本文關(guān)鍵詞：E-鈣粘蛋白在內(nèi)皮祖細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞之間的粘附作用及機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： E-鈣粘蛋白 血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞粘附 轉(zhuǎn)染

【摘要】：目的:探討E-鈣粘蛋白(E-cadherin,E-cad)在內(nèi)皮祖細(xì)胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)和間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)之間的粘附作用及機(jī)制。方法:1.體外C57BL/6J(WT)小鼠骨髓腔分離培養(yǎng)EPCs和MSCs。2.使用Mito Tracker Red標(biāo)記EPCs,DAPI標(biāo)記MSC。3.采用免疫熒光的方法觀察E-cad在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)情況。4.細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)觀察EPCs與MSCs體外粘附現(xiàn)象。5.使用E-cad Si-RNA干擾EPCs和MSCs中E-cad的表達(dá)。6.RT-PCR和Western-blot檢測(cè)Si-RNA轉(zhuǎn)染效率。7.轉(zhuǎn)染成功后在成血管的凝膠上進(jìn)一步檢測(cè)二者粘附現(xiàn)象。8.ELISA檢測(cè)E-cadherin的表達(dá)。9.RT-PCR和Western-blot檢測(cè)MSCs和EPCs相互作用后E-cad/β-catenin的m RNA和蛋白表達(dá)。10.MSCs和EPCs分別加入β-catenin特異性抑制劑XAV939后,在成血管的凝膠上進(jìn)一步檢測(cè)二者粘附現(xiàn)象。結(jié)果:1.體外共培養(yǎng)MSCs和EPCs,E-cad的表達(dá)顯著上調(diào)。2.E-cad Si-RNA成功轉(zhuǎn)染MSCs和EPCs,E-cad m RNA和E-cad蛋白的表達(dá)顯著下調(diào)。3.Si-RNA成功轉(zhuǎn)染MSCs和EPCs后,二者粘附現(xiàn)象明顯受到抑制。4.沉默EPCs和MSCs的E-cad后,二者在成血管凝膠上的粘附及成管現(xiàn)象均受到顯著抑制。5.MSCs和EPCs均能分泌E-鈣粘蛋白。6.EPCs分泌的E-cad通過(guò)上調(diào)MSCs的β-catenin來(lái)調(diào)節(jié)二者共粘附。7.β-catenin信號(hào)通路調(diào)控MSCs和EPCs的粘附。結(jié)論:E-cad通過(guò)β-catenin通路介導(dǎo)EPCs和MSCs之間的粘附。
【關(guān)鍵詞】：E-鈣粘蛋白 血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞粘附 轉(zhuǎn)染
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R730.2
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-9
• 縮略語(yǔ)表 (Abbreviations)9-12
• 前言12-14
• 第一部分：E-鈣粘蛋白介導(dǎo)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞之間的粘附作用研究14-34
• 1 實(shí)驗(yàn)材料14-16
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑和儀器14-16
• 2 實(shí)驗(yàn)方法16-26
• 2.1 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSCs)的分離、鑒定及標(biāo)記16-17
• 2.2 骨髓血管內(nèi)皮前體細(xì)胞(BM-EPCs)的分離培養(yǎng)、鑒定和標(biāo)記17-18
• 2.3 共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)18
• 2.4 粘附實(shí)驗(yàn)18-19
• 2.5 免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)E-cad的表達(dá)19
• 2.6 轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)19-20
• 2.7 實(shí)時(shí)定量PCR (RT-PCR)檢測(cè)20-22
• 2.8 Western-blot22-26
• 2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法26
• 3 結(jié)果26-33
• 3.1 DAPI成功標(biāo)記MSCs26
• 3.2 Mito Tracker Red成功標(biāo)記EPCs26-27
• 3.3 體外共培養(yǎng)EPCs和MSCs，E-cad的表達(dá)顯著上調(diào)27-28
• 3.4 SiRNA干擾EPCs和MSCs，E-cad m RNA和E-cad的表達(dá)顯著下調(diào)28-30
• 3.5 SiRNA干擾EPCs和MSCs后，二者粘附現(xiàn)象明顯受到抑制30-32
• 3.6 E-cad介導(dǎo)EPCs和MSCs的粘附32-33
• 4 討論33-34
• 第二部分：β-catenin介導(dǎo)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞之間的粘附機(jī)制研究34-46
• 1 實(shí)驗(yàn)材料34-35
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物34
• 1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑和儀器34-35
• 2 實(shí)驗(yàn)方法35-39
• 2.1 間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的標(biāo)記35
• 2.2 血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)的標(biāo)記35-36
• 2.3 共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)36
• 2.4 ELISA檢測(cè)E-cad的表達(dá)36
• 2.5 實(shí)時(shí)定量PCR (RT-PCR)檢測(cè)36-39
• 2.6 Western-blot39
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法39
• 3 結(jié)果39-43
• 3.1 MSCs和EPCs均能分泌E-cad39-40
• 3.2 EPCs分泌的E-cad通過(guò)上調(diào)MSCs的 β-catenin來(lái)調(diào)節(jié)二者共粘附40-42
• 3.3 β-catenin信號(hào)通路調(diào)控MSCs和EPCs的粘附42-43
• 4 討論43-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻(xiàn) (References)47-52
• 文獻(xiàn)綜述52-66
• 參考文獻(xiàn)(References)61-66
• 致謝66-67
• 作者簡(jiǎn)介67-69
• 導(dǎo)師評(píng)閱表69

