本文關(guān)鍵詞：結(jié)腸黑變病與結(jié)腸癌比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究

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【摘要】：目的:應(yīng)用雙向凝膠電泳蛋白質(zhì)分離技術(shù)(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)及凝膠圖像對(duì)比分析,對(duì)結(jié)腸黑變病(melanosiscoli,MC)、結(jié)腸癌及正常組織進(jìn)行蛋白質(zhì)分離,尋找三者差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn),以探索MC的發(fā)生、發(fā)展及其與結(jié)腸癌的相關(guān)性。方法:1.采集我院內(nèi)鏡室2013.01-2014.06就診患者的結(jié)腸組織標(biāo)本,分為MC組7例、結(jié)腸癌組6例及正常對(duì)照組6例;2.結(jié)腸組織樣品處理后,取上清液用Bradford方法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度;應(yīng)用2-DE技術(shù)進(jìn)行第一向固相pH梯度等電聚焦電泳(immobilized pH gradient isoelectric focusing,IPG-IEF)及第二向十二烷基硫酸鈉-聚丙酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)建立MC、結(jié)腸癌及正常人結(jié)腸組織的雙向凝膠圖譜。3.應(yīng)用掃描儀對(duì)凝膠掃描獲取圖像,使用imagemaster 7.0軟件分別分析對(duì)比MC患者與結(jié)腸癌患者及正常人的凝膠圖像,篩選出差異表達(dá)蛋白質(zhì)點(diǎn)。結(jié)果:1.獲取的凝膠圖像顯示出良好的重復(fù)性。各斑點(diǎn)間分離清晰,各組內(nèi)凝膠在蛋白質(zhì)斑點(diǎn)位置上均具有較好的重復(fù)性,可以進(jìn)行圖像分析;2.結(jié)腸癌、MC、正常組織凝膠圖像的平均蛋白質(zhì)斑點(diǎn)數(shù)分別為2150±240,1970±138,2028±176。凝膠圖譜進(jìn)行比對(duì)后,總共找到置信度在95%以上的差異點(diǎn)14個(gè)。MC與正常組織對(duì)比有6個(gè)差異點(diǎn),其中4個(gè)蛋白點(diǎn)在正常組織中表達(dá)量較大,2個(gè)點(diǎn)在MC中表達(dá)量比較大。僅在MC中表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)有1個(gè)(P0.05);MC與結(jié)腸癌組織對(duì)比有8個(gè)差異點(diǎn),其中1個(gè)蛋白點(diǎn)在MC中的表達(dá)量比較大,7個(gè)蛋白點(diǎn)在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)量比較大。僅在結(jié)腸癌組表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)有2個(gè)(P0.05)。結(jié)論:通過2-DE技術(shù)及凝膠圖像比對(duì)分析,分析了MC與結(jié)腸癌比較蛋白質(zhì)組學(xué),發(fā)現(xiàn)MC與正常結(jié)腸組織之間及與結(jié)腸癌組織之間存在差異表達(dá)的蛋白質(zhì)。這可能揭示了MC和結(jié)腸癌的發(fā)生、發(fā)展的生物學(xué)行為,為MC的研究提供新思路、新線索。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)腸黑變病 結(jié)腸癌 蛋白質(zhì)組學(xué) 雙向凝膠電泳
【學(xué)位授予單位】：河南科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.35;R574.62
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 第1章 緒論8-26
• 1.1 研究背景8-24
• 1.1.1 結(jié)腸黑變病的研究8-11
• 1.1.2 結(jié)腸癌的研究11-13
• 1.1.3 結(jié)腸黑病變與大腸腫瘤的研究13-14
• 1.1.4 蛋白質(zhì)組學(xué)的研究14-22
• 1.1.5 蛋白質(zhì)組學(xué)與疾病的研究22-24
• 1.2 研究目的24
• 1.3 研究意義24-26
• 第2章 材料與方法26-38
• 2.1 研究對(duì)象26
• 2.2 主要試劑26-27
• 2.3 主要試劑配方27-30
• 2.3.1 組織樣品制備相關(guān)溶液27-28
• 2.3.2 二維電泳相關(guān)緩沖液及溶液28-30
• 2.4 主要儀器30-31
• 2.5 實(shí)驗(yàn)方法31-38
• 2.5.1 結(jié)腸組織蛋白樣品的制備31-33
• 2.5.2 第一向固相p H梯度的等電聚焦電泳（IPG-IEF）33-34
• 2.5.3 第二向垂直平板SDS-PAGE電泳34-35
• 2.5.4 SDS聚丙酰胺凝膠的染色及保存35-36
• 2.5.5 凝膠圖像的獲取及比對(duì)分析36-38
• 第3章 結(jié)果38-52
• 3.1 結(jié)腸組織標(biāo)本 2-DE凝膠圖像的重復(fù)性38-40
• 3.2 不同樣品組織獲取的 2-DE凝膠圖像40-42
• 3.3 圖像分析及比對(duì)結(jié)果42-52
• 第4章 討論52-58
• 第5章 結(jié)論58-60
• 參考文獻(xiàn)60-70
• 縮略語詞匯表70-71
• 致謝71-72
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果72

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 阮麗榮,杜英,張清勇,李富廣,王東升;重癥肌無力患者胸腺提取液電泳及其活性分析[J];河南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2000年01期

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本文編號(hào)：931916