本文關(guān)鍵詞：胃癌組織中Kiss-1 mRNA與Notch1 mRNA的表達(dá)研究及臨床意義

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【摘要】：目的:胃癌是人類消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一,在世界范圍內(nèi)其發(fā)病呈上升趨勢。GLOBALCAN最新數(shù)據(jù)顯示,2012年全球新發(fā)胃癌病例95.1萬,發(fā)病率占全球惡性腫瘤第五位,死亡率為第三位,其中男女發(fā)病率之比為2-3:1。胃癌的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確,目前公認(rèn)是由多基因多因素參與、環(huán)境和遺傳因素共同作用導(dǎo)致,而癌轉(zhuǎn)移是造成其預(yù)后差的重要原因。Kiss-1基因最早在黑色素瘤細(xì)胞株中被發(fā)現(xiàn),定位于染色體1q32-q41,編碼1個親水性蛋白、包含4個外顯因子,其中親水蛋白由145個氨基酸組成。研究證實,Kiss-1基因是多種惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移抑制基因,腫瘤的轉(zhuǎn)移及預(yù)后與Kiss-1基因的表達(dá)下調(diào)關(guān)系密切。Notch基因的發(fā)現(xiàn)最早是在果蠅體內(nèi),其被首次克隆成功在1980年。目前,在哺乳動物中共發(fā)現(xiàn)4種Notch受體(Notchl、Notch2、Notch3和Notch4)。研究表明,Notchl與多種腫瘤有密切關(guān)系,在腫瘤的進(jìn)展及轉(zhuǎn)移中起重要的作用。目前,尚未闡明兩個基因在胃癌發(fā)病過程中的作用。本文應(yīng)用RT-q PCR(real-time quantitative reverse transcription-PCR,RT-q PCR)方法檢測胃癌組織及癌旁正常組織中Kiss-1 m RNA和Notchl m RNA表達(dá)情況,并經(jīng)過分析其與臨床病理特征(分化程度、轉(zhuǎn)移、分期、預(yù)后等)之間的關(guān)系,探討其在胃癌發(fā)生發(fā)展過程中所起到的作用,為胃癌診治提供新的思路。方法:1 2013年10月~2014年10月期間,河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院經(jīng)病理證實胃癌住院手術(shù)患者34例,其中男性22例,女性12例,年齡49-83歲(平均年齡66.06±9.18歲),采集標(biāo)本前所有的患者均沒有進(jìn)行放療、化療,以及免疫治療。收集患者性別、年齡、TNM分期、腫瘤位置、組織學(xué)類型、淋巴結(jié)狀態(tài)、浸潤深度、分化程度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等臨床病理資料,登記建表并簽署知情同意書。分組情況:胃癌組34例標(biāo)本均取自手術(shù)切除的胃癌組織;正常對照組34例標(biāo)本均取自距腫瘤邊緣5cm及以上的正常胃黏膜組織。34例標(biāo)本均在病理組織學(xué)診斷證實后最終選取。2 Trizo L法提取34例胃癌組織及34例癌旁正常組織中的總RNA。根據(jù)美國Gene Copoeia公司提供的反轉(zhuǎn)錄試劑盒操作說明書進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。RT-q PCR檢測癌組織及癌周邊正常組織中的Kiss-1 m RNA、Notch1 m RNA的表達(dá),引物購自美國Gene Copoeia公司,按說明書操作。反應(yīng)條件:95℃預(yù)變性10 min,然后按95℃15s,60℃30s,72℃10s,進(jìn)行40個循環(huán),重復(fù)3次取平均值。本研究靶基因的表達(dá)量采用2-△CT表示,其中ΔCT為CT靶基因與CTGAPDH的差值。3統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,數(shù)據(jù)以中位數(shù)(四分位數(shù)間距)表示,兩組間配對樣本采用Wilcoxon秩和檢驗,兩組間獨立樣本采用Mann-Whitney U檢驗,均以P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1 Kiss-1 m RNA在胃癌組中的表達(dá)較正常對照組顯著降低,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2 Kiss-1 m RNA在胃癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、TNM分期III-IV期組中的表達(dá)顯著低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及TNM分期I-II期組,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3 Notch1 m RNA在胃癌組中的表達(dá)較正常組顯著升高,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4 Notch1 m RNA在胃癌有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及TNM分期III-IV期組中的表達(dá)顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及I-II期組,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5 Notch1 m RNA在胃癌低分化組的表達(dá)顯著高于高分化組,組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6 Kiss-1 m RNA與Notch1 m RNA的表達(dá)均與患者性別、年齡、病理類型等無明顯相關(guān)性,組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1 Kiss-1 m RNA在胃癌組織中的表達(dá)較癌旁正常組織顯著下調(diào),提示其在胃癌發(fā)病過程中可能發(fā)揮抑癌作用。2 Kiss-1 m RNA的表達(dá)與胃癌分期及轉(zhuǎn)移密切相關(guān),提示其可能通過抑制胃癌的轉(zhuǎn)移來影響預(yù)后。3 Notch1 m RNA在胃癌組織中的表達(dá)較癌旁正常組織顯著上調(diào),提示其在胃癌發(fā)病過程中可能發(fā)揮促癌作用。4 Notch1 m RNA的表達(dá)與胃癌的分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及其分化程度密切相關(guān),進(jìn)一步提示Notch1 m RNA的高表達(dá)促進(jìn)了胃癌進(jìn)展,有潛力成為胃癌早期診斷的新型腫瘤標(biāo)記物用于胃癌的早期診斷。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 Kiss-1 mRNA Notch1 mRNA RT-qPCR 轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12-13
• 材料與方法13-17
• 結(jié)果17-20
• 附圖20-22
• 附表22-24
• 討論24-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 綜述 Kiss-1 與Notch1 在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展31-42
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 致謝42-43
• 個人簡歷43

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：858196