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 本刊編輯部;;我國(guó)首家間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)在天津落成[J];中國(guó)藥業(yè);2006年07期

2 張?chǎng)?趙桂秋;;間充質(zhì)干細(xì)胞在眼科領(lǐng)域的研究與應(yīng)用[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年06期

3 史春夢(mèng);;間充質(zhì)干細(xì)胞表述中需要注意的幾個(gè)問(wèn)題[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年14期

4 瞿海龍;邊劍飛;張冰;王穎;周英蓮;;間充質(zhì)干細(xì)胞臨床應(yīng)用的前景與困惑[J];醫(yī)學(xué)研究與教育;2011年05期

5 郭子寬;;間充質(zhì)干細(xì)胞及其臨床應(yīng)用中的幾個(gè)問(wèn)題[J];中國(guó)組織工程研究;2012年01期

6 李炳堯;武曉云;吳巖;;間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與培養(yǎng):從實(shí)驗(yàn)室到臨床[J];中國(guó)組織工程研究;2013年14期

7 吳實(shí);鄧列華;;皮膚間充質(zhì)干細(xì)胞在促進(jìn)皮膚愈合中的作用[J];實(shí)用皮膚病學(xué)雜志;2013年03期

8 吳清法,王立生,吳祖澤;間充質(zhì)干細(xì)胞的來(lái)源及臨床應(yīng)用[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2002年03期

9 黃定強(qiáng);間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(耳鼻咽喉科學(xué)分冊(cè));2003年03期

10 付文玉,路艷蒙,喬?hào)|訪,樸英杰;運(yùn)用組織工程學(xué)原理構(gòu)建間充質(zhì)干細(xì)胞的三維培養(yǎng)體系[J];濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳可;王丁;韓之波;朱德林;韓忠朝;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外發(fā)揮免疫活性的研究[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

2 金明順;張毅;賈秀芬;周燕華;閆妍;劉慧雯;;小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)以及多潛能分化的研究[A];中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

3 李爭(zhēng)艷;劉楊;翟麗麗;楊迷玲;王立峰;;間充質(zhì)干細(xì)胞在腫瘤發(fā)展過(guò)程中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

4 張彥;李尚珠;;間充質(zhì)干細(xì)胞在血管工程中的機(jī)制及應(yīng)用[A];2009全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合周圍血管疾病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2009年

5 石玉;戴\戎;;周期性拉應(yīng)力對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞分化影響的研究[A];第九屆全國(guó)生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

6 黎嬌;朱爭(zhēng)艷;杜智;駱瑩;王鵬;高英堂;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分泌物對(duì)肝細(xì)胞增殖和凋亡的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第30次學(xué)術(shù)年會(huì)暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2010年

7 譚遠(yuǎn)超;Kevin;姜紅江;黃相杰;周紀(jì)平;;間充質(zhì)干細(xì)胞在骨傷疾病治療中的應(yīng)用[A];首屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合骨科微創(chuàng)學(xué)術(shù)交流會(huì)暨專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)論文匯編[C];2011年

