(xì)胞信號(hào)的傳導(dǎo),調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化、凋亡,并且與腫瘤發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)Notch-1在結(jié)直腸癌組織過(guò)表達(dá),與結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展有著一定的關(guān)聯(lián)。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(q RT-PCR)檢測(cè)結(jié)直腸癌患者組織中Notch-1的表達(dá),同時(shí)用CCK-8法研究不同濃度DAPT對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖活性凋亡的影響,為深入了解Notch-1在結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮的作用提供理論依據(jù)。方法:1收集2002年9月~2012年9月40例來(lái)自河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院、河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院結(jié)直腸癌手術(shù)標(biāo)本。每例標(biāo)本分別取自結(jié)直腸原發(fā)腫瘤組織及上(下)切緣正常黏膜且術(shù)后病理證實(shí)無(wú)癌組織侵犯的癌旁組織。新鮮標(biāo)本離體后迅速置于液氮中,于-80℃保存。40名患者術(shù)前未接受任何化療和放療。2選取結(jié)直腸癌細(xì)胞株HCT116進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。3應(yīng)用q RT-PCR方法檢測(cè)40例結(jié)直腸癌組織及對(duì)應(yīng)結(jié)直腸正常黏膜組織中Notch-1的表達(dá)水平,比較兩組間表達(dá)差異,并分析Notch-1的表達(dá)與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的關(guān)系。4對(duì)HCT116細(xì)胞進(jìn)行不同濃度DAPT處理,將不同濃度DAPT處理后細(xì)胞組作為實(shí)驗(yàn)組,將未處理細(xì)胞組作為對(duì)照組。5 HCT116細(xì)胞進(jìn)行不同濃度的DAPT處理后1、2、3、4d,分別應(yīng)用CCK-8法檢測(cè)4個(gè)時(shí)點(diǎn)的OD值,并繪制出細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,觀察對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組間細(xì)胞增殖變化情況。6應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)不同濃度DAPT處理后HCT116細(xì)胞凋亡情況,比較對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組之間的差異。7采用SPSS19.0及Graph Pad Prism 5.0統(tǒng)計(jì)軟件,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析,計(jì)量資料以中位數(shù)(四分位數(shù))表示,兩組間配對(duì)樣本采用非參數(shù)檢驗(yàn)、多組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析,重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)采用雙因素方差分析。繪制各臨床病理資料的Kaplan-Meier生存曲線,采用時(shí)序檢驗(yàn)比較兩條曲線的差異。生存時(shí)間為自手術(shù)之日起至其死亡或末次隨訪日所經(jīng)歷的時(shí)間,以月為單位計(jì)算。采用Cox回歸分析對(duì)基因表達(dá)和臨床參數(shù)進(jìn)行多因素生存分析,分析影響生存的危險(xiǎn)因素,以P0.05表示差異存在有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1 Notch-1在40例結(jié)直腸癌組織中表達(dá)量0.0568(0.0302,0.0757),正常黏膜組織中表達(dá)量0.0107(0.0068,0.0231),可見Notch-1在癌組織中的表達(dá)明顯高于正常黏膜組織中的表達(dá)(P0.0001),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 Notch-1在腫瘤大于等于5cm表達(dá)水平為0.0686(0.0508,0.1321)明顯高于腫瘤小于5cm表達(dá)水平0.0500(0.0286,0.0660)(ss=0.0236);Notch-1表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、年齡、性別、浸潤(rùn)深度無(wú)明顯關(guān)系,各指標(biāo)組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。3 HCT116細(xì)胞不同濃度DAPT處理后Notch-1表達(dá)量出現(xiàn)下降。4 HCT116細(xì)胞不同濃度DAPT處理后1、2、3、4d,通過(guò)CCK-8法檢測(cè)各組細(xì)胞增殖情況,結(jié)果顯示:10μM DAPT可以明顯抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0001)。5 HCT116細(xì)胞中,實(shí)驗(yàn)組10μM早期凋亡率(2.785±0.4070)%明顯高于對(duì)照組(0.2950±0.1530)%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0046);實(shí)驗(yàn)組5μM早期凋亡率(0.8250±0.1934)%高于對(duì)照組(0.2950±0.1530)%,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0981);實(shí)驗(yàn)組1μM早期凋亡率(0.6150±0.1472)%高于對(duì)照組(0.2950±0.1530)%,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.2063)。6隨訪生存率,并行單因素發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌患者生存率與淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移(P=0.0002)及腫瘤侵潤(rùn)深度(P=0.0137)有關(guān),與性別、年齡、腫瘤大小、Notch-1表達(dá)水平無(wú)關(guān)(P0.05)。7多因素Cox生存分析:Cox多因素生存分析結(jié)果顯示影響結(jié)直腸癌患者生存率獨(dú)立危險(xiǎn)因素是淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移(P=0.003),未發(fā)現(xiàn)性別、年齡、腫瘤大小、Notch-1表達(dá)水平、浸潤(rùn)深度與結(jié)直腸癌患者生存率有明顯相關(guān)性(P0.05)。結(jié)論:1 Notch-1在結(jié)直腸癌中高表達(dá),提示其可能對(duì)結(jié)直腸癌具有癌基因作用。2 Notch-1在大于等于5cm的腫瘤表達(dá)水平上調(diào)更明顯,提示其可能對(duì)判定結(jié)直腸癌惡性程度和預(yù)后有一定的意義。3 Notch-1可能通過(guò)促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的增殖,發(fā)揮癌基因的作用。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)直腸惡性腫瘤 Notch-1 增殖 調(diào)亡 生存率
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.34
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 英文縮寫10-11
• 前言11
• 材料與方法11-19
• 結(jié)果19-20
• 附圖20-25
• 附表25-27
• 討論27-30
• 結(jié)論30
• 參考文獻(xiàn)30-35
• 綜述35-43
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 致謝43-45
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷45

【引證文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 陳銀;Notch3、Lgr5和NF-κB在人大腸腺癌組織中的表達(dá)及意義[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

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本文編號(hào)：963376