本文關(guān)鍵詞：中草藥貓眼草提取物誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡的研究

  更多相關(guān)文章： 貓眼草 胃癌 SGC-7901 MTT法 流式細(xì)胞術(shù) 免疫組化

【摘要】：目的觀察貓眼草提取物在體外誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖抑制作用;探討貓眼草誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細(xì)胞細(xì)胞凋亡的能力,并分析其可能發(fā)生的作用機制。方法采用體外培養(yǎng)技術(shù),以不同濃度貓眼草(0.2 g/L,0.4 g/L,0.8 g/L,1.6g/L,3.2 g/L)作用于人胃癌SGC-7901細(xì)胞,用MTT比色法檢測不同濃度的貓眼草對人胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖的影響;熒光顯微鏡下觀察SGC-7901細(xì)胞凋亡形態(tài)變化;應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測SGC-7901細(xì)胞的細(xì)胞凋亡率及凋亡周期變化;通過免疫組化法檢測胃癌SGC-7901細(xì)胞中Bcl-2蛋白的表達情況。結(jié)果1、MTT法測定不同濃度貓眼草的對胃癌細(xì)胞SGC-7901作用24h、48h、72h均有明顯的抑制作用,與對照組相比有顯著的差異性(P0.05),且隨著作用時間的延長,其產(chǎn)生的抑制作用越明顯,表現(xiàn)出時間及劑量依賴性。2、相差顯微鏡下觀察不同濃度的貓眼草處理的SGC-7901細(xì)胞后與對照組相比,實驗組細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了明顯的變化,生長緩慢,其貼壁狀態(tài)差,細(xì)胞邊緣不整、出現(xiàn)皺縮、變圓,形態(tài)變差,失去了正常細(xì)胞形態(tài)。3、熒光顯微鏡下觀察不同濃度的貓眼草處理的SGC-7901細(xì)胞后,與對照組相比實驗組細(xì)胞較對照組細(xì)胞生長緩慢較稀疏,細(xì)胞體積變圓、變小,細(xì)胞核出現(xiàn)固縮,細(xì)胞質(zhì)濃縮;折光性變強,呈現(xiàn)不規(guī)則形狀,呈致密強熒光,DNA濃縮并向核膜靠攏,有少量凋亡小體形成4、流式細(xì)胞儀細(xì)胞周期分析顯示,細(xì)胞經(jīng)貓眼草處理后,在G1和S期細(xì)胞數(shù)比率減少,而在G2/M期細(xì)胞數(shù)比率增加,貓眼草可能通過阻斷胃癌SGC-7901細(xì)胞在G2/M期,誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞凋亡,且細(xì)胞周期阻滯效應(yīng)和凋亡率均呈劑量依賴性。5、細(xì)胞免疫組化結(jié)果表明,SGC-7901細(xì)胞胞漿內(nèi)有Bcl-2表達,棕黃色顆粒較多,強陽性細(xì)胞較多,棕黃色顆粒增多,大部分表達較強,隨著貓眼草濃度的加大,SGC-7901細(xì)胞表達Bcl-2蛋白隨著時間、劑量的增加而陽性表達率明顯降低,著色變淡,強陽性染色的比例減少,棕黃色不表達或較弱表達。結(jié)論1.MTT結(jié)果顯示,在一定范圍內(nèi)貓眼草可明顯抑制胃癌SGC-7901細(xì)胞的生長增殖,與對照組相比均有顯著的差異性(P0.05),并隨著劑量的增加和時間的延長,凋亡率越發(fā)明顯。2.通過倒置相差顯微鏡和熒光顯微鏡的觀察,鏡下見細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯變化,可清楚的看到凋亡小體,證實了貓眼草提取物可誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細(xì)胞發(fā)生凋亡。3.流式細(xì)胞術(shù)表明不同濃度的貓眼草可以改變細(xì)胞周期,實驗表明細(xì)胞周期G2/M期抑制比率增加明顯,表明貓眼草可阻滯SGC-7901細(xì)胞在G2/M期并誘導(dǎo)其凋亡。4.免疫組化顯示不同藥物濃度貓眼草作用于人胃癌SGC-7901細(xì)胞,結(jié)果表明SGC-7901細(xì)胞中Bcl-2蛋白的表達下調(diào),細(xì)胞凋亡可能與貓眼草下調(diào)Bcl-2的表達有關(guān),Bcl-2作為抑制細(xì)胞凋亡的基因之一,下調(diào)Bcl-2基因可能是誘導(dǎo)凋亡的重要作用機制。
【關(guān)鍵詞】：貓眼草 胃癌 SGC-7901 MTT法 流式細(xì)胞術(shù) 免疫組化
【學(xué)位授予單位】：延安大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中英文對照縮略詞表4-5
• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 引言10-14
• 材料與方法14-22
• 結(jié)果22-28
• 討論28-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-37
• 綜述37-43
• 參考文獻41-43
• 致謝43-44
• 碩士期間發(fā)表論文44

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李峰;王寧;;貓眼草治療刺瘊[J];中國民間療法;2009年06期

2 馬明祥，，劉禾生;貓眼草治雜癥[J];遼寧中醫(yī)雜志;1995年08期

3 陳學(xué)文;貓眼草抑菌活性初步研究[J];寧夏農(nóng)林科技;2005年05期

4 余海忠;劉慧宏;王海燕;廖雪義;;中草藥貓眼草活性物質(zhì)應(yīng)用研究進展[J];安徽農(nóng)學(xué)通報;2007年21期

5 張建功;;貓眼草治療外科急性炎癥[J];赤腳醫(yī)生;1975年05期

6 張華;;貓眼草治療刺瘊[J];遼寧中醫(yī)雜志;1981年05期

7 肖寶紅;張春玲;張蓉;王英年;;中藥貓眼草抑癌作用的動物實驗[J];中國臨床康復(fù);2006年07期

8 ;貓眼草中一種細(xì)胞毒成分的分離和鑒定及其抗腫瘤活性[J];國外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊);1994年01期

9 趙明;吳霜;李軍;唐萬俠;王金蘭;張樹軍;;貓眼草化學(xué)成分研究[J];中國中藥雜志;2014年12期

10 金建玲;張輝;劉波;蔡玉品;高培基;;貓眼草水煎液體外致突變性的研究[J];中國藥理學(xué)通報;2010年02期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 姜山;貓眼草活性成分提取物的肺癌抑制作用及其機制研究[D];中國海洋大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 戎晉華;貓眼草抗氧化、抗腫瘤作用有效成分的研究[D];青島科技大學(xué);2014年

2 王亞萍;中草藥貓眼草提取物誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡的研究[D];延安大學(xué);2015年

3 肖寶紅;貓眼草水提物對小鼠Lewis肺癌增殖的抑制作用及其機制研究[D];青島大學(xué);2005年

本文編號：844759