本文關(guān)鍵詞：納米刀消融動(dòng)物肝臟的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的1、通過(guò)對(duì)小型豬肝臟實(shí)施納米刀消融,研究納米刀消融肝臟的安全性和有效性,評(píng)估納米刀消融應(yīng)用于臨床的可行性。2、通過(guò)影像學(xué)和病理學(xué)方法觀察納米刀消融區(qū)域的影像學(xué)和組織學(xué)變化,分析細(xì)胞凋亡特定的免疫組織學(xué)特點(diǎn),探討不可逆電穿孔(Irreversible electroporation, IRE)的消融機(jī)制。3、通過(guò)納米刀和氬氦刀消融肝臟的對(duì)照實(shí)驗(yàn),比較兩種消融方式的優(yōu)缺點(diǎn)及適用范圍,評(píng)估氬氦刀聯(lián)合納米刀消融的可行性。材料和方法1、選取10只健康的實(shí)驗(yàn)用小型豬行CT引導(dǎo)下肝臟納米刀消融術(shù)。將其隨機(jī)分為五組,每組2只。消融參數(shù)設(shè)定為：電極探針19G/1.06mm,針尖電極暴露距離2.5cm,兩探針距離1.5cm,采用直流電,電壓1500-2000V/cm,共10組90個(gè)脈沖,脈沖寬度70微秒,每組間隔3.5s。消融部位分別位于肝實(shí)質(zhì)和肝門(mén)部。五組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別于消融術(shù)后1天、3天、7天、14天及28天行CT增強(qiáng)掃描和磁共振(MR)增強(qiáng)掃描,而后處死取出肝臟,分別進(jìn)行HE染色、Von Kossa染色、vWF染色和TUNEL檢測(cè)。在TUNEL檢測(cè)中采用凋亡指數(shù)(Apoptotic index, AI)寸不同時(shí)期的消融區(qū)和非消融區(qū)進(jìn)行雙因素方差分析,采用統(tǒng)計(jì)圖分析AI的變化趨勢(shì)。2、選用4只實(shí)驗(yàn)用小型豬,隨機(jī)分為兩組。在CT引導(dǎo)下對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肝臟分別進(jìn)行納米刀消融和氬氦刀冷凍消融。納米刀消融參數(shù)同上；氬氦刀消融采用超細(xì)冷凍探針(17G/1.47mm)單針穿刺,氬氣冷凍6min,氦氣熱融2min,應(yīng)用2次凍-融循環(huán),術(shù)中間斷掃描監(jiān)測(cè)消融情況。術(shù)后對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行CT平掃及增強(qiáng)掃描,觀察不同消融區(qū)的特征及變化。第一組術(shù)后當(dāng)天處死,第二組術(shù)后30天處死。取出肝臟后,固定、染色、包埋、切片,并行病理學(xué)分析,比較兩種消融區(qū)的組織學(xué)差異。結(jié)果1、所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均存活,術(shù)后24小時(shí)日常活動(dòng)等一般情況均與術(shù)前無(wú)明顯差別。其中B組1只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死時(shí)發(fā)現(xiàn)少量腹水,呈淡黃色清亮液體；余均未出現(xiàn)明顯出血、感染、器官損傷等嚴(yán)重并發(fā)癥。本組實(shí)驗(yàn)共產(chǎn)生24個(gè)納米刀消融區(qū),其中16個(gè)位于肝實(shí)質(zhì)、8個(gè)位于肝門(mén)部。通過(guò)增強(qiáng)CT、MRI,納米刀消融術(shù)后顯示為無(wú)強(qiáng)化的低密度或低信號(hào)區(qū)；術(shù)后14天及28天消融邊界逐漸模糊,邊緣出現(xiàn)輕到中度強(qiáng)化。HE染色、Von Kossa染色和vWF染色顯示消融區(qū)細(xì)胞非熱效應(yīng)死亡,消融邊界清晰,膽管與血管形態(tài)完整；TUNEL檢測(cè)消融區(qū)內(nèi)死亡細(xì)胞染色呈陽(yáng)性。納米刀消融區(qū)和非消融區(qū)的凋亡指數(shù)有明顯差異(P值0.05),消融區(qū)AI隨時(shí)間變化而變化：納米刀消融術(shù)后AI開(kāi)始上升,術(shù)后3天達(dá)最高,約48.8士13.9%,此后逐漸下降,術(shù)后28天與非消融區(qū)正常細(xì)胞差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值0.05)。2、所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均順利完成納米刀及氬氦刀冷凍消融,均無(wú)嚴(yán)重并發(fā)癥。納米刀及氬氦刀對(duì)肝臟消融效果均良好。氬氦刀術(shù)后急性期肝細(xì)胞破壞完全,伴大量淤血,術(shù)后30天大量纖維組織增生。納米刀對(duì)消融區(qū)內(nèi)的血管、膽管等結(jié)構(gòu)無(wú)明顯損傷,消融區(qū)內(nèi)死亡細(xì)胞逐漸被正常細(xì)胞替代。結(jié)論1、納米刀消融小型豬肝臟是安全、有效的。CT及MRI能較好的顯示納米刀消融邊界,可用于術(shù)中監(jiān)測(cè)及術(shù)后隨訪評(píng)價(jià)；組織學(xué)顯示納米刀可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡,消融區(qū)細(xì)胞呈現(xiàn)非熱效應(yīng)死亡；術(shù)后28天消融區(qū)內(nèi)細(xì)胞逐漸再生和修復(fù)。2、氬氦刀冷凍對(duì)組織的消融無(wú)選擇性,納米刀可選擇性保護(hù)血管、膽管等重要結(jié)構(gòu),能夠用于治療肝門(mén)部、大血管旁等特殊部位的病灶。3、納米刀作為一種新興的、有效的微創(chuàng)消融方法,其優(yōu)勢(shì)是傳統(tǒng)物理消融方法所不具備的,有廣闊的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：納米刀 不可逆電穿孔 細(xì)胞凋亡 消融 肝臟
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R730.5
【目錄】：

• 縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-12
• 第一部分 納米刀消融肝臟安全性和有效性的實(shí)驗(yàn)研究12-21
• 1. 材料和方法12-14
• 2. 結(jié)果14-17
• 3. 討論17-19
• 4. 小結(jié)19-21
• 第二部分 納米刀和氬氦刀消融肝臟的對(duì)比實(shí)驗(yàn)研究21-26
• 1. 材料和方法21-22
• 2. 結(jié)果22-23
• 3. 討論23-25
• 4. 小結(jié)25-26
• 附圖26-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 文獻(xiàn)綜述39-47
• 參考文獻(xiàn)44-47
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況47-48
• 致謝48

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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本文編號(hào)：864803