本文關(guān)鍵詞：五甲川及酞菁熒光染料的研究

  更多相關(guān)文章： 五甲川菁染料 鋁酞菁 蛋白質(zhì) 線粒體 生物成像

【摘要】：伴隨著生命科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,為了滿足日新月異的生物檢測(cè)技術(shù)對(duì)熒光染料的要求,設(shè)計(jì)與合成具有良好光譜性能的熒光染料依然是熒光檢測(cè)技術(shù)發(fā)展的焦點(diǎn)。菁染料和酞菁染料作為目前最主要的近紅外熒光染料,由于能有效地避開生物樣品的自發(fā)熒光和自吸收所造成的背景干擾,近年來(lái)常被用作活體內(nèi)熒光標(biāo)記物或制成熒光探針,在生物檢測(cè)領(lǐng)域己經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。菁染料的主要問(wèn)題在于容易發(fā)生光漂白和自聚集導(dǎo)致熒光淬滅。而酞菁染料雖然具有優(yōu)秀的光穩(wěn)定性,但是由于大環(huán)體系,染料分子之間容易發(fā)生π-π堆積而使熒光淬滅。本論文在歸納總結(jié)前人科研成果的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)合成了兩例五甲川吲哚菁染料Cy5-NHS1和Cy5-NHS2。在五甲川菁染料的吲哚環(huán)N位引入體積較大的芐基,可有效提高染料的光穩(wěn)定性。菁染料中的活性基團(tuán)能與牛血清蛋白(BSA)中的胺基發(fā)生特異結(jié)合,標(biāo)記BSA時(shí)檢測(cè)限均達(dá)到10-8mol/L,具有較高的靈敏度。Cy5-NHS1和Cy5-NHS2均具有良好的細(xì)胞通透性,可對(duì)MCF-7細(xì)胞中的線粒體進(jìn)行染色,而且定位準(zhǔn)確。此外,設(shè)計(jì)合成了一例軸向取代鋁酞菁PcAIR,當(dāng)pH由7.4降低至4.0時(shí),熒光強(qiáng)度增加了57倍。PcAIR具有良好的細(xì)胞通透性,可以對(duì)MCF-7細(xì)胞進(jìn)行成像。由于癌細(xì)胞內(nèi)通常為弱酸性環(huán)境,而正常細(xì)胞內(nèi)的pH為中性,因此,PcAIR可以作為一種有潛力的腫瘤選擇性熒光探針。
【關(guān)鍵詞】：五甲川菁染料 鋁酞菁 蛋白質(zhì) 線粒體 生物成像
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R730.4;TQ613.5
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 1 緒論9-27
• 1.1 引言9-10
• 1.2 生物標(biāo)識(shí)熒光染料簡(jiǎn)介10-17
• 1.2.1 熒光產(chǎn)生的基本原理10-11
• 1.2.2 物質(zhì)熒光的影響因素11-12
• 1.2.3 熒光標(biāo)記方法分類12-13
• 1.2.4 熒光染料分類13-15
• 1.2.5 生物應(yīng)用近紅外熒光染料15-17
• 1.3 菁染料簡(jiǎn)介17-22
• 1.3.1 菁染料的結(jié)構(gòu)特征17-18
• 1.3.2 菁染料的合成方法18-19
• 1.3.3 菁染料的自聚19-20
• 1.3.4 菁染料的光穩(wěn)定性20-22
• 1.3.5 菁染料的水溶性22
• 1.4 酞菁染料簡(jiǎn)介22-23
• 1.5 近紅外菁染料的生物應(yīng)用進(jìn)展23-26
• 1.5.1 非共價(jià)鍵合熒光標(biāo)記24-25
• 1.5.2 共價(jià)標(biāo)記熒光標(biāo)記25-26
• 1.6 課題研究的意義26-27
• 2 五甲川菁染料的合成及生物應(yīng)用27-43
• 2.1 引言27
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分27-32
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑27-28
• 2.2.2 合成路線28
• 2.2.3 中間體1的合成28-29
• 2.2.4 中間體2的合成29
• 2.2.5 中間體3的合成29-30
• 2.2.6 中間體4的合成30
• 2.2.7 中間體5的合成30-31
• 2.2.8 Cy5-NHS2的合成31
• 2.2.9 Cy5-NHS1的合成31-32
• 2.3 Cy5-NHS的光譜測(cè)定32-35
• 2.3.1 染料母液的制備32
• 2.3.2 Cy5-NHS在不同溶劑當(dāng)中的吸收發(fā)射光譜32-33
• 2.3.3 Cy5-NHS在的溶解度測(cè)試33
• 2.3.4 Cy5-NHS的光穩(wěn)定性測(cè)試33-34
• 2.3.5 Cy5-NHS熒光量子產(chǎn)率的計(jì)算方法34
• 2.3.6 Cy5-NHS與Mito Tracker Green對(duì)MCF-7活細(xì)胞的復(fù)染34-35
• 2.4 結(jié)果與討論35-42
• 2.4.1 染料的合成35
• 2.4.2 Cy5-NHS染料的光譜性能35-37
• 2.4.3 Cy5-NHS染料的聚集37-38
• 2.4.4 Cy5-NHS染料的光穩(wěn)定性38
• 2.4.5 標(biāo)記條件的優(yōu)化38-39
• 2.4.6 Cy5-NHS與BSA作用的工作曲線39-40
• 2.4.7 BSA的最低檢測(cè)限測(cè)定40-41
• 2.4.8 Cy5-NHS的細(xì)胞成像效果41-42
• 2.5 本章小結(jié)42-43
• 3 軸向鋁酞菁的合成及生物應(yīng)用43-50
• 3.1 引言43
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分43-45
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑43
• 3.2.2 合成路線43-44
• 3.2.3 PcAlCl的合成44
• 3.2.4 PcAlR的合成44-45
• 3.3 PcAlR的光譜測(cè)定45-46
• 3.3.1 染料母液的制備45
• 3.3.2 PcAlR在不同溶劑當(dāng)中的發(fā)射光譜45
• 3.3.3 PcAlR染料的pH滴定45-46
• 3.3.4 PcAlR對(duì)MCF-7細(xì)胞的成像效果46
• 3.4 結(jié)果與討論46-49
• 3.4.1 染料的合成46
• 3.4.2 PcAlR的光譜性能46-48
• 3.4.3 PcAlR在MCF-7細(xì)胞中的成像48-49
• 3.5 本章小結(jié)49-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 致謝55-57
• 附錄 化合物結(jié)構(gòu)表征57-60

【共引文獻(xiàn)】

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