本文關(guān)鍵詞：基于識(shí)別血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2（VEGFR2）的腫瘤靶向治療研究

  更多相關(guān)文章： 康普瑞汀 阿霉素 二氧化硅 D-多肽 VEGFR2 聯(lián)合治療

【摘要】：化療是目前治療惡性腫瘤必不可少的有效方法,由于化療藥物不具靶向性,對(duì)癌細(xì)胞和正常細(xì)胞均有殺傷作用,往往會(huì)導(dǎo)致很?chē)?yán)重的毒副作用。因此,在腫瘤學(xué)研究中,找出更簡(jiǎn)單、更多選擇性的直擊腫瘤部位的治療方法及合適的藥物載體已成為迫切需要。其中,脂質(zhì)體是一種以其良好的生物相容性、被動(dòng)靶向性等優(yōu)點(diǎn)被用于包載疏水性、親水性的抗腫瘤藥物已經(jīng)得到廣泛關(guān)注,但是脂質(zhì)體的物化性質(zhì)不穩(wěn)定,在進(jìn)入體內(nèi)后囊泡易破裂,不僅導(dǎo)致其運(yùn)載的藥物在到達(dá)腫瘤部位之前就泄露了,而無(wú)法達(dá)到應(yīng)有的緩釋效果,并且使結(jié)合于脂質(zhì)體表面的配體無(wú)法完全發(fā)揮尋靶作用,嚴(yán)重影響了藥物于臨床的應(yīng)用。而且對(duì)于現(xiàn)今腫瘤的多樣性及特殊性,單一的治療方案已不能達(dá)到預(yù)期的效果,靶向聯(lián)合治療逐漸成為治療腫瘤的有效方法之一。對(duì)于聯(lián)合治療,如果共載藥物能夠同時(shí)進(jìn)行靶向釋放,這將成為一個(gè)重大的進(jìn)步。為了達(dá)到這一目標(biāo),在前期工作的基礎(chǔ)上,本論文探索構(gòu)建了一種新型的二合一復(fù)合脂質(zhì)體遞藥系統(tǒng)(TWOLips),該系統(tǒng)是由兩種單一的載藥脂質(zhì)體組裝而成,而且制備過(guò)程簡(jiǎn)單,即一種脂質(zhì)體表面經(jīng)過(guò)二氧化硅修飾后,再與另一種脂質(zhì)體孵育即得。通過(guò)透射電子顯微鏡、紅外光譜、激光共聚焦顯微鏡等方法表征,結(jié)果顯示該制劑具有脂質(zhì)-硅-脂質(zhì)多層復(fù)合結(jié)構(gòu),提示TWOLips制備成功。以阿霉素和康普瑞汀作為模型藥物,制得的WOLips平均粒徑在100nm左右,具有相對(duì)較高的藥物包封率(阿霉素包封率為96.8±0.9%,康普瑞汀包封率為78.4±1.2%)和穩(wěn)定性,并且在體外具有良好的釋藥性能。為了增強(qiáng)該載體的主動(dòng)靶向性,本課題合成了一條來(lái)源于天然血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的D-氨基酸多肽(RIV),該肽與腫瘤微血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR2)具有高度親和性。而VEGFI匕高表達(dá)于腫瘤細(xì)胞表面及腫瘤微環(huán)境,并且VEGF/VEGFR2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)腫瘤部位新生血管的形成具有促進(jìn)作用,可通過(guò)阻斷該信號(hào)通路來(lái)抑制腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移。在此作用機(jī)制下,通過(guò)細(xì)胞攝取試驗(yàn)、小動(dòng)物活體成像技術(shù)評(píng)價(jià)RIV肽在體內(nèi)外對(duì)VEGFR2均具有高度靶向性,并且經(jīng)孵育修飾于WOLips表面,導(dǎo)致該載體系統(tǒng)在體內(nèi)外均能夠有力地、高度選擇性地結(jié)合于VEGFR2。體外藥效試驗(yàn)結(jié)果顯示,與其他制劑(阿霉素(DOX)、阿霉素脂質(zhì)體(L[D])、阿霉素脂質(zhì)體與康普瑞汀脂質(zhì)體混合物(L[D]+L[C])、無(wú)RIV肽修飾的TWOLips(L[CD]))相比,經(jīng)RIV肽介導(dǎo)的TWOLips (RIV-L[CD])能夠顯著降低藥物對(duì)A375細(xì)胞及HUVEC細(xì)胞的IC5o值,顯示了聯(lián)合給藥及藥物序貫釋放的優(yōu)勢(shì)以及RIV肽的介導(dǎo)對(duì)載藥系統(tǒng)主動(dòng)靶向性的積極作用。體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)也顯示了相似的趨勢(shì),RIV-L[CD]能夠顯著抑制A375皮下瘤的生長(zhǎng)及腫瘤新生血管的形成,并且提高了荷瘤小鼠的存活率。對(duì)載體進(jìn)行安全性評(píng)價(jià),通過(guò)血常規(guī)、血清生化指標(biāo)及組織切片觀察結(jié)果顯示W(wǎng)OLips對(duì)機(jī)體沒(méi)有明顯毒副作用,為將來(lái)的實(shí)際應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。綜上所述,本論文探索構(gòu)建的以RIV肽修飾介導(dǎo)的新型復(fù)合脂質(zhì)遞藥系統(tǒng)既改進(jìn)了普通脂質(zhì)體性質(zhì)不穩(wěn)定的缺點(diǎn),同時(shí)借助RIV肽與VEGFR2受體的相互作用,抑制了腫瘤新生血管的形成,增強(qiáng)了抗腫瘤效果,是一種靶向性安全低毒的藥物載體。并且,可以根據(jù)需要,通過(guò)額外增加載藥脂質(zhì)體,使逐步聯(lián)合治療理念進(jìn)一步實(shí)現(xiàn),體現(xiàn)了TWOLips對(duì)于許多癌癥,特別是需要多種藥物聯(lián)合治療的重大疾病的潛在應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：康普瑞汀 阿霉素 二氧化硅 D-多肽 VEGFR2 聯(lián)合治療
