本文關(guān)鍵詞：生物鐘基因Per1對人口腔鱗癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響和調(diào)控機(jī)制

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【摘要】：目的研究生物鐘基因Per1對人口腔鱗癌SCC15細(xì)胞生長、增殖、凋亡、遷移和侵襲的影響及調(diào)控機(jī)制。方法應(yīng)用RNA干擾技術(shù)構(gòu)建3組靶向Per1基因的短發(fā)夾RNA慢病毒質(zhì)粒,感染人口腔鱗癌SCC15細(xì)胞;經(jīng)測序、實時熒光PCR及Western blot鑒定并篩選沉默效果最佳組為實驗組,對照組為不含Per1片段的scramble質(zhì)粒病毒,空白組為未做任何處理的SCC15細(xì)胞。利用CCK-8試劑盒和克隆形成實驗檢測癌細(xì)胞SCC15體外的生長能力,流式細(xì)胞儀檢測SCC15細(xì)胞的增殖和凋亡水平變化,Transwell細(xì)胞小室檢測SCC15細(xì)胞的遷移和侵襲能力,裸鼠體內(nèi)成瘤實驗檢測SCC15細(xì)胞體內(nèi)成瘤能力改變。實時熒光定量PCR檢測Ki-67、MDM2、c-Myc、P53、Bax、Bcl-2、MMP2、MMP9、TIMP-2和VEGF mRNA的表達(dá)。結(jié)果成功的構(gòu)建了3組靶向Per1基因的Per1-shRNA慢病毒質(zhì)粒,其中Per1-shRNA-I組沉默效果最佳,可作為實驗組。沉默Per1基因后促進(jìn)了SCC15癌細(xì)胞的生長和增殖能力,抑制了細(xì)胞凋亡水平,增強(qiáng)了SCC15細(xì)胞的遷移和侵襲能力,同時,促進(jìn)了裸鼠體內(nèi)SCC15細(xì)胞的成瘤能力(P均0.05)。Per1基因沉默后顯著提高了Ki-67、MDM2、Bcl-2、MMP2和MMP9 mRNA的表達(dá)(P均0.05),降低了c-Myc、p53、Bax和TIMP-2 mRNA的表達(dá)(P均0.05),而VEGF mRNA的表達(dá)無顯著改變(P0.05)。結(jié)論生物鐘基因Perl能調(diào)控下游重要的腫瘤相關(guān)基因,如Ki-67、MDM2、c-Myc、p53、Bax、Bcl-2、MMP2、MMP9和TIMP-2,其表達(dá)變化影響癌細(xì)胞的生長、增殖、凋亡、遷移和侵襲,對Per1基因的深入研究可以進(jìn)一步明確癌癥的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制,提供癌癥的治療的新方法。
【關(guān)鍵詞】：生物鐘基因 Per1 口腔 癌 鱗狀細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.8
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 第一部分 Per1-shRNA慢病毒質(zhì)粒的構(gòu)建和鑒定12-22
• 1 材料和方法12-18
• 2 結(jié)果18-21
• 3 討論21-22
• 第二部分 沉默Per1基因?qū)θ丝谇击[癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其機(jī)制22-34
• 1 材料和方法22-26
• 2 結(jié)果26-31
• 3 討論31-34
• 參考文獻(xiàn)34-39
• 全文總結(jié)39-40
• 文獻(xiàn)綜述40-51
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號：866428