本文關(guān)鍵詞：鈉鈣交換蛋白（NCX1）在食管鱗狀細胞癌上的表達及其與臨床參數(shù)的關(guān)系

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【摘要】：目的:食管癌是我國常見的消化道惡性腫瘤之一,由于其早期癥狀不明顯,當病人出現(xiàn)癥狀就診時已處于中晚期,已失去手術(shù)根治治療的可能,嚴重危害人們的身體健康,但其發(fā)病的分子機制目前還不清楚。上個世紀70年代,Reuter和Seitz在心肌缺血再灌注損傷研究過程中首次在豚鼠心肌中發(fā)現(xiàn)鈉鈣交換蛋白(Na+/Ca2+exchanger,NCX1)。在未來的數(shù)十年里,人們在心肌缺血再灌注及腦缺血上,對NCX進行了大量的研究。NCX1是一非ATP依賴的雙向轉(zhuǎn)運蛋白,廣泛存在于人體各種細胞膜表面。它有兩種工作模式:其一是Ca2+外流模式,其二為Ca2+內(nèi)流模式。NCX1轉(zhuǎn)運的比例是3個Na+和1個Ca2+。細胞正常情況下,NCX1啟動正向的轉(zhuǎn)運模式,從細胞中排除鈣離子,轉(zhuǎn)入鈉離子。人們研究中發(fā)現(xiàn),當腦組織及心肌組織缺血缺氧的情況下,NCX1會啟用其反向轉(zhuǎn)運模式[1,2,3,4],此外,細胞在缺血缺氧的情況下,會發(fā)生糖酵解來供能,產(chǎn)生乳酸鹽和氫離子,氫離子被鈉氫交換蛋白(NHX1)排除胞外,同時轉(zhuǎn)入鈉離子,鈉離子濃度的上升,也刺激NCX1反向模式的啟動,最終導致明顯的增加鈣離子的內(nèi)流,使心肌或腦細胞發(fā)生功能障礙,甚至調(diào)亡。NCX1在細胞生命活動中究竟啟動哪種模式,主要取決于細胞膜倆側(cè)的Ca2+、Na+、H+離子的濃度[5],另外缺血缺氧產(chǎn)生的自由基使NCX1啟動反向轉(zhuǎn)運模式[3]。我們知道,腫瘤組織由于腫瘤細胞增殖速度要快于其再生血管的速度,造成腫瘤組織中血管分布不均,形成腫瘤組織中的缺氧區(qū),有研究表明腫瘤組織中有超過50%以上的缺氧區(qū),可能是腫瘤細胞對低氧環(huán)境適應(yīng)的原因,其優(yōu)先利用糖酵解而非氧化磷酸來獲取ATP,即使處于有氧環(huán)境中也是如此,腫瘤這種能量代謝特征早在上個世紀20年代由化學家Warburg首次發(fā)現(xiàn),并命名為Warburg效應(yīng)[6]。腫瘤糖酵解產(chǎn)生的乳酸鹽及氫離子[7-9],經(jīng)研究顯示氫離子同樣經(jīng)NHX1排除,并轉(zhuǎn)入鈉離子,細胞內(nèi)鈉離子濃度上升。大量研究證實NHX1在多種腫瘤上表達上調(diào)[10-12]。至此我們發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞有著激活NCX1反向轉(zhuǎn)運模式、引起鈣離子內(nèi)流的先天自身條件,即缺氧和特殊的糖酵解代謝供能方式。由于鈣離子內(nèi)流在細胞生命周期中的作用十分豐富。鈣離子的內(nèi)流在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起到了重要作用,并在前列腺癌、乳腺癌等腫瘤上得到了證明[13-16]。有研究已經(jīng)證實NCXl通過調(diào)節(jié)鈣離子的內(nèi)流參與了胰腺癌的發(fā)生及發(fā)展,那么NCX1在食管鱗狀細胞癌生長過程中的活性及表達情況、能否引起鈣離子的內(nèi)流,內(nèi)流的鈣離子又參與什么生命活動?這些問題目前還未見有關(guān)報道。經(jīng)查閱大量文獻我們發(fā)現(xiàn)食管癌以糖酵解的供能方式非�；钴S[17],且NHX1與食管癌的發(fā)展也有著密切關(guān)系[18]。本研究初步目的:鈉鈣交換蛋白(NCX1)在食管鱗狀細胞癌上的表達情況及其與臨床參數(shù)的關(guān)系。方法:收集79例手術(shù)切除的食管鱗狀細胞癌組織及癌旁正常組織,分別用RT-PCR及Western blot技術(shù)來見檢測NCX1的m RNA及蛋白表達情況,利用免疫組化技術(shù)檢測ncx1的表達區(qū)域及表達量情況,并將癌組織與正常組織的NCX1蛋白及m RNA的表達情況與相關(guān)臨床參數(shù)進行統(tǒng)計學分析,本研究資料統(tǒng)計方法:采用SPSS13.0版軟件包進行統(tǒng)計分析,計量資料采用t檢驗,計數(shù)資料采用χ2或校正χ2檢驗。結(jié)果:1 NCX1的m RNA在食管鱗狀細胞癌組織和相應(yīng)的癌旁正常食管組織中的表達及其與食管鱗狀細胞癌患者臨床病理學參數(shù)之間的關(guān)系79例食管鱗狀細胞癌組織與相應(yīng)的癌旁正常食管組織中均見到NCX1的m RNA的表達,但79例食管鱗狀細胞癌患者中,52例患者癌組織NCX1的m RNA的表達水平明顯高于與其相對應(yīng)的癌旁正常食管組織,27例患者癌組織NCX1的m RNA的表達水平與其相對應(yīng)的癌旁正常食管組織相比,未見明顯增高。異常增高表達率達65.8%。NCX1 m RNA的表達水平與食管鱗狀細胞癌患者的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小、吸煙史、腫瘤生長部位呈正相關(guān)。