本文關鍵詞：瘦素促進腫瘤相關巨噬細胞分泌IL-18并影響乳腺癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究

  更多相關文章： 乳腺癌 腫瘤微環(huán)境 腫瘤相關巨噬細胞 IL-18 侵襲轉(zhuǎn)移

【摘要】：目的：本課題主要研究腫瘤相關巨噬細胞(TAMs)在瘦素(leptin)作用下,對乳腺癌進展的影響,以及對相關作用機制進行探討,為乳腺癌研究和治療提供實驗依據(jù)。方法：1.首先用佛波酯(PMA)刺激人單核細胞THP1使其貼壁,然后加入白細胞介素4(IL-4)共同作用,誘導單核細胞分化為TAMs。2.瘦素作用于TAMs之后,收集條件培養(yǎng)基以處理乳腺癌細胞,通過侵襲實驗和劃痕實驗檢測乳腺癌細胞的侵襲遷移變化。3.分別采用qRT-PCR、Western Blotting和ELISA,檢測leptin對TAMs、乳腺癌細胞中IL-18表達和分泌的影響,并分析相關信號通路。4.免疫組織化學(IHC)檢測病人乳腺疾病樣本中TAMs和IL-18的表達；建立裸鼠乳腺癌移植模型,瘤內(nèi)注射巨噬細胞去除劑氯弗松(CCL),研究移植瘤生長和肝肺轉(zhuǎn)移的變化,并用IHC檢測leptin處理組裸鼠瘤體內(nèi)IL-18表達的變化。結果：1.PMA. IL-4作用后,THP1被誘導分化為貼壁的M2型巨噬細胞。2.采用leptin處理TAMs后的條件培養(yǎng)基作用于乳腺癌細胞MCF-7、SKBR-3和MDA-MB-231。實驗結果證明：leptin可通過促進TAMs表達分泌IL-18,從而促進腫瘤細胞的侵襲轉(zhuǎn)移。3. leptin促進TAMs表達分泌IL-18,主要是通過激活細胞信號通路NF-κB,從而上調(diào)IL-18轉(zhuǎn)錄因子NF-κB1而實現(xiàn)的(P0.01)；而leptin刺激乳腺癌細胞MCF-7表達分泌IL-18的機制,主要為通過激活細胞信號通路PBK/Akt,從而上調(diào)IL-18轉(zhuǎn)錄因子ATF-2 (P＜0.01)。4.臨床病人樣本分析結果顯示,CD163(M2型巨噬細胞標記分子)和IL-18的表達與乳腺癌的惡性程度關系密切(P0.05)；裸鼠移植瘤實驗表明,去除巨噬細胞的作用后,Leptin處理組的IL-18表達顯著降低(P0.05)；且巨噬細胞的耗竭可以減慢裸鼠乳腺癌的生長,減少肺轉(zhuǎn)移。結論：1.leptin可促進TAMs、乳腺癌細胞表達分泌IL-18,進而促進了腫瘤細胞的侵襲轉(zhuǎn)移。2. Leptin促進TAMs表達分泌IL-18與激活NF-κB信號通路之后,上調(diào)IL-18轉(zhuǎn)錄因子NF-κB1相關；在乳腺癌細胞MCF-7中主要是激活信號通路PBK/Akt,并作用于轉(zhuǎn)錄因子ATF-2引起。此結果證明,在乳腺癌腫瘤微環(huán)境中,leptin可同時促進腫瘤相關巨噬細胞和乳腺癌細胞IL-18的表達,但這兩種細胞是通過激活不同的信號通路,上調(diào)不同IL-18轉(zhuǎn)錄因子引起的。3. Leptin、CD163和IL-18的水平與乳腺癌的惡性程度密切相關。裸鼠移植瘤試驗中,應用CCL.去除巨噬細胞的作用后,瘤體IL-18表達水平降低,腫瘤生長減慢和肺轉(zhuǎn)移減少。
【關鍵詞】：乳腺癌 腫瘤微環(huán)境 腫瘤相關巨噬細胞 IL-18 侵襲轉(zhuǎn)移
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-13
• 第一部分：Leptin作用的腫瘤相關巨噬細胞對乳腺癌細胞侵襲和轉(zhuǎn)移的影響13-23
• 1 材料與方法13-18
• 2 結果18-21
• 3 討論21-23
• 第二部分：Leptin促進腫瘤相關巨噬細胞分泌促炎因子IL-18的機制研究23-33
• 1 材料與方法23-28
• 2 結果28-31
• 3 討論31-33
• 第三部分：Leptin誘導TAMs表達分泌IL-18對裸鼠乳腺癌的影響33-41
• 1 材料與方法33-36
• 2 結果36-40
• 3 討論40-41
• 全文總結41-42
• 參考文獻42-46
• 文獻綜述46-52
• 參考文獻48-52
• 致謝52-53
• 攻讀碩士期間發(fā)表的學術論文53

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本文編號：835756