本文關(guān)鍵詞：生物鐘基因NPAS2對腸癌細胞株DLD-1生物學(xué)行為影響的基礎(chǔ)與臨床研究

  更多相關(guān)文章： 生物鐘基因 NPAS2 結(jié)直腸癌

【摘要】：目的本研究試圖闡述人體生物鐘基因家族的NPAS2基因在結(jié)腸癌細胞株DLD-1中的作用以及在腸癌中相關(guān)臨床病理因素分析研究,討論生物鐘基因與腸癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。通過體外實驗,在腸癌細胞株中分析研究NPAS2的表達異常對腸癌細胞的生長增殖、細胞周期、細胞凋亡及侵襲遷移的影響。為治療腸癌基因及周期性治療提供依據(jù)。方法采用定量PCR方法檢測108例腸癌患者的癌灶及癌旁組織中NPAS2表達量,分析其高/低表達與腫瘤臨床病理因素的相關(guān)性。使用RNA干擾技術(shù),敲除腸癌細胞株DLD-1中NPAS2基因表達,建立瞬時轉(zhuǎn)染NPAS2-siRNA的DLD-1細胞株,用qRT-PCR法對NPAS2基因敲除進行鑒定。NPAS2基因沉默表達后:用CCK-8及免疫組化方法檢測細胞生長、增殖的變化;用流式細胞術(shù)檢測細胞周期變化情況;用TUNEL方法檢測細胞凋亡的變化;使用細胞劃痕技術(shù)觀察細胞遷移能力變化,用Transwell方法檢測細胞侵襲情況。結(jié)果108例腸癌患者中,腫瘤癌灶組織NPAS2的mRNA表達量比相應(yīng)的癌旁組織減低(p0.05);臨床病理因素分析表明NPAS2的表達缺失與腫瘤的大小、TNM分期及遠處轉(zhuǎn)移相關(guān)(p0.05),而與患者年齡、性別、腫瘤位置、腫瘤分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腹膜轉(zhuǎn)移無關(guān)(p0.05)。在腸癌細胞株DLD-1中,分別瞬時轉(zhuǎn)染干擾RNA:SiRNA-1#、SiRNA-2#,對照RNA:SiRNA-Con,成功獲得實驗組NPAS2低表達DLD-1/SiRNA-1#組、DLD-1/SiRNA-2#組及對照組DLD-1/SiRNA-Con,實驗組的NPAS2表達量分別被顯著下調(diào)(p0.05)。NPAS2表達沉默后,實驗組細胞生長速度明顯比對照組增快(p0.05),同時實驗組細胞相對于對照組細胞多處于G2/M分裂期(p0.05),但是NPAS2的表達缺失對兩組的細胞凋亡無明顯影響(p0.05)。細胞劃痕實驗證實NPAS2表達沉默后,實驗組細胞遷移能力較對照組增強(p0.05);Transwell實驗同時表明實驗組細胞侵襲能力較對照組增強(p0.05)。結(jié)論108例組織標(biāo)本中,生物鐘基因NPAS2在腸癌患者腫瘤組織中表達下調(diào),其表達下調(diào)與腫瘤的大小、TNM分期及腫瘤遠處轉(zhuǎn)移相關(guān)。細胞實驗表明NPAS2的表達缺失可使腸癌細胞處于S期及G2/M分裂期,減少G0/G1停滯,促進細胞生長。同時,NPAS2的表達沉默增強腸癌細胞的遷移及侵襲能力。但生物鐘基因NPAS2的紊亂表達與腫瘤細胞的凋亡之間未見明顯相關(guān)。通過臨床及基礎(chǔ)相關(guān)研究,我們證實生物鐘基因NPAS2可能作為抑癌因子,參與了腸癌的發(fā)生發(fā)展。其可能作為腸癌的新的腫瘤治療靶點及評估腸癌預(yù)后的標(biāo)志物。
【關(guān)鍵詞】：生物鐘基因 NPAS2 結(jié)直腸癌
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.3
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言9-11
• 材料與方法11-18
• 結(jié)果18-27
• 討論27-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻32-36
• 綜述生物鐘基因 NPAS2 與實體腫瘤的研究進展36-45
• 參考文獻41-45
• 縮略詞表45-46
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論著、論文46-48
• 致謝48-49

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王佩瑤;;生物鐘 生命的“發(fā)條”[J];新晉商;2012年09期

2 張繼峰;美國科學(xué)家克隆出小鼠生物鐘基因[J];生理科學(xué)進展;1998年01期

3 項安波;;揭開神奇的生物鐘之謎[J];健康管理;2010年08期

4 王雅平;華魯純;張延齡;;生物鐘基因與腫瘤[J];國際外科學(xué)雜志;2006年04期

5 項安波;;您總是打瞌睡?可能是生物鐘在作怪[J];健康管理;2010年10期

6 劉宏偉;;隱藏在眼睛里的生物鐘[J];保健醫(yī)苑;2013年02期

7 ;生物鐘[J];科技經(jīng)濟市場;2002年02期

8 熊娟;李光明;;生物鐘基因與腫瘤時辰治療的研究進展[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2013年11期

9 牛占鋒;夏鶴春;;生物鐘基因及其在膠質(zhì)瘤治療中的前景[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2008年01期

