本文關(guān)鍵詞：白細(xì)胞介素23對(duì)胃癌發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移能力的影響及其分子機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 慢性萎縮性胃炎 胃癌 IL-23 PG1 PI3K/Akt 遷移

【摘要】：【目的】研究白細(xì)胞介素23(Interlukin-23,IL-23)對(duì)胃癌發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移能力的影響,探討其促進(jìn)胃癌轉(zhuǎn)移的潛在分子機(jī)制。【方法】(1)免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)慢性淺表性胃炎(對(duì)照組),慢性萎縮性胃炎伴腸化生和胃癌患者組織中IL-23的表達(dá);ELISA法檢測(cè)血清IL-23的水平,時(shí)間分辨免疫熒光分析法定量檢測(cè)血清胃蛋白酶原1(Pepsinogen 1,PG1)的水平;Pearson相關(guān)分析驗(yàn)證慢性萎縮性胃炎伴腸化生及胃癌患者血清中IL-23與PG1的相關(guān)性。(2)免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)未轉(zhuǎn)移胃癌組(未轉(zhuǎn)移組,n=9)和轉(zhuǎn)移胃癌組(轉(zhuǎn)移組,n=16)患者IL-23的表達(dá);ELISA法檢測(cè)這兩組胃癌患者血清IL-23、VEGF、MMP9的表達(dá)水平,健康體檢人群為對(duì)照組。(3)應(yīng)用胃癌SGC-7901、BGC-823細(xì)胞株進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn),均分為4組,即對(duì)照組、50 ng/m L IL-23處理組、LY294002處理組和LY294002+IL-23組。ELISA法檢測(cè)每株細(xì)胞不同處理后各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中MMP9和VEGF的表達(dá);劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)胃癌細(xì)胞遷移能力的變化;Western blot和熒光定量PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的表達(dá)。【結(jié)果】(1)無(wú)論在組織樣本或血清中,與對(duì)照組相比,慢性萎縮性胃炎伴腸化生組和胃癌組患者IL-23表達(dá)均明顯升高,且呈遞增趨勢(shì);而PG1濃度則在慢性萎縮性胃炎伴腸化生組和胃癌組患者血清中明顯降低。Pearson相關(guān)性分析顯示慢性萎縮性胃炎伴腸化生組和胃癌組患者中血清IL-23的表達(dá)水平與PG1呈負(fù)相關(guān)。(2)25例胃癌組織中,未轉(zhuǎn)移組胃癌組織IL-23的表達(dá)高于配對(duì)癌旁組織(P0.05),轉(zhuǎn)移組胃癌組織IL-23的表達(dá)亦高于配對(duì)癌旁組織(P0.05),且轉(zhuǎn)移組胃癌組織IL-23的表達(dá)明顯高于未轉(zhuǎn)移組(P0.05);胃癌患者血清IL-23、MMP9和VEGF表達(dá)均高于對(duì)照組(P0.05),轉(zhuǎn)移組胃癌患者血清IL-23、MMP9和VEGF表達(dá)均高于未轉(zhuǎn)移組(P0.05),且胃癌患者血清IL-23與MMP9、VEGF表達(dá)正相關(guān);綜合患者信息和免疫組化結(jié)果顯示,胃癌患者IL-23表達(dá)水平與病人年齡、性別無(wú)關(guān),與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)(P0.05)。(3)分別應(yīng)用IL-23、LY294002、LY294002+IL-23處理兩株胃癌SGC-7901、BGC-823細(xì)胞,與對(duì)照組相比,IL-23處理組均引起細(xì)胞VEGF、MMP9 m RNA水平和蛋白水平的上調(diào),E-cadherin m RNA水平和蛋白水平的下調(diào);劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示用IL-23處理后,兩株胃癌細(xì)胞株的細(xì)胞遷移能力均增強(qiáng)。如果應(yīng)用LY294002處理細(xì)胞株,IL-23不能引起兩株細(xì)胞中VEGF和MMP9 m RNA水平和蛋白水平的上調(diào)、E-cadherin m RNA水平和蛋白水平下調(diào)的效應(yīng),劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示兩株細(xì)胞遷移能力均減弱。