本文關(guān)鍵詞：奧曲肽對胃癌細(xì)胞組蛋白H3乙�；土姿峄男�(yīng)

  更多相關(guān)文章： 組蛋白H3 磷酸化 乙�；� Western blot 免疫細(xì)胞化學(xué) 胃癌細(xì)胞

【摘要】：研究背景組蛋白翻譯后修飾(post-translation modifications, PTMs)是信號通路的匯集點(diǎn),此節(jié)點(diǎn)事件是基因表達(dá)的關(guān)鍵。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)激酶可誘導(dǎo)間期細(xì)胞啟動子組蛋白H3特定殘基的直接磷酸化,導(dǎo)致這些基因迅速的轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)。p300是一個(gè)具有組蛋白乙�；D(zhuǎn)移酶(histone acetyltransferase, HAT)活性的轉(zhuǎn)錄輔因子,可在多個(gè)殘基乙�；�4個(gè)核心組蛋白以及70個(gè)其它蛋白。組蛋白磷酸化和乙�；耐瑫r(shí)誘導(dǎo)為特異性哺乳動物基因活化的關(guān)鍵。我們的前期研究顯示,生長抑素類似物奧曲肽(Octreotide, OCT)可下調(diào)胃癌細(xì)胞磷酸化Akt水平,升高p300-HAT活性,抑制胃癌細(xì)胞增殖。研究目的觀察OCT對胃癌細(xì)胞組蛋白H3磷酸化和乙�；男�(yīng),探討組蛋白H3的磷酸化和乙酰化是否參與OCT抑制胃癌細(xì)胞增殖的效應(yīng)。材料與方法1.實(shí)驗(yàn)分組 將胃癌細(xì)胞SGC7901隨機(jī)分為4組：實(shí)驗(yàn)組1-3加入終濃度為10nmol/L的OCT培養(yǎng)液,分別作用12h、24h和48h；對照組,加入無OCT培養(yǎng)液。收集4組細(xì)胞,分別提取核蛋白,用于Western blot。細(xì)胞接種于24孔板孔內(nèi)的蓋玻片,同上分組,用于免疫細(xì)胞化學(xué)。2.Western blot應(yīng)用Western blot檢測4組細(xì)胞磷酸化絲氨酸10組蛋白H3 (histone H3 with phosphorylated serine 10, pS10-H3)和乙�；嚢彼�14組蛋白H3 (histone H3 with acetylated lysine 14, acK14-H3)的蛋白水平,觀察OCT對胃癌細(xì)胞SGC7901 pS10-H3和acK14-H3蛋白水平的效應(yīng)。3.免疫細(xì)胞化學(xué) 應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)觀察4組細(xì)胞pS10-H3和acK14-H3的免疫反應(yīng)性(Immuno-reactivity, IR),并進(jìn)行半定量分析,檢測OCT對胃癌細(xì)胞SGC7901 pS10-H3和acK14-H3 IR的效應(yīng)。4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù),P0.05為差異有顯著性。結(jié)果：1.OCT對胃癌細(xì)胞pS10-H3蛋白水平的效應(yīng) 對照組、OCT處理12h、24h和48h組pS10-H3蛋白的相對水平分別為1.005±0.021、0.633±0.022、0.401±0.028和0.089±0.010。實(shí)驗(yàn)組與對照組比較具有顯著性差異(P0.01)。OCT可顯著降低胃癌細(xì)胞SGC7901 pS10-H3蛋白水平。2.OCT對胃癌細(xì)胞pS10-H3 IR的效應(yīng)pS10-H3 IR顯示為棕色顆粒,主要分布于細(xì)胞核周。對照組、OCT處理12h、24h和48h組pS10-H3弱陽性和陽性細(xì)胞IR的平均水平分別為0.25±0.07和1.29±0.16、0.23±0.04和1.08±0.12、0.23±0.07和0.54±0.16及0.26±0.05和0.12±0.02。4組細(xì)胞的總體IR平均水平分別為1.55±0.09、1.32±0.09、0.77±0.09和0.38±0.07。