臨床分期高的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達率高于臨床分期低的患者(χ2=9.712,P=0.008);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達率要高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者(χ2=6.381,P=0.012);腫瘤體大的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達率高于腫瘤體較小的患者(χ2=9.465,P=0.009);有吸煙史的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達率高于無吸煙史的患者(χ2=7.098,P=0.008);此外下、中段食管生長腫瘤的患者,其NCX1 m RNA的異常增高表達率高于上段食管腫瘤患者(χ2=10.26,P=0.006);NCX1 m RNA的表達水平與食管鱗狀細胞癌患者的年齡(χ2=1.649,P=0.199)、性別(χ2=0.238,P=0.626)、腫瘤分化程度(χ2=3.365,P=0.186)、飲酒史(χ2=0.201,P=0.654)均無相關(guān)性。2 NCX1的蛋白在食管鱗狀細胞癌組織和相應(yīng)的癌旁正常食管組織中的表達及其與食管鱗狀細胞癌患者臨床病理學參數(shù)之間的關(guān)系免疫組化結(jié)果顯示NCX1蛋白主要表達在細胞膜上,79例食管鱗狀細胞癌組織與相應(yīng)的癌旁正常食管組織中均見到NCX1蛋白的表達,但79例食管鱗狀細胞癌患者中,53例患者癌組織NCX1蛋白的表達水平明顯高于與其相對應(yīng)的癌旁正常食管組織,26例患者癌組織NCX1蛋白的表達水平與其相對應(yīng)的癌旁正常食管組織相比,未見明顯改變。異常增高表達率達67.08%。NCX1蛋白的表達水平與食管鱗狀細胞癌患者的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小、吸煙史、腫瘤生長部位呈正相關(guān)。臨床分期高的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達率高于臨床分期低的患者(χ2=15.332,P=0.000);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達率要高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者(χ2=7.905,P=0.005);腫瘤體大的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達率高于腫瘤體較小的患者(χ2=10.418,P=0.005);有吸煙史的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達率高于無吸煙史的患者(χ2=4.665,P=0.031);此外下、中段食管生長腫瘤的患者,其NCX1蛋白的異常增高表達率高于上段食管腫瘤患者(χ2=6.706,P=0.035);NCX1蛋白的表達水平與食管鱗狀細胞癌患者的年齡(χ2=1.070,P=0.301)、性別(χ2=0.145,P=0.703)、腫瘤分化程度(χ2=0.869,P=0.648)、飲酒史(χ2=0.051,P=0.821)均無相關(guān)性。結(jié)論:1 NCX1在食管鱗狀細胞癌上的表達上調(diào)可能是食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展中的一個重要機制。2 NCX1可能是通過提高細胞中鈣的含量,打破了細胞中的原有的鈣平衡,來實現(xiàn)腫瘤細胞的增值、轉(zhuǎn)移的。3 NCX1在食管鱗狀細胞癌的表達水平情況可能與臨床預(yù)后有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：NCX1 食管鱗狀細胞癌 RT-PCR 鈣離子 Western blot
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.1
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-12
• 英文縮寫12-13
• 前言13-14
• 材料與方法14-25
• 結(jié)果25-27
• 附圖27-31
• 附表31-34
• 討論34-37
• 結(jié)論37
• 參考文獻37-43
• 綜述腫瘤鈣信號調(diào)節(jié)機制的改變與腫瘤關(guān)系的研究進展43-55
• 參考文獻49-55
• 致謝55-56
• 個人簡歷56

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉劍;王峰;何煒;王留興;樊青霞;;鈉氫交換蛋白1基因在體外對食管癌KYSE-70細胞增殖和侵襲作用的影響[J];腫瘤;2013年02期

2 James T Taylor;Jonathan E Pottle;Kevin Lee;Alun R Wang;Stephenie G Yi;Jennifer A S Scruggs;Suresh S Sikka;;Calcium signaling and T-type calcium channels in cancer cell cycling[J];World Journal of Gastroenterology;2008年32期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 于蓮珍;消化道腫瘤（胃癌、食管癌）的代謝特征和代謝標志物的研究[D];南京醫(yī)科大學;2012年

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本文編號：848441