發(fā)布時間：2017-09-14 15:23

  本文關(guān)鍵詞：hTERT調(diào)控Gli1的表達(dá)對胃癌侵襲遷移的影響及其分子機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： Hedgehog通路 Gli1 人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶 胃癌 轉(zhuǎn)移

【摘要】：研究背景胃癌是全世界范圍內(nèi)惡性腫瘤導(dǎo)致死亡的原因之一。2012年Global Cancer Statistic的最新統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,胃癌每年的預(yù)計(jì)的新發(fā)病例男性約為631300例,女性約為320300例,而胃癌每年預(yù)計(jì)的死亡病例男性約為469000例,女性約為254100例[1,2]。盡管現(xiàn)代的診療技術(shù)對胃癌的診斷,治療和預(yù)后有一定的提高,但由于胃癌的轉(zhuǎn)移發(fā)生率較高,因此胃癌的預(yù)后仍然很差,5年生存率在所有癌癥中仍然較低[3]。進(jìn)化保守的Hedgehog信號通路在早期胚胎的發(fā)育,成年組織穩(wěn)態(tài)的維持以及損損傷修復(fù)中都發(fā)揮著十分關(guān)鍵的作用[4-8]。Hedgehog信號通路的異常與多種腫瘤的發(fā)生相關(guān),這其中包括成神經(jīng)管細(xì)胞瘤,橫紋肌肉瘤,黑色素瘤,基底細(xì)胞癌,乳腺癌,肺癌,肝癌,前列腺癌,胰腺癌與胃癌[9,10]。Gli1是Hedgehog信號通路中重要的轉(zhuǎn)錄因子,能夠調(diào)控Hh通路下游重要的靶基因[11-15]。本課題研究小組前期研究發(fā)現(xiàn),胃癌組織中Gli1顯著高表達(dá),并且與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移成正相關(guān),但其具體的細(xì)胞學(xué)機(jī)制并不清楚。另外還發(fā)現(xiàn)人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(Human telomerase reverse transcriptase,h TERT)在胃癌組織中也高表達(dá),更重要的是,我們發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)h TERT與Gli1在胃癌組織中的表達(dá)兩者之間存在明顯的正相關(guān),但兩者之間具體的調(diào)控關(guān)系并不清楚。目的本課題旨在探究Hedghog信號通路重要的轉(zhuǎn)錄因子Gli1在胃癌中發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制,觀察hTERT對Gli1表達(dá)調(diào)控的影響,并進(jìn)一步探討h TERT促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制,為基于h TERT的胃癌治療提供理論依據(jù)。方法1.構(gòu)建siRNA干擾胃癌細(xì)胞株SGC-7901細(xì)胞Gli的表達(dá),q RT-PCR和western blot檢測Gli1 m RNA和蛋白的表達(dá)水平。劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)檢測共轉(zhuǎn)染hTERT與siRNA后SGC-7901細(xì)胞的侵襲遷移能力。2.在胃癌細(xì)胞株SGC-7901中過表達(dá)h TERT,檢測h TERT和Gli1的mRNA和蛋白表達(dá)水平。構(gòu)建含有Gli1啟動子序列的熒光素酶報(bào)告基因載體。共轉(zhuǎn)染h TERT載體和PGL3-basic-Gli1熒光素酶報(bào)告基因載體,檢測轉(zhuǎn)染后SGC-7901細(xì)胞的相對熒光素酶活性。結(jié)果1.轉(zhuǎn)染si RNA-Gli降低了Gli mRNA和蛋白表達(dá)水平。2.轉(zhuǎn)染si RNA-Gli顯著降低了過表達(dá)hTERT胃癌細(xì)胞株SGC-7901細(xì)胞在劃痕實(shí)驗(yàn)中的遷移速度。3.轉(zhuǎn)染si RNA-Gli顯著降低了過表達(dá)hTERT胃癌細(xì)胞株SGC-7901細(xì)胞在Transwell實(shí)驗(yàn)中的穿膜數(shù)目。4.過表達(dá)hTERT上調(diào)了胃癌細(xì)胞株SGC-7901細(xì)胞中hTERT和Gli1的mRNA和蛋白表達(dá)水平。5.過表達(dá)h TERT增強(qiáng)Gli1啟動子熒光素酶的相對活性。結(jié)論1.hTERT可通過促進(jìn)Gli1的表達(dá)并進(jìn)而促進(jìn)胃癌細(xì)胞的侵襲與遷移。2.hTERT能夠正向調(diào)控Gli1的表達(dá),其調(diào)控方式是直接靶向作用于Gli1的啟動子區(qū)域。
【關(guān)鍵詞】：Hedgehog通路 Gli1 人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶 胃癌 轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 縮略詞表4-6
• Abstract6-8
• 摘要8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 hTERT調(diào)控Gli1對胃癌細(xì)胞侵襲遷移的影響12-23
• 2.1 引言12
• 2.2 材料和方法12-18
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-22
• 2.4 討論22-23
• 第三章 hTERT在胃癌中調(diào)控Gli1的分子機(jī)制研究23-39
• 3.1 引言23
• 3.2 材料與方法23-34
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果34-37
• 3.4 討論37-39
• 全文總結(jié)39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 文獻(xiàn)綜述 Hedgehog-Gli信號通路與胃癌的研究進(jìn)展45-55
• 參考文獻(xiàn)50-55
• 附件55-56
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文56-57
• 致謝57

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本文編號：850780