實(shí)驗(yàn)組陽性細(xì)胞平均pS10-H3 IR顯著低于對照組(P0.01)；然而,實(shí)驗(yàn)組弱陽性細(xì)胞平均pS10-H3 IR與對照組無顯著性差異(P0.05)。實(shí)驗(yàn)組與對照組pS10-H3 IR的總體平均水平比較具有顯著性差異(P0.01)。OCT可顯著降低胃癌細(xì)胞SGC7901 pS10-H3 IR。3.OCT對胃癌細(xì)胞acK14-H3蛋白水平的效應(yīng) 對照組、OCT處理12h、24h和48h組acK14-H3的相對水平分別為0.109±0.012、0.237±0.013、0.492±0.014和0.689±0.009。實(shí)驗(yàn)組與對照組比較具有顯著性差異(P0.01)。OCT可顯著升高胃癌細(xì)胞SGC7901 acK14-H3蛋白水平。4.OCT對胃癌細(xì)胞acK14-H3 IR的效應(yīng)acK14-H3 IR顯示為棕色顆粒,主要分布于細(xì)胞核周。對照組、OCT處理12h、24h和48h組acK14-H3弱陽性和陽性細(xì)胞IR的平均水平分別為0.06±0.01和0.05±0.02、0.18±0.04和0.35±0.08、0.30±0.04和0.48±0.03及0.32±0.06和1.06±0.07。4組細(xì)胞的總體IR平均水平分別為0.15±0.03、0.53±0.11、0.78±0.06和1.39±0.03。實(shí)驗(yàn)組弱陽性和陽性細(xì)胞平均acK14-H3 IR均顯著高于對照組(P0.01)；實(shí)驗(yàn)組與對照組acK14-H3 IR的總體水平比較具有顯著性差異(P(0.01)。OCT可顯著升高胃癌細(xì)胞SGC7901 acK14-H3 IR。結(jié)論OCT可顯著降低胃癌細(xì)胞SGC7901組蛋白H3絲氨酸10的磷酸化,顯著升高賴氨酸14的乙�；�。結(jié)果提示,組蛋白H3絲氨酸10的磷酸化和賴氨酸14的乙�；赡軈⑴c了OCT抑制胃癌細(xì)胞增殖的效應(yīng)。
【關(guān)鍵詞】：組蛋白H3 磷酸化 乙�；� Western blot 免疫細(xì)胞化學(xué) 胃癌細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-13
• 中英文縮略詞13-14
• 1 前言14-17
• 2 材料和方法17-26
• 2.1 材料17-20
• 2.1.1 細(xì)胞系及培養(yǎng)條件17
• 2.1.2 主要試劑和儀器設(shè)備17-20
• 2.2 主要實(shí)驗(yàn)方法20-26
• 2.2.1 Western Blot20-24
• 2.2.3 免疫細(xì)胞化學(xué)24-26
• 3 結(jié)果26-28
• 3.1 OCT對胃癌細(xì)胞組蛋白H3絲氨酸10磷酸化的效應(yīng)26-27
• 3.1.1 OCT對胃癌細(xì)胞pS10-H3 IR的效應(yīng)26
• 3.1.2 OCT對胃癌細(xì)胞pS10-H3蛋白水平的效應(yīng)26-27
• 3.2 OCT對胃癌細(xì)胞組蛋白H3賴氨酸14乙�；男�(yīng)27-28
• 3.2.1 OCT對胃癌細(xì)胞acK14-H3 IR的效應(yīng)27
• 3.2.2 OCT對胃癌細(xì)跑acK14-H3蛋白水平的效應(yīng)27-28
• 附圖28-32
• 討論32-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 綜述42-60
• 參考文獻(xiàn)55-60
• 致謝60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;Antiproliferative effect of octreotide on gastric cancer cells mediated by inhibition of Akt/PKB and telomerase[J];World Journal of Gastroenterology;2003年10期

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本文編號：891804