本文關(guān)鍵詞：Scinderin在肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的功能和機(jī)制研究

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【摘要】：背景及目的原發(fā)性肝癌(以下簡(jiǎn)稱肝癌)是全球第六高發(fā)的惡性腫瘤,每年新發(fā)病例約100萬。肝癌的發(fā)生受多種腫瘤相關(guān)基因的調(diào)控,包括癌基因的激活及抑癌基因的失活,但確切機(jī)制仍不清楚。Scinderin(以下簡(jiǎn)稱SCIN)是一種Ca2+依賴的肌動(dòng)蛋白調(diào)節(jié)蛋白,具有調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白的聚合及解聚等功能,其異常表達(dá)可導(dǎo)致細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的破壞,促進(jìn)腫瘤的形成。SCIN與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展、生物學(xué)行為有較密切的關(guān)系。CyclinA1是一種細(xì)胞周期調(diào)控蛋白,在細(xì)胞的增殖、分裂過程中起著重要的作用,而STAT3的磷酸化激活被發(fā)現(xiàn)與腫瘤的關(guān)系相當(dāng)密切。本研究旨在解決下述問題：(1)檢測(cè)臨床肝癌樣本中SCIN的表達(dá)水平。(2)分析SCIN表達(dá)水平與肝癌患者臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系。(3)SCIN在肝癌細(xì)胞系中的生物功能。(4)SCIN作用于肝癌的分子機(jī)制。方法1.收集12例肝癌及配對(duì)癌旁正常組織,通過Real-time PCR、Western Blot在]mRNA和蛋白水平檢測(cè)SCIN的表達(dá)。另外收集60例肝癌組織,通過免疫組化的方法檢測(cè)SCIN在肝癌及癌旁組織中的表達(dá)情況；2.通過χ2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)分析SCIN與肝癌患者臨床病理特征之間的關(guān)系；3.通過Kaplan-Meier生存曲線分析SCIN與肝癌患者預(yù)后之間的關(guān)系(包括無瘤生存期(Disease-free Survival,DFS)和總體生存時(shí)間(Overall Survival,OS)),并進(jìn)行Log-rank檢驗(yàn)加以驗(yàn)證；4.通過COX比例模型分析SCIN是否為影響肝癌患者預(yù)后的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素；5.建立包含SCIN外顯子的PcDNA3.1-SCIN質(zhì)粒和表達(dá)SCIN siRNA的GV115質(zhì)粒；轉(zhuǎn)染質(zhì)粒到肝癌細(xì)胞系中,通過G418及流式分選篩選出穩(wěn)定高表達(dá)SCIN及低表達(dá)SCIN的細(xì)胞系；6.通過MTT實(shí)驗(yàn)、FACS檢測(cè)細(xì)胞周期等方法檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力；劃痕實(shí)驗(yàn)、Boyden Chamber實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力；7.通過胸腺缺陷裸鼠皮下荷瘤模型檢測(cè)細(xì)胞的體內(nèi)增殖能力；8.提取細(xì)胞的蛋白,利用Western Blot實(shí)驗(yàn)分析常見增殖、轉(zhuǎn)移信號(hào)通路蛋白的變化。結(jié)果1.SCIN在腫瘤組織中表達(dá)降低,且SCIN與臨床病理特征(直徑)之間存在著相關(guān)性；2.SCIN高表達(dá)患者無瘤生存期(DFS)及總體生存期(OS)均長于SCIN低表達(dá)患者,且SCIN可以作為評(píng)判患者預(yù)后的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素；3.上調(diào)SCIN可以顯著抑制細(xì)胞的增殖能力；4.SCIN通過下調(diào)CyclinA1蛋白的表達(dá)來抑制肝癌細(xì)胞的增殖能力；通過抑制STAT3的磷酸化來抑制肝癌細(xì)胞的增殖能力。結(jié)論肝癌組織中SCIN的表達(dá)顯著降低,且SCIN可以作為判斷肝癌病人術(shù)后無瘤生存期及總體生存期的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。肝癌細(xì)胞系中高表達(dá)SCIN可以抑制增殖能力,這可能與下調(diào)CyclinA1及p-STAT3的表達(dá)相關(guān)。這些結(jié)果預(yù)示著,SCIN可以作為一個(gè)新的潛在的治療靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：Scinderin 肝細(xì)胞癌 免疫組化 增殖
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 縮略詞表10-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-25
• 第一部分：SCIN在肝癌樣本中的表達(dá)及與患者臨床病理特征、預(yù)后的關(guān)系25-32
• (一)、結(jié)果25-30
• (二)、討論30-32
• 第二部分 SCIN對(duì)肝癌細(xì)胞增殖及遷移能力的影響32-39
• (一)、結(jié)果32-37
• (二)、討論37-39
• 第三部分 SCIN對(duì)CyclinAl、STAT3信號(hào)通路的影響39-43
• (一)、結(jié)果39-40
• (二)、討論40-43
• 全文小結(jié)43-44
• 參考文獻(xiàn)44-51
• 附錄51-53
• 綜述53-59
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況59-60
• 致謝60-61

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Wan-Yee Lau;Eric C. H. Lai;;Hepatocellular carcinoma: current management and recent advances[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2008年03期

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本文編號(hào)：892029