本文關鍵詞：去氫厄弗酚通過選擇性誘導腫瘤內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激和細胞凋亡抑制胃癌細胞生長

  更多相關文章： 胃癌 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激 去氫厄弗酚 凋亡 p38

【摘要】：目前在世界范圍內(nèi),胃癌導致的死亡人數(shù)已占據(jù)癌癥導致的死亡人數(shù)的第三位,最近幾十年內(nèi),盡管人們付出了大量的努力,使用諸多藥物來治療胃癌,但在臨床上仍然缺乏有效的針對胃癌的治療方法,胃癌患者的五年生存率仍然低于30%。當代社會,隨著人們生活節(jié)奏逐步加快,對于健康飲食的關注也越來越缺乏,最終使得病從口入的形勢越來越嚴峻,導致胃癌發(fā)生率逐步上升。因此,我們急需一種新型有效的抗胃癌藥物。對于中草藥抗胃癌作用,至今仍未見報道,那么是否存在一種能夠有效抑制胃癌的中藥單體呢?這需要我們?nèi)ブ鸩窖芯堪l(fā)掘。我們在對120種中草藥的篩選研究中發(fā)現(xiàn),有幾種單體在體外可以有效抵抗癌細胞生長。在本課題中,我們研究了一種抗胃癌中草藥——燈芯草,并從中發(fā)現(xiàn)并提取了活性單體成分去氫厄弗酚(dehydroeffusol,DHE),并獲得了國家專利。我們發(fā)現(xiàn)DHE這種小分子化合物能夠通過誘導腫瘤抑制性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激(ER stress)和觸發(fā)適度的細胞凋亡(Apoptosis)從而有效地抑制胃癌細胞的增殖和腫瘤的發(fā)生。機制研究表明,DHE通過上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子4(ATF4)表達促進內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激關鍵標志物DNA損傷誘導轉(zhuǎn)錄因子3(DDIT3)的過表達,進而選擇性的激活細胞內(nèi)腫瘤抑制性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應。同時,DHE也通過下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子ATF6的表達抑制了細胞生長及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激標志物葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白分子(GRP78)的表達。另外,DHE明顯激活了MEKK4-MKK3/6-p38-DDIT3這條信號通路,同時抑制了Erk通路。通過本項研究我們在國內(nèi)外首次發(fā)現(xiàn)中草藥單體去氫厄弗酚(DHE)能夠有效抑制胃癌生長,且毒副作用很小。同時揭示了其機制為DHE通過大幅度誘導腫瘤內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應和適度激活細胞凋亡抑制了腫瘤生長和腫瘤發(fā)生。因此,DHE可能成為潛在的抗腫瘤療法中的新策略。這為抗胃癌治療提供了新的手段,為中草藥在癌癥治療中的研發(fā)與應用開辟了道路。
【關鍵詞】：胃癌 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激 去氫厄弗酚 凋亡 p38
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 一、前言10-12
• 二、材料與方法12-28
• （一）材料與試劑12-14
• 1、細胞系及實驗動物12
• 2、藥物12
• 3、主要試劑12-13
• 4、主要抗體13
• 5、主要儀器13-14
• （二）方法14-28
• 1、主要試劑配制14-16
• 2、細胞培養(yǎng)與維持16-17
• 3、含DHE培養(yǎng)基配制17
• 4、細胞活力分析17
• 5、克隆形成分析17-18
• 6、細胞周期分析18
• 7、移植瘤實驗18-19
• 8、細胞凋亡分析19
• 9、細胞形態(tài)學電鏡分析19-20
• 10、蛋白免疫印跡分析20-21
• 11、線粒體膜電位分析21
• 12、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激水平分析21
• 13、半定量 PCR21-23
• 14、啟動子克隆及重組載體構建23-27
• 14.1 目的片段的引物設計23
• 14.2 引物合成后，以人全基因組為模板進行PCR擴增23-27
• 15、DDIT3基因啟動子熒光報告分析27
• 16、數(shù)據(jù)分析27-28
• 三、結果28-44
• 1、DHE有效地抑制了胃癌細胞生長及其致瘤性28-32
• 2、DHE通過介胃癌細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激促進胃癌細胞凋亡32-39
• 3、DHE選擇性地激活了MEKK4-MKK3-P38信號通路應激反應39-44
• 四、討論44-45
• 結論45-47
• 參考文獻47-50
• 綜述 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與線粒體應激介導的腫瘤細胞凋亡50-58
• 參考文獻55-58
• 攻讀學位期間本人出版或公開發(fā)表的論著、論文58-59
• 中英文縮寫詞表59-60
• 致謝60-62

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本文編號：915391