本文關(guān)鍵詞：miR-125a-5p調(diào)控BRMS1基因表達(dá)抑制胃癌侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： MiR-125a-5p BRMS1 胃癌 侵襲和轉(zhuǎn)移

【摘要】：目的:已經(jīng)有報(bào)道證實(shí)了miR-125a-5p作為一個(gè)抑癌因子存在于多種腫瘤當(dāng)中。調(diào)查研究miR-125a-5p表達(dá)與胃癌患者臨床病理學(xué)特點(diǎn)的關(guān)系,探究miR-125a-5p影響胃癌侵襲轉(zhuǎn)移過程中的機(jī)制,闡明miR-125a-5p通過調(diào)控BRMS1蛋白表達(dá)抑制胃癌的侵襲轉(zhuǎn)移。希望通過此研究能使我們更清楚地了解胃癌。材料方法:選取2種正常的胃粘膜細(xì)胞系(GES1,HFE145),4種不同惡性程度的胃癌細(xì)胞系(SGC7901,HGC27,MKN28,BGC823)。同時(shí)收集82例于2010年2月至2012年11月在南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院行根治性手術(shù)的胃癌患者的胃正常組織、胃癌組織、胃癌轉(zhuǎn)移瘤及臨床病理學(xué)資料。臨床病理學(xué)資料包括:年齡、性別、癌腫直徑、癌腫部位、分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移、腹膜轉(zhuǎn)移及TNM分期。利用實(shí)時(shí)定量PCR分別測定各個(gè)細(xì)胞系及各組織中的miR-125a-5p的表達(dá)水平;運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析miR-125a-5p表達(dá)與臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系;繪制生存曲線并分析miR-125a-5p表達(dá)水平對患者預(yù)后影響;侵襲遷移實(shí)驗(yàn)證明miR-125a-5p的表達(dá)水平影響胃癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力。生物學(xué)軟件預(yù)測BRMS1基因?yàn)閙iR-125a-5p的靶基因,利用熒光素酶實(shí)驗(yàn)證明兩個(gè)之間存在結(jié)合位點(diǎn)。Western-Blot實(shí)驗(yàn)測定胃癌組織和細(xì)胞中BRMS1表達(dá)水平。結(jié)果:實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果表明胃癌細(xì)胞系和胃癌組織中miR-125a-5p的表達(dá)相比胃正常細(xì)胞系和胃正常組織都是低表達(dá)的。結(jié)合臨床病理學(xué)資料統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果顯示miR-125a-5p的表達(dá)水平與胃癌的淋巴轉(zhuǎn)移(P=0.034),腹膜轉(zhuǎn)移(P=0.030)及TNM分期(P=0.025)等參數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,與年齡、性別、腫瘤大小及位置無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。生存曲線結(jié)果證明miR-125a-5p高表達(dá)患者遠(yuǎn)期生存時(shí)間比低表達(dá)患者要長(P=0.0092)。熒光素酶實(shí)驗(yàn)證明miR-125a-5p與BRMS1的m RNA之間存在相應(yīng)的結(jié)合位點(diǎn)。Western-Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明BRMS1蛋白表達(dá)在胃癌細(xì)胞中表達(dá)水平受miR-125a-5p調(diào)控:上調(diào)胃癌細(xì)胞(SGC7901及HGC27)miR-125a-5p表達(dá),BRMS1蛋白表達(dá)水平也升高;下調(diào)胃癌細(xì)胞(BGC823)miR-125a-5p表達(dá),BRMS1蛋白表達(dá)水平也下降。侵襲遷移實(shí)驗(yàn)證實(shí)miR-125a-5p的表達(dá)水平影響胃癌細(xì)胞的侵襲和遷移能力,并且是通過miR-125a-5p—BRMS1通路發(fā)揮作用的。結(jié)論:1、MiR-125a-5p的表達(dá)水平與胃癌淋巴轉(zhuǎn)移、腹膜轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān),并且影響胃癌患者遠(yuǎn)期生存時(shí)間;2、MiR-125a-5p調(diào)控BRMS1蛋白的表達(dá)并影響胃癌細(xì)胞的侵襲遷移能力,參與胃癌轉(zhuǎn)移進(jìn)程。
【關(guān)鍵詞】：MiR-125a-5p BRMS1 胃癌 侵襲和轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-13
• 1.1 胃癌的發(fā)病、診斷、治療現(xiàn)狀10
• 1.2 BRMS1及其在胃癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用10-11
• 1.3 MicroRNAs及MiR-125a-5p11
• 1.4 MiR-125a-5p與BRMS1、胃癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系11-13
• 第2章 材料與方法13-27
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料13-16
• 2.1.1 細(xì)胞株13
• 2.1.2 患者資料13
• 2.1.3 標(biāo)本資料13
• 2.1.4 主要試劑與耗材13-15
• 2.1.5 主要儀器15-16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-26
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)16
• 2.2.2 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染16-17
• 2.2.3 實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)17-19
• 2.2.4 Transwell小室實(shí)驗(yàn)19-20
• 2.2.5 Western-Blot實(shí)驗(yàn)20-24
• 2.2.6 熒光素酶實(shí)驗(yàn)24-25
• 2.2.7 TNM分期標(biāo)準(zhǔn)25-26
• 2.3 統(tǒng)計(jì)方法26-27
• 第3章 結(jié)果27-37
• 3.1 MiR-125a-5p在細(xì)胞和組織中表達(dá)情況27-28
• 3.2 MiR-125a-5p與患者臨床特點(diǎn)和預(yù)后的關(guān)系28-30
• 3.3 MiR-125a-5p影響胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移30-32
• 3.4 BRMS1是miR-125a-5p的潛在目的基因32
• 3.5 BRMS1的表達(dá)與miR-125a-5p表達(dá)的關(guān)系32-33
• 3.6 MiR-125a-5p在胃癌細(xì)胞中調(diào)控BRMS1蛋白表達(dá)33-35
• 3.7 MiR-125a-5p調(diào)控BRMS1表達(dá)抑制胃癌轉(zhuǎn)移35-37
• 第4章 討論37-40
• 第5章 結(jié)論與展望40-41
• 5.1 結(jié)論40
• 5.2 展望40-41
• 致謝41-42
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果45-46
• 綜述 MiR-125家族與胃癌患者轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系46-50
• 參考文獻(xiàn)49-50

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本文編號：831022