【結(jié)論】(1)IL-23在慢性萎縮性胃炎伴腸化生和胃癌患者血清和組織中高表達(dá),且血清IL-23與PG1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。(2)IL-23在胃癌患者組織中高表達(dá),且與胃癌轉(zhuǎn)移相關(guān)。(3)胃癌患者血清VEGF、MMP9高表達(dá),且與IL-23呈正相關(guān)。(4)IL-23提高胃癌SGC-7901、BGC-823細(xì)胞VEGF、MMP9的m RNA水平和蛋白表達(dá)水平,降低E-cadherin m RNA水平和蛋白水平,增強(qiáng)了細(xì)胞的遷移能力。(5)IL-23可能通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)胃癌SGC-7901、BGC-823細(xì)胞的遷移能力。
【關(guān)鍵詞】：慢性萎縮性胃炎 胃癌 IL-23 PG1 PI3K/Akt 遷移
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-13
• 第一章 前言13-18
• 研究目的、內(nèi)容、方法、意義及實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)15-18
• 1．研究目的15
• 2．研究?jī)?nèi)容15-16
• 3．研究方法及技術(shù)16
• 4．研究意義16
• 5．實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)16-18
• 第二章 IL-23在胃部疾病中的表達(dá)和IL-23與PG1相關(guān)性及其臨床意義18-26
• 2.1 材料18-19
• 2.1.1 組織和血清18
• 2.1.2 主要試劑及配制18-19
• 2.1.3 主要儀器設(shè)備和耗材19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法19-21
• 2.2.1 免疫組化19-20
• 2.2.2 ELISA20-21
• 2.2.3 時(shí)間分辨熒光免疫分析21
• 2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析21
• 2.3 結(jié)果21-24
• 2.3.1 IL-23在各胃部疾病中的表達(dá)和分布特點(diǎn)22-23
• 2.3.2 在胃部疾病中 IL-23 和 PG1 表達(dá)的相關(guān)性及其臨床意義23-24
• 2.4 討論24-26
• 第三章 IL-23促進(jìn)胃癌轉(zhuǎn)移發(fā)生的相關(guān)分子機(jī)制探討26-55
• 3.1 材料26-31
• 3.1.1 組織和細(xì)胞26
• 3.1.2 主要試劑及配制26-28
• 3.1.3 常用溶液配制28-30
• 3.1.4 主要儀器設(shè)備30-31
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法31-41
• 3.2.1 胃癌細(xì)胞的培養(yǎng)31
• 3.2.2 細(xì)胞復(fù)蘇31-32
• 3.2.3 細(xì)胞傳代32
• 3.2.4 細(xì)胞凍存32-33
• 3.2.5 細(xì)胞計(jì)數(shù)33
• 3.2.6 免疫組化33-34
• 3.2.7 ELISA34-35
• 3.2.8 Western blot35-37
• 3.2.9 熒光定量PCR37-39
• 3.2.10 劃痕實(shí)驗(yàn)39-40
• 3.2.11 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)40
• 3.2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析40-41
• 3.3 結(jié)果41-53
• 3.3.1 IL-23在胃癌組織、血清中的表達(dá)41-43
• 3.3.2 IL-23對(duì)胃癌遷移能力的影響43-49
• 3.3.2.1 胃癌細(xì)胞 IL-23 的表達(dá)43-44
• 3.3.2.2 胃癌患者血清MMP9、VEGF的表達(dá)44-45
• 3.3.2.3 IL-23與MMP9、VEGF表達(dá)的相關(guān)性分析45-46
• 3.3.2.4 IL-23促進(jìn)胃癌遷移能力46-49
• 3.3.3 IL-23 可能通過(guò) PI3K/Akt 信號(hào)通路促進(jìn)胃癌細(xì)胞的遷移49-53
• 3.4 討論53-55
• 第四章 結(jié)論與展望55-56
• 4.1 主要結(jié)論55
• 4.2 展望55-56
• 參考文獻(xiàn)56-63
• 綜述63-72
• 參考文獻(xiàn)66-72
• 致謝72-73
• 攻讀碩士研究生期間發(fā)表的文章73

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3 石s，

本文編號(hào)：907133