NCI-H446型SCLC細胞雞胚尿囊膜成瘤實驗及其與MMP-9的關系研究
本文關鍵詞:NCI-H446型SCLC細胞雞胚尿囊膜成瘤實驗及其與MMP-9的關系研究
更多相關文章: SCLC細胞 MMP-9 雞胚絨毛尿囊膜 腫瘤轉移
【摘要】:目的:通過將NCI-H446型小細胞肺癌(Small Cell Lung Cancer, SCLC)細胞接種至雞胚絨毛尿囊膜,觀察成瘤過程中雞胚中MMP-9含量變化及動態(tài)觀察腫瘤組織及瘤旁的血管形成情況。方法:①.NCI-H446型SCLC細胞原代培養(yǎng)24h后換液,去除雜質及死細胞后,其余細胞貼壁良好且形態(tài)正常。對此細胞進行傳代培養(yǎng),收集對數(shù)期細胞備用。②.雞胚尿囊膜SCLC細胞成瘤模型的建立。③.利用形態(tài)學方法動態(tài)觀察成瘤過程及瘤旁血管形成情況。④.收集各個不同時間點雞胚血清,通過酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測不同時間點雞胚模型血清中MMP-9的含量。結果:①. NCI-H446型SCLC傳代培養(yǎng)成功且隨著種植細胞濃度的增加可以成瘤。②.成功地建立了NCI-H446型SCLC細胞雞胚絨毛尿囊膜成瘤模型。③.與對照組相比,NCI-H446型SCLC細胞具有促進MMP-9生成的作用。④.MMP-9的含量與SCLC細胞計數(shù)成正相關。5.MMP-9的含量與腫瘤周圍的血管數(shù)目成正相關。結論:①.SCLC細胞雞胚絨毛尿囊膜成瘤模型易于操作、便于控制、易于實現(xiàn),是研究腫瘤細胞種植成瘤的較好的動物模型。該模型試驗周期短,便于動態(tài)觀察腫瘤的生長及腫瘤血管的生成,對SCLC細胞的侵襲轉移研究有重要意義。②.隨著種植SCLC細胞密度的增加,雞胚絨毛尿囊膜上逐漸穩(wěn)定成瘤。當種植濃度達到4×106mL-1時,第三天,可導致雞胚血清中MMP-9的含量明顯升高,第七天達到最高值,說明SCLC細胞能通過產(chǎn)生MMP-9導致細胞的遠處轉移。對MMP-9的抑制,是未來化療藥物研究的一個重要方向。③.MMP-9的含量與腫瘤周圍毛細血管的密度有密切關系。說明,MMP-9可能通過對血管生成的促進作用來輔助腫瘤細胞的遠處轉移,這種作用的具體機制有待進一步研究。
【關鍵詞】:SCLC細胞 MMP-9 雞胚絨毛尿囊膜 腫瘤轉移
【學位授予單位】:揚州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R734.2
【目錄】:
- 中文摘要2-3
- 英文摘要3-7
- 符號說明7-8
- 前言8-11
- 材料與方法11-17
- 實驗設備12-13
- 實驗方法13-14
- 2.1 NCI-H446型SCLC細胞的培養(yǎng)13
- 2.2 細胞的消化、傳代13
- 2.3 細胞計數(shù)13-14
- 2.4 細胞的凍存14
- 2.5 細胞的復蘇14
- 3 雞胚絨毛尿囊膜成瘤模型的建立14-16
- 3.1. 種蛋的選取及孵化14-15
- 3.2. 雞胚絨毛尿囊膜模型的制作15-16
- 4.雞胚血清中MMP-9的檢測16-17
- 5.統(tǒng)計學處理17
- 結果17-18
- 討論18-20
- 經(jīng)驗與反思20-21
- 參考文獻21-24
- 附表24-32
- 綜述32-41
- 參考文獻38-41
- 致謝41-42
- 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄42-43
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,本文編號:864510
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