8 唐佩弦;;間充質(zhì)干細(xì)胞及其臨床應(yīng)用前景[A];第三屆全國(guó)血液免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

9 戴育成;;間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性和應(yīng)用[A];2005年華東六省一市血液病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

10 胡琳莉;王昕榮;錢坤;李舟;楊薇;朱桂金;;小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞向子宮內(nèi)膜分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];第一屆中華醫(yī)學(xué)會(huì)生殖醫(yī)學(xué)分會(huì)、中國(guó)動(dòng)物學(xué)會(huì)生殖生物學(xué)分會(huì)聯(lián)合年會(huì)論文匯編[C];2007年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 滿學(xué)杰;天津?yàn)I海新區(qū)建最大間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];新華每日電訊;2008年

2 滿學(xué)杰;津昂賽打造間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

3 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院輸血科 李忠俊 整理 吳劉佳;間充質(zhì)干細(xì)胞研究又見新方法[N];健康報(bào);2013年

4 上海生科院 上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所 曹楷;間充質(zhì)干細(xì)胞：干細(xì)胞中的孫悟空[N];上�？萍紙�(bào);2014年

5 記者　陳建強(qiáng);首家間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)在津建成[N];光明日?qǐng)?bào);2006年

6 記者　馮國(guó)梧;細(xì)胞產(chǎn)品國(guó)家工程中心建設(shè)方案獲準(zhǔn)[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

7 實(shí)習(xí)生 劉霞;間充質(zhì)干細(xì)胞有望用于面部整形[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

8 本報(bào)記者 王新佳;我國(guó)“原始間充質(zhì)干細(xì)胞”注射液進(jìn)入臨床研究[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2005年

9 馮國(guó)梧;全球首個(gè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)規(guī)模化運(yùn)營(yíng)[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

10 劉瑩清;全球首個(gè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫(kù)泰達(dá)規(guī)模運(yùn)營(yíng)[N];北方經(jīng)濟(jì)時(shí)報(bào);2008年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王皓;五指山小型豬OCT-4、SOX-2基因在骨髓間充質(zhì)與臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞中的過(guò)表達(dá)研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

2 孔德曉;間充質(zhì)干細(xì)胞及胰島素分泌細(xì)胞治療糖尿病的臨床及應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];山東大學(xué);2015年

3 董苑;SDF-1復(fù)合PDPBB的構(gòu)建及對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞趨化影響的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王磊;誘導(dǎo)胎盤來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞向成牙骨質(zhì)細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

5 房賀;連接黏附分子A在促進(jìn)MSC修復(fù)CC14肝損傷中的作用及其機(jī)制[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 陳潔;間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)急性肺損傷小鼠的影響及相關(guān)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

7 許婷;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1在蟑螂過(guò)敏原誘導(dǎo)的哮喘中對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞募集遷移的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

8 周雅麗;攜氧間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)胃癌化療效果的影響及其機(jī)制研究[D];蘭州大學(xué);2015年

9 沈舒寧;CKIP-1負(fù)調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

10 姚惟琦;脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性腎損傷[D];武漢大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 顧立超;BTK抑制劑對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞miR-21的調(diào)節(jié)作用[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

2 王文杰;鴨胚間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及其移植修復(fù)肝損傷研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

3 張猛;血管內(nèi)皮前體細(xì)胞對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞分化潛能的影響[D];石河子大學(xué);2015年

4 馬麗媛;利用MyoD基因誘導(dǎo)綿羊臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成肌細(xì)胞的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

5 宋維文;MicroRNA-133誘導(dǎo)綿羊間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成肌細(xì)胞的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

6 韓麗鑫;人臍帶來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)耐維甲酸的早幼粒白血病細(xì)胞分化的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

7 陶利;綿羊臍帶和羊水間充質(zhì)干細(xì)胞的分禽培養(yǎng)及鑒定[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

8 陳以勝;亞低溫對(duì)顱腦創(chuàng)傷微環(huán)境下溫敏臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化特性影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 夏勇;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞抑制HepG2作用優(yōu)化方法探索[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

10 羅永慧;Pax6對(duì)大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分化誘導(dǎo)作用及其應(yīng)用研究[D];成都醫(yī)學(xué)院;2015年

，

本文編號(hào)：899290