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R730.5
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 英文縮略語(yǔ)注釋10-12
• 文獻(xiàn)綜述12-22
• 1 免疫脂質(zhì)體12-13
• 2 基于硅材料的脂質(zhì)體的研究13-16
• 3 脂質(zhì)體在腫瘤聯(lián)合用藥策略中的應(yīng)用16-17
• 參考文獻(xiàn)17-22
• 引言22-24
• 第一章 RIV肽修飾復(fù)合脂質(zhì)體遞藥系統(tǒng)(RIV-TWOLips)的構(gòu)建及其靶向性評(píng)價(jià)24-40
• 第一節(jié) 功能脂質(zhì)膜材料的合成及表征25-27
• 1. 材料與儀器25
• 1.1 材料25
• 1.2 儀器25
• 2. 方法25-26
• 2.1 RIV-PEG_(3400)-DSPE的合成25
• 2.2 RIV-PEG_(3400)-DSPE的表征25-26
• 3. 結(jié)果與討論26-27
• 3.1 MALDI-TOF表征26
• 3.2 ~1H-NMR表征26-27
• 第二節(jié) RIV-TWOLips的構(gòu)建及表征27-32
• 1. 材料與儀器27
• 1.1 材料27
• 1.2 儀器27
• 2. 方法27-29
• 2.1 RIV-TWOLips的構(gòu)建27-28
• 2.2 RIV-TWOLips的表征28-29
• 3. 結(jié)果與討論29-32
• 3.1 粒徑及分布29-30
• 3.2 結(jié)構(gòu)表征30-32
• 第三節(jié) RIV-TWOLips的靶向性評(píng)價(jià)32-39
• 1. 材料與儀器32-33
• 1.1 材料32
• 1.2 儀器32-33
• 2. 方法33-35
• 2.1 RIV肽與VEGFR2親和性考察33
• 2.2 RIV肽體內(nèi)/體外靶向性評(píng)價(jià)33-34
• 2.3 RIV-TWOLips體內(nèi)/體外靶向性考察34-35
• 3. 結(jié)果35-39
• 3.1 分子水平的親和性評(píng)價(jià)35
• 3.2 定性分析RIV肽體內(nèi)外靶向性35-37
• 3.3 RIV-TWOLips體內(nèi)外靶向性評(píng)價(jià)37-39
• 本章小結(jié)39-40
• 第二章 共載藥系統(tǒng)(RIV-L[CD])的功能評(píng)價(jià)40-58
• 第一節(jié) RIV-L[CD]的構(gòu)建及表征41-47
• 1. 材料與儀器41
• 1.1 材料41
• 1.2 儀器41
• 2. 方法41-44
• 2.1 分析方法的建立41-42
• 2.2 RIV-L[CD]的構(gòu)建42-43
• 2.3 RIV-L[CD]的表征43-44
• 3. 結(jié)果與討論44-47
• 3.1 確立含量分析方法44-45
• 3.2 RIV-L[CD]的制劑學(xué)評(píng)價(jià)45-47
• 第二節(jié) RIV-L[CD]的體內(nèi)/體外藥效評(píng)價(jià)47-52
• 1. 材料與儀器47
• 1.1 材料47
• 1.2 儀器47
• 2. 方法47-48
• 2.1 體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)47-48
• 2.2 體內(nèi)抑瘤效果評(píng)價(jià)48
• 3. 結(jié)果與討論48-52
• 3.1 體外細(xì)胞毒性及抗增殖作用評(píng)價(jià)48-49
• 3.2 體內(nèi)抑制腫瘤生長(zhǎng)情況49-51
• 3.3 免疫組化評(píng)價(jià)51-52
• 第三節(jié) RIV-TWOLips安全性初步評(píng)價(jià)52-56
• 1. 材料與儀器52
• 1.1 材料52
• 1.2 儀器52
• 2. 方法52-53
• 2.1 溶血試驗(yàn)52-53
• 2.2 血液學(xué)及組織學(xué)考察53
• 3. 結(jié)果與討論53-56
• 3.1 溶血率測(cè)定53-54
• 3.2 系統(tǒng)毒性評(píng)價(jià)54-56
• 本章小結(jié)56-58
• 全文總結(jié)58-60
• 參考文獻(xiàn)60-64
• 致謝64-66
• 在校期間科研成果66

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

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本文編號(hào)：930501