本文關(guān)鍵詞：Glut-1基因在胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義

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【摘要】：背景與目的：人類惡性腫瘤中,腫瘤細(xì)胞糖酵解代謝作用的增強(qiáng)是一種普遍特征,腫瘤組織葡萄糖的利用和代謝的增加與葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白的表達(dá)上調(diào)有著密切關(guān)聯(lián),其中以轉(zhuǎn)運(yùn)能力較強(qiáng)的亞型葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1 (Glucose transporter 1, Glut-1)的作用最為關(guān)鍵。通過激活Glut-1基因而促進(jìn)其蛋白的合成增加,進(jìn)而介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞攝取更多的葡萄糖,以滿足腫瘤生長所需的能量,同時(shí)也為其浸潤、轉(zhuǎn)移提供相應(yīng)的條件。近年來研究表明,Glut-1蛋白在胃癌組織中的表達(dá)較正常組織具有差異性。因此,本研究旨在探討胃癌組織中Glut-1基因表達(dá)的特點(diǎn)以及與胃癌患者臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系。方法：收集2014年6月至2015年6月?lián)P州大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院(江蘇省蘇北人民醫(yī)院)施行手術(shù)切除的61例胃癌組織和相應(yīng)的正常組織標(biāo)本(距切緣5cm)作為實(shí)驗(yàn)組和對照組。所有患者術(shù)前均未接受放化療等其他治療,術(shù)后均經(jīng)病理證實(shí)。分別使用液氮及福爾馬林固定保存。在液氮低溫條件下研磨成粉超低溫保存。Trizol法提取所有標(biāo)本總RNA,應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄試劑盒將總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,應(yīng)用RT-PCR(Real-time Polymerase Chain Reaction)方法定量檢測Glut-1 mRNA的表達(dá)水平,以三磷酸甘油醛脫氫酶基因(hGAPDH)為內(nèi)參照。同時(shí)使用免疫組織化學(xué)染色法檢測Glut-1蛋白的表達(dá)水平,并將Glut-1 mRNA表達(dá)水平與胃癌患者的臨床病理特征進(jìn)行分析。結(jié)果：胃癌組織Glut-1 mRNA在高、中、低分化腺癌中的相對表達(dá)量分別為2.68±3.66、16.97±25.79、41.31+28.07,三組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)：兩兩比較,分化程度越差,Glut-1的相對表達(dá)量越高。胃癌組織Glut-1 mRNA在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)水平(21.39±28.28)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)水平(3.66±5.34),二者比較差異有顯著性(P0.05)。胃癌組織Glut-1 mRNA在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期腺癌中的相對表達(dá)量分別為2.03±3.35、4.09±6.15、11.89±16.57、40.29±40.44,四組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；Ⅲ-Ⅳ期組的表達(dá)水平明顯高于I-II期組的表達(dá)水平為,二者比較差異有顯著性(P0.05)。胃癌組織Glut-1 mRNA在印戒細(xì)胞癌組的表達(dá)水平(2.12±4.97)明顯低于非印戒細(xì)胞癌組的表達(dá)水平(13.47+22.61),二者比較差異有顯著性(P0.05)。胃癌組織Glut-1 mRNA的表達(dá)水平與腫瘤大小正相關(guān),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.529,P0.05)；與PLR負(fù)相關(guān)(r=-0.242),但差異無顯著性(P=0.06)。胃癌組織Glut-1蛋白陰性、陽性、強(qiáng)陽性表達(dá)率分別為18.3%、44.6%、37.1%。結(jié)論：Glut-1基因表達(dá)水平的表達(dá)與蛋白表達(dá)水平相吻合。Glut-1基因的高表達(dá)可能對胃癌發(fā)生、發(fā)展起著重要作用,可能與胃癌的侵襲性指標(biāo)相關(guān)；Glut-1可能作為胃癌患者預(yù)后的分析指標(biāo)。印戒細(xì)胞癌Glut-1基因的表達(dá)降低可能與其特殊細(xì)胞結(jié)構(gòu)相關(guān),有待進(jìn)一步深入研究。
【關(guān)鍵詞】：胃惡性腫瘤 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1 RT-PCR 免疫組織化學(xué) mRNA
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• 英文摘要4-8
• 符號(hào)說明8-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-17
• 1、實(shí)驗(yàn)材料11-12
• 1.1 研究對象11
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑11-12
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器12
• 2、實(shí)驗(yàn)方法12-16
• 2.1 引物設(shè)計(jì)與合成12-13
• 2.2 組織總RNA提取13
• 2.3 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)13-14
• 2.4 Real-time PCR反應(yīng)14-15
• 2.5 免疫組織化學(xué)SP法15-16
• 3、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法16-17
• 結(jié)果17-22
• 1、總RNA提取結(jié)果17
• 2、胃癌組織中Glut-1 mRNA的表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系17-20
• 3、胃癌組織中Glut-1 mRNA的表達(dá)與腫瘤大小、PLR的相互關(guān)系20-21
• 4、胃癌組織中Glut-1蛋白免疫組織化學(xué)結(jié)果21-22
• 討論22-26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻(xiàn)27-32
• 附錄32-47
• 致謝47-48
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄48-49

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1 周水洪;汪審清;吳求亮;范駿;;葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體基因Glut-1和Glut-3在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)[J];中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2006年08期

2 姜子斌;韋小民;姜春泉;張茉莉;張秀琴;;惡性胸液中GLUT-1和iNOS的表達(dá)及臨床意義[J];臨床肺科雜志;2013年08期

3 張培;劉志輝;王彬;李健;;一次性酒精對缺血-再灌注大鼠神經(jīng)功能及海馬區(qū)GLUT-1表達(dá)的影響[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2012年12期

4 鐘琳;熊英;姚裕家;;缺氧缺血大鼠腦組織GLUT-1表達(dá)及地塞米松對其表達(dá)的影響[J];四川醫(yī)學(xué);2007年02期

5 鮑春齡;李t，

本文編號(hào)：904005