發(fā)布時間：2017-09-14 21:27

  本文關(guān)鍵詞：miR-200c下調(diào)DCLK1抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞遷移與侵襲的研究

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【摘要】：目的:研究mi R-200c對胃癌SGC-7901細(xì)胞遷移侵襲能力的影響及其分子機(jī)制。方法:利用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)將LV-hsa-miR-200c慢病毒(miR-200c組)、病毒空載體分別轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞株。以病毒空載體轉(zhuǎn)染組作為陰性對照組,以未轉(zhuǎn)染組作為空白對照組。轉(zhuǎn)染72小時后在熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測上調(diào)miR-200c水平對SGC-7901細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。RT-PCR和Western Blot方法檢測mi R-200c可能靶基因DCLK1 mRNA及蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:轉(zhuǎn)染72小時后在熒光顯微鏡下觀察計(jì)數(shù),mi R-200c組及病毒空載體組轉(zhuǎn)染人胃癌細(xì)胞SGC-7901綠色熒光可達(dá)90%以上。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)顯示,miR-200c組分別在8h、24h后劃痕距離較空白對照組、陰性對照組增寬(P0.05);空白對照組與陰性對照組相比,兩者無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示miR-200c組穿膜細(xì)胞數(shù)較空白對照組、陰性對照組減少(P0.05);空白對照組與陰性對照組相比,兩者無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。這表明miR-200c過表達(dá)后SGC-7901細(xì)胞遷移和侵襲能力受到明顯抑制。生物信息學(xué)軟件預(yù)測顯示DCLK1可能為mi R-200c其中的靶基因之一。RT-PCR和Western Blot結(jié)果顯示:在mi R-200c上調(diào)的胃癌SGC-7901細(xì)胞內(nèi),DCLK1 mRNA和蛋白表達(dá)顯著降低(P0.05);空白對照組與陰性對照組相比,兩者無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:miR-200c上調(diào)能抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞遷移與侵襲,可能與下調(diào)DCLK1有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 miR-200c DCLK1 遷移 侵襲
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 中、英文詞對照表8-10
• 第1章 前言10-14
• 第2章 材料與方法14-26
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-32
• 第4章 討論32-36
• 第5章 結(jié)論36-38
• 參考文獻(xiàn)38-44
• 綜述： miR-200c 在腫瘤中的研究進(jìn)展44-52
• 參考文獻(xiàn)48-52
• 致謝52

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：852439