10 李瑞文;成姝婷;王正榮;;生物鐘基因與哺乳動物生殖[J];生物學(xué)雜志;2013年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐祖元;;血紅素對小鼠外周生物鐘基因表達節(jié)律的影響[A];湖北省遺傳學(xué)會第七次代表大會暨學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2004年

2 張永虹;余萬霰;;積極開展生物鐘基因?qū)Π┘毎{(diào)控的研究[A];2004全國時間生物醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

3 王正榮;;生物鐘基因與疾病的關(guān)系[A];2009全國時間生物醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2009年

4 夏洪平;;生物鐘基因與腫瘤時辰治療[A];2006全國時間生物醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

5 施定基;賈曉會;王曉燕;徐林;冉凌飛;王軍成;殷文博;;藍藻生物鐘分子生物學(xué)的研究[A];泛環(huán)渤海地區(qū)九省市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會——2011年學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2011年

6 汪啟明;游玲;黃愛國;謝鳳欣;饒力群;;受熱脅迫調(diào)控的植物生物鐘元件的篩選與生物信息學(xué)分析[A];2013全國植物生物學(xué)大會論文集[C];2013年

7 施定基;冉凌飛;王軍成;賈曉會;CJohnson;鄧元告;;聚球藻7942生物鐘基因KaiA的克隆與敲除載體的構(gòu)建[A];慶祝中國藻類學(xué)會成立30周年暨第十五次學(xué)術(shù)討論會摘要集[C];2009年

8 賈曉會;徐林;施定基;王曉燕;殷文博;鄧元告;徐仰倉;;生物鐘基因kaiB的正反義表達與聚球藻的形態(tài)、生長與含油率[A];中國藻類學(xué)會第八次會員代表大會暨第十六次學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2011年

9 施定基;王軍成;冉凌飛;賈曉會;CJohnson;徐仲;;聚球藻7942生物鐘基因KaiB的克隆與敲除載體的構(gòu)建[A];慶祝中國藻類學(xué)會成立30周年暨第十五次學(xué)術(shù)討論會摘要集[C];2009年

10 賈曉會;施定基;冉凌飛;王軍成;C.Johnson;杜桂森;;聚球藻7942中生物鐘基因kaiC的克隆和敲除[A];慶祝中國藻類學(xué)會成立30周年暨第十五次學(xué)術(shù)討論會摘要集[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬友英;特定基因令生物鐘“我行我素”[N];大眾科技報;2001年

2 ;生物鐘基因孵子時期就工作[N];新華每日電訊;2000年

3 夏文燕 姚臻;我國生物鐘研究領(lǐng)域首個973項目落戶蘇大[N];江蘇科技報;2012年

4 ;我國學(xué)者發(fā)現(xiàn)生物鐘調(diào)節(jié)新機制[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2007年

5 錢錚;嬰兒護理室長明燈,可能擾亂孩子生物鐘[N];新華每日電訊;2006年

6 小華;基因改造讓蒼蠅生物期延長[N];中國醫(yī)藥報;2007年

7 張涌濱;長明燈可能擾亂新生兒生物鐘[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2008年

8 記者 張可喜;果蠅也有生物鐘[N];新華每日電訊;2001年

9 日紋;生物鐘基因能調(diào)節(jié)細胞分裂[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

10 胡月;健康調(diào)節(jié)“頻率” 為生命締造福音[N];科技日報;2013年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 李成偉;小鼠肝臟內(nèi)生物鐘發(fā)育表達及其調(diào)控機制研究[D];武漢大學(xué);2014年

2 季耀庭;哺乳動物生物鐘相關(guān)基因的發(fā)育表達及調(diào)控機制的研究[D];武漢大學(xué);2010年

3 杜玉珍;大鼠外周血淋巴細胞生物鐘基因的晝夜表達及鐘控基因的篩選鑒定[D];蘇州大學(xué);2005年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林長潑;斑塊來源血管平滑肌細胞中生物鐘基因、凋亡及纖溶系統(tǒng)基因表達改變的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 時玉增;哺乳動物生物鐘的光適應(yīng)性模型[D];蘇州大學(xué);2015年

3 雷雅琪;水稻生物鐘相關(guān)基因的功能預(yù)測分析及CSA節(jié)律性表達機理初步探討[D];寧夏大學(xué);2015年

4 韓野;生物鐘基因NPAS2對腸癌細胞株DLD-1生物學(xué)行為影響的基礎(chǔ)與臨床研究[D];蘇州大學(xué);2015年

5 黃潔;高脂對小鼠心肌細胞生物鐘基因表達的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

6 羅志勇;銅綠微囊藻生物鐘蛋白的節(jié)律檢測及其相互作用蛋白的篩選[D];廈門大學(xué);2007年

7 高鵬飛;大豆生物鐘基因GmLCL1/2和GmTOC1的克隆及其功能分析[D];青島農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

8 趙月華;生物鐘基因Bmal1、Per2在兒童急性淋巴細胞白血病的表達及意義[D];鄭州大學(xué);2014年

9 陶偉偉;染色質(zhì)重塑復(fù)合物亞基BAF60a整合肝臟生物鐘與能量代謝的分子機制研究[D];南京師范大學(xué);2011年

10 王文棟;家蠶TIME-EA4進化及晝夜節(jié)律生物鐘基因的克隆、進化和反饋環(huán)路研究[D];蘇州大學(xué);2011年

，

